血管生成素-2（angiopoietin-2）调节小鼠下肢缺血血管生成的研究

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1、中图分类号：R96硕士学位论文血管生成素-2(Angiopoietin_2)调节小鼠下肢缺血血管生成的研究院（系)、所药学…院研究生姓名闫锴学科、专业药理学导师姓名剑波主授二〇—五年四月四川医科大学毕业硕士研究生学位论文独创性声明及发表承诺书本人声明所呈交的学位论文（已整理成发表形式）是我个人在四川医科大学导师指导下，由导师及四川医科大学提供一切科研条件的情况下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在即将

2、毕业离校之际，本人郑重承诺：该论文将以四川医科大学的名义发表（论文作者为研究生及导师，作者所在单位为四川医科大学)，并在发表后立即将发表论文原件（期刊）寄与导师1册。四川医科大学学位论文版权使用授权书本人完全了解四川医科大学有关保留、使用学位论文的规定，g卩：四川医科大学有权保留并向有关部门或机构送交本人学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，允许有关部门或机构以电子出版物形式出版发行，并对外进行全文内容服务。本人授权四川医科大学可以将本人学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，进行数字化处理汇编、通过网络或其它途径进行交流传播，可以公布学位

3、论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印、扫描或其他复制手段保存和汇编学位论文，即四川医科大学具有本人学位论文的数字化制品复制权、信息网络传播权和汇编权。同时授权将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《万方数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。保密口，在..年解密后适用本授权书。本人提交的学位论文属不保密口学位il日期地址及邮政编码：日期純一年厂奸曰联系电话：联系电话:电子信箱：四川医科大学硕士学位论文目录1血管生成素‐2（Angiopoietin‐2）调节小鼠下肢缺血血管生成的研究…………………………………………………………11.1中文摘要…

4、……………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言……………………………………………………………61.4材料与方法……………………………………………………91.5结果……………………………………………………………291.6讨论……………………………………………………………381.7结论……………………………………………………………411.8参考文献………………………………………………………431.9英汉缩略词对照表……………………………………………472致谢………………………………………………………

5、……483肿瘤血管病变与血管正常化研究进展（综述）……………49四川医科大学硕士学位论文血管生成素-2(Angiopoietin-2)调节小鼠下肢缺血血管生成的研究摘要目的：研究血管生成素-2（Angiopoietin-2）在下肢缺血模型的实验小鼠中，对缺血部位血管生成的作用机制。方法：1.建立C57/BL6小鼠下肢缺血模型及腹腔给药：麻醉实验小鼠后，经股深动脉下缘和腘动脉上缘结扎实验小鼠左侧股动脉干支，并且离断双结之间股动脉干支，缝合皮肤，复温后，应用激光多普勒仪记录实验小鼠双下肢血流灌注情况，在结扎前（pre），1d，3d，5d，8d，各记录一次血流情况

6、。计算左腿与右腿的血流比值，即结扎侧与非结扎侧的比值。将实验小鼠分为两组，对照组和给药组，各组为3只实验小鼠，对照组经腹腔注射给予等量的生理盐水，给药组腹腔注射重组人血管生成素-2（recombination-human-Ang-2），在结扎日（1d），3d，5d，各给药一次。在第8d处死实验小鼠，经下腔静脉取抗凝血，离心，取上清液；取双侧下肢肌肉，包括内收肌和腓肠肌。2.ELISA法检测血清中rh-Ang-2的含量：取实验小鼠离心后的血清，按ELISA试剂盒操作说明检测血清中rh-Ang-2的含量。3.实时荧光定量PCR分析待测组织样品中目的基因的表达：用

7、液氮研磨实验小鼠肌肉组织，用trizol裂解研碎的组织，传统法抽提总RNA，琼脂糖凝胶电泳分析所提RNA质量，逆转录合成cDNA，实时荧光定量PCR仪分析目的基因的表达，包括Ang-1，Ang-2，PDGF-BB，PDGFR-β，VEGF-A,VEGF-C。1四川医科大学硕士学位论文4.应用免疫荧光法分析小鼠肌肉血管生成情况：取小鼠下肢肌肉，以4%多聚甲醛固定，送病理科以石蜡包埋，并制成病理切片，用anti-α-SMA做免疫荧光分析，靶向标记血管周细胞，计算新生血管的平均管径。5.体外血管平滑肌细胞培养研究Ang-2对PDGF-BB信号通路的影响：用培养皿培

8、养人脐静脉血管平滑肌细胞（HUVSMC），设置4各组