番茄中与病害密切相关mirna的功能分析

《番茄中与病害密切相关mirna的功能分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、犬ｉｌ嫂－大學ＤＡＬＩＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕士字位记文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ番莉中与病害密切相关ｍｉＲＮＡ的功能分析Ｉ学科专业生物化工作者姓名孙广鑫指耳教ＩＭ栾雨时副教授２０１５年６９日答辩日期月硕士学位论文番前中与病害密切相关ｍｉＲＮＡ的功能分析ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆｍｉＲＮＡｓｃｌｏｓｅｌｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙｉｎｔｏｍａｔｏ作者姓名：孙广

2、鑫．学科、专业：生物化工学号：２１２１８１２１指导教师：楽雨时副教授完成日期：２０１５年５月大違理工大摩ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｒ大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果一。与我同工作的同志对本研究所做的贡献均巳在论文中做了明确的说明并表示了

3、谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文题目：卷知？為爲彩切掘表吨作者签名：珠ｆ条日期：读年６月／２＾日？．大连理工大学硕士学位论文摘要一ｎＭｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ是类在生物体内普遍存在的长度约２２ｔ的内源性非编码小）分子ＲＮＡ。近年的研究表明，ｍｉＲＮＡ在植物与病原物互作过程中起着重要的调节作用。。当病原物侵染番前时，常造成严重的病害，给番前的生产带来较大的经济损失虽然，目前关于番燕中与病害相关ｍｉＲＮＡ已有研究，但是，关于番燕中与病害密切相关ｍｉＲＮＡ。的研宄还不系统

4、基于上述状况，本研宄利用生物信息学方法，挖掘到番前中与病害密切相关的ｍｉＲＮＡ，并通过生物学实验方法探宄了关键ｍｉＲＮＡ的功能。首先，本研宄通过搜集文献和ｍｉＲＢａｓｅ数据库，找到了番痴中３４个ｍｉＲＮＡ的表达与病害相关，釆用生物信息学方法预测它们的範基因，利用Ｃｙｔｏｓｃａｐｅ软件构建ｍｉＲＮＡ间的调控网络，从中蹄选出１３个与病害密切相关的ｍｉＲＮＡ。根据各ｍｉＲＮＡ之间关联一性的大小及其与病害相关ＩＥ基因的多少６９、ｍｉＲ４８２、ｍｉＲ５３００、，又进步选出ｍｉＲ１ｍｉＲ６０２４、ｍｉＲ６０２６和ｍｉＲ６０２７共６个关键

5、ｍｉＲＮＡ，并对其进行了ＩＥ基因功能分析、启动子分析及实时定量ＰＣＲ验证。，为全面深入研宄ｍｉＲＮＡ的作用机制奠定了基础其次，挑出最为关键的ｍｉＲ４８２ｂ和ｍｉＲ６０２４作为本文的重点研宄对象，釆用实时定量ＰＣＲ技术分析了二者的组织特异性，以及在病原菌和ＳＡ胁迫下两个ｍｉＲＮＡ与其紀基因的表达模式。结果发现，且，两个ｍｉＲＮＡ在叶中的表达量均高于根和莲中的均能对上述胁迫做出响应，并与各自靴基因呈负相关。暗示这两个ｍｉＲＮＡ可能通过调控範基因的表达进而参与番煎对逆境的胁迫响应过程。一最后，为了进步探究ｍｉＲ４８２ｂ和ｍｉＲ

6、６０２４的功能及作用机制，本文分别克隆了番郝中的ＭＩＲ４Ｓ２ｂ和ＭＩＲ６０２４基因，成功构建了相应的过表达载体及瞬时转化体系，并获得了转基因番前植株。经检测发现，，转基因番前中ｍｉＲ４８２ｂ的表达量上调其相应ＩＥ基因的表达量出现不同程度的下调，且提高了病原菌对番琉的致病能力。多项结果表明ｍｉＲ４８２ｂ和ｍｉＲ６０２４可能在番煎响应逆境胁迫过程中均起着重要作用。、总之，挖掘及鉴定了番本研究通过生物信息学与生物学实验相结合的手段，预测痴中与病害密切相关的ｍｉＲＮＡ，并对其进行了相关功能分析。不仅可以加深人们对植。物与病原

7、物互作机制的了解，同时也可为番琉的抗病育种奠定基础关键词：ｍｉＲＮＡ基因病原物；乾；番庙；－－Ｉ番煎中与病害密切相关ｍｉＲＮＡ的功能分析ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｓｉｓｏｆｍｉＲＮＡｓｃｌｏｓｅｌａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｙｙａｔｈｏｅｎｉｃｉｔｙｉｎｔｏｍａｔｏｐｇＡｂｓｔｒａｃｔＭｉｃｒｏＲＮＡｓ（ｍｉＲＮＡｓ）ａｒｅａｃｌａｓｓｏｆｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ，ｎｏｎｃｏｄｉｎｇＲＮＡｓｏｆ２２ｎｔａｎｄｗｉｄｅｌｙｅｘｉｓｔｉｎｏｒｇａｎｉｓｍ．Ｔｈｅｒｅ

8、ｃｅｎｔｓｔｕｄｉｅｓｈａｖｅｓｈｏｗｎｔｈａｔｍｉＲＮＡｌａｙｓａｎｉｍｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎ，