石榴木质素生物合成关键基因及myb转录因子的克隆与表达

《石榴木质素生物合成关键基因及myb转录因子的克隆与表达》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、．：１０３６４分类号：Ｓ６６５４单位代妈；：学号：１２７７２密銀２００复後泉咎义ｆ学位论文石懼木质素生物合咸关键基因及ＭＹＢ转录因子的克隆与表达Ｃｌｏｎｉｎｇａ凸ｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎ马ｌｙｓｉｓｏｆｇｅｎｅｓａｎｄＭＹＢｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｌｉｇｎｉｎｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｔｈｗａｐｙｉｎｏｍｅｒａｎａｔｅＰｕｎｉｃａｒａｎａｔｕｍＬ．ｐｇ（ｇ）研究生：Ｗ丹＃指导教师：张水明副教授合作指导教师

2、：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿申请学位口类级别：农学硕±专业领域名称：果树学研充方向：果巧种质搔源与生物巧术育种所在学院：园艺学院Ａ＿。答辩委员会主席：＼１二〇—五年六月独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方夕ｈ论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成巧，也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢

3、意。学位论文作者签名：聲舟落／签字曰期：＾女年女月女曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文件，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业火学可＾＾将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，收录到《中国学位论文全文数据库》，可＾心采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）。；学位论文作者签名：杂年章指导教师签名ｒ皆）

4、签字日期：文年＾月矣日签字円期：年女月女日工学位论文作者毕业后去向：作单位：屯话：通信地址：邮编；摘要石榴（PunicagranatumL.）具有广泛的经济价值，集食用、观赏、绿化、药用于一体。石榴籽粒包含假种皮、种皮和种仁三个部分，其中硬籽石榴中种皮木质素含量较高，食用不便，而软籽石榴中种皮木质素含量较低，核软可食，无需吐籽，是珍贵的石榴种质资源。目前关于石榴软籽性状形成的分子机制研究较少，本试验以3个不同籽粒硬度的石榴品种“突尼斯软籽”、“会理软籽”和“红玉石籽”为试材，采用RACE技术克隆木质素生

5、物合成途径关键基因和MYB转录因子基因，qRT-PCR技术监测上述基因在石榴不同组织、不同发育时期和不同品种石榴种皮中的相对表达量，探讨其在石榴木质素生物合成中的表达调控，为进一步研究石榴软籽性状形成机理奠定基础。试验获得的主要结果如下：1、获得木质素生物合成关键基因PgPAL的3′端序列和PgCCR、PgCOMT、PgLAC的cDNA全长序列。生物信息学分析表明，PgPAL氨基酸序列与蓖麻、葡萄、欧洲大叶杨的一致性均为90%。PgCCR（GenBank登录号：KM881713）序列全长1269bp，编码区（CDS）为1017bp，编码

6、338个氨基酸，其氨基酸序列与橡胶树、沙梨、大麻槿、冈尼桉、欧洲大叶杨的一致性超过82%。PgCOMT（GenBank登录号：KJ713968）序列全长1456bp，编码区（CDS）为1113bp，编码370个氨基酸，其氨基酸序列与仙女扇、蓖麻、扁桃、赤桉的一致性超过86%。PgLAC（GeneBank登录号：KM881711）序列全长2128bp，编码区（CDS）为1716bp，编码571个氨基酸，其氨基酸序列与葡萄、茸毛烟草、可可树、苹果的一致性超过80%。2、克隆到MYB转录因子基因PgMYB和PgMYB1，生物信息学分析表明Pg

7、MYB和PgMYB1的N端都具有两个MYBDNA结合结构域，是植物中典型的R2R3-MYB转录因子。其中PgMYB（GenBank登录号：KM014568）序列全长为1088bp，编码区（CDS）为921bp，编码306个氨基酸，其氨基酸序列与银合欢、杨树、拟南芥的一致性超过84%。PgMYB1（GenBank登录号：KM881712）序列全长987bp，编码区（CDS）为792bp，编码263个氨基酸，其氨基酸序列与金鱼草、可可树、巨桉、茸毛烟草的一致性超过71%。3、荧光定量分析表达发现，木质素生物合成关键基因和MYB转录因子基因在

8、石榴的叶片、花瓣和茎中均有不同程度的表达，PgCCR、PgCOMT、PgLAC和PgMYB均是在茎中相对表达量最高，其次是在花瓣中表达较高，叶片中相对表达量最低，PgPAL和PgMYB1则是在花瓣中相对表达