饲料添加剂对斑点叉尾鮰皮表粘膜健康和柱状病易感性的影响

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1、学校代码：10264研究生学号：M120107180上海海洋大学硕士学位论文题目：饲料添加剂对斑点叉尾鮰皮表粘膜健康和柱状病易感性的影响Impactoffeedadditivesonsurfacemucosalhealthand英文题目：columnarissusceptibilityinchannelcatfishfingerlings,Ictaluruspunctatus专业：动物遗传育种与繁殖研究方向：水产动物病理/基因组学姓名：赵弘刚指导教师：李家乐教授二O一五年六月上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风

2、。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描

3、等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注王群华东师范大学教授主席汪桂玲上海海洋大学副教授委员白志毅上海海洋大学副教授委员牛东红上海海洋大学副教授秘书答辩地点水产与生命学院C217答辩日期2015.6.4上海海洋大学硕士学位论文饲料添加剂对斑点叉尾鮰粘膜健康和柱状病易感性的影响摘要目前水产养殖需要关注的地方是饲料添加剂和配方的提高，这些提升可以给集约养殖的鱼群提供完整的粘膜免疫和保护。近

4、来，人们把重点都倾向于鱼类肠道健康而不是例如皮肤和鳃等粘膜表面。这些外表面也是病原体附着和入侵的目标。作为柱状病（columnarisdisease）的病原体，柱状黄杆菌（Flavobacteriumcolumnare）是当下最流行的淡水致病细菌。它能感染鲶鱼，鲑鱼，饵料鱼及其他水产品种。该病主要感染鱼体皮肤和鳃表面。之前的研究表明差异表达的黏蛋白(MUC)以及一系列鼠李糖结合凝集素(RBL)与柱状杆菌的粘附和发病机理有关，因此，我们利用两种商业饲料添加剂，Actigen®（ACT）和Allzyme®SSF（ASSF）来研究它们对柱状病的影响。其

5、中Actigen®含有从酵母细胞壁提取的甘露寡糖（MOS），Allzyme®SSF包含了由黑曲霉发酵菌株产生的多种酶。更加重要得是，通过本实验我们可以探索是否商用MOS能与之前的鼠李糖和乳糖添加剂效果一样，通过使RBL受体饱和来阻止病原体的侵入。通过8周，四种饲料的投喂实验(基础饲料，基础饲料+ACT，基础饲料+ASSF，基础饲料+ACT和ASSF)，各组的斑点叉尾鮰鱼苗生长良好(FCR<1.0)，但是没有显著生长形状差异。8周之后，在预实验的基础上，对对照组，ACT组及ASSF组的鱼进行柱状黄杆菌感染实验。结果显示，投喂两种商业饲料的鱼明显比对

6、照组鱼存活更长时间(P<0.05)且ACT组的鱼有最高的存活率(32%,P<0.05)。在感染实验的基础上，我们使用RNA-seq对感染前后投喂ACT和对照组的鱼鳃部组织进行转录组分析。通过比对，我们一共发现4593个显著表达基因。基因分析显示ACT鱼在感染之后RBL表达显著减少，促炎症反应降低（如IL17和SCYA109）和黏蛋白显著提升（例如MUC2，MUC109）。基因通路与富集研究结果表明由0小时甘露糖受体DEC205与IL4信号引起的表达变化（感染实验前）可能解释了两组饲料处理组间引起存活率差异的原因。饲料中的甘露糖能引导炎症细胞因子的

7、下调表达，促进机体进行自我更新与修复相关的免疫反应。综观来说，本实验表明ACT作为饲料添加剂能有效减少柱状病对鲶鱼的危害。I上海海洋大学硕士学位论文关键词：斑点叉尾鮰，柱状黄杆菌，RNA-seq，甘露寡聚糖，益生元，营养基因组学II上海海洋大学硕士学位论文ImpactofFeedAdditivesonSurfaceMucosalHealthandColumnarisSusceptibilityinChannelCatfishFingerlings,IctaluruspunctatusABSTRACTOneofthehighestprioritya

8、reasforimprovementinaquacultureisthedevelopmentofdietaryadditivesand