二甲双胍在il-6诱导胃癌细胞emt中的作用

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1、学校代码10459.学号或申请号201212443400.密级公开.硕士学位论文二甲双胍在IL-6诱导胃癌细胞EMT中的作用作者姓名：单争争导师姓名：樊青霞教授王峰副教授学科门类：医学专业名称：肿瘤学毕业院系：郑州大学第一临床医学院完成时间：2015年05月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheeffectofmetforminonepithelialmesenchymaltransformationofhumangastricadenocarcinom

2、acellByShanZhengzhengSupervisor:Prof.QingxiaFanProf.FengWangTheDepartmentofOncology,TheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,Henanprovince,P.R.ChinaMarch,2015原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含其他任何个人或集体己经发表或撰写的科研成果。对本文的

3、研宄作出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确的方式表明。本人的法律责任由本人承担。学位论文作者：專#参曰期:年了月4曰学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品及知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或者其它复制手段保存论文和汇编学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍然为

4、郑州大学。保密论文在解密后应遵循此规定。学位论文作者：系.旁日期:>/J年了月乂曰摘要二甲双胍在IL-6诱导的胃癌细胞EMT中的作用硕士单争争导师樊青霞王峰（郑州大学第一附属医院河南郑州450052）摘要研究背景：胃癌是目前人类最常见的消化道恶性肿瘤之一，其死亡率占相关肿瘤死亡率的第二位。现阶段胃癌的发病原因和机制尚未完全清楚，由于早期无较为明显地症状，因此很多病人在前来确诊时就已经有局部或远处的浸润和转移，严重影响肿瘤患者的治疗及预后。上皮间质转化(epithelialmesenchymaltransition，EMT)是一系列生物

5、学过程，是上皮细胞为适应环境而引发的，其特征性表现为上皮细胞向间质细胞转化，在多种恶性肿瘤的侵袭和转移方面都起着至关重要的作用，尤其是上皮细胞来源的消化道肿瘤方面。因此，对EMT过程进行深入探究,不仅为消化系肿瘤的预防和治疗提供方向，也将为消化系肿瘤患者的预后和抗肿瘤药物的应用提供依据。二甲双胍是一种临床上广泛使用的双胍类降糖药物，作为胰岛素增敏剂主要针对2型糖尿病的治疗。大量研究表明，二甲双胍通过细胞能量代谢，细胞周期蛋白以及microRNA的调节能抑制肿瘤细胞的生长。最新的研究进展提示，二甲双胍能抑制多种恶性肿瘤的EMT进程，从而

6、影响肿瘤进展及预后。本研究通过检测二甲双胍对IL-6诱导的胃癌细胞EMT模型的生长，侵袭迁移能力的改变，相关基因的转录与表达初步探讨二甲双胍对胃癌细胞EMT的影响。目的：探讨双胍类降糖药二甲双胍对IL-6诱导的胃癌细胞SGC7901上皮间质转化的作用。I摘要方法：采用IL-6体外刺激的方法培养SGC7901，构建EMT模型,于倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;根据实验目的将SGC7901细胞进行分组，可分为SGC7901-ctr组，SGC7901+M组，SGC7901-IL-6组和SGC7901-IL-6+M组；MTT法检测二甲双胍对

7、细胞增殖的影响；流式细胞术检测二甲双胍对SGC7901细胞周期的影响；细胞划痕修复实验检测二甲双胍对细胞增殖及迁移的影响，RT-PCR及westernblot检测EMT相关的重要标志分子E-cadherin，N-cadherin，Vimentin和Twist1在mRNA和蛋白表达水平上的变化情况。结果：1.倒置显微镜下观察各组实验细胞形态学差异，IL-6能诱导胃癌细胞SGC-7901发生一系列形态学的改变，由典型的上皮细胞样细胞形态向间质细胞样形态转化，多数细胞排列较为松散，形态表现为类似成纤维状，部分细胞呈梭形，纺锤体形，较之普通S

8、GC7901细胞有典型的形态学变化。2.MTT法检测各组实验细胞增殖能力的变化，二甲双胍能显著抑制胃癌细胞SGC7901的增殖促进细胞凋亡，SGC7901-IL-6组较SGC7901-ctr组有明显地生长增殖优势（P<0