蜻蜓凤梨pin-formed基因的克隆及功能鉴定

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1、学校代码：咖学号：分类号：密级洛大營硕士学位论文题目：鋳蜓凤梨基因的克隆及功能鉴定作者：张学全指导教师：徐立研究员李志英研究员专业：作物遗传育种时间二〇一五年五月CloningandfuncationidentificationoiPIN-FORMEDfromAechmeafasciataAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinAgricultureByZhangXue-quanSupervisor:LvMajor:CropGeneticsand

2、BreedingSubmittedtime:May,2015海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研宂做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名曰期：上年玄月々曰学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，卩：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文

3、被查阅和借阅。学校可以为存在馆际合作关系兄弟高校用户提供文献传递服务和交换服务。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：政冷全剧輕名：曰期年■月曰’曰期：知：年月曰本人己经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“高校学位论文全文数库”中全文发布，并可按“章程”中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：￥半年：口一年：口二年发布。导师签名：日期：年月日摘要生产上，人们常利用乙烯诱导凤梨科植物开花

4、，使其花期一致，满足市场要求。虽然乙烯诱导凤梨科植物开花已经成为栽培中常用的技术，但其分子机理尚不清楚。有研宄表明，生长素处理凤梨科植物也能促进其内源乙烯的产生，从而促进开花。而乙烯和生长素之间有着密切的联系，能够相互影响，均在植物生长发育过程中起着重要作用。近年来有研宄表明，生长素运输载体￡通过调控生长素的极性运输参与拟南芥的花原基形成推测生长素运输载体在乙烯诱导凤梨科植物开花过程中发挥作用。为了证明这一推测，本研宄通过对蜻蜓凤梨转录组测序的数据分析中获得的一个跟同源的基因，利用克隆技术，技术，染色体步移技术对蜻蜓凤梨中的进行了相关的研宂。主要结

5、果如下：基因获得：根据对转录组数据分析获得的基因片段，利用克隆技术获得蜻蜓凤梨中的命名为见基因的序列全长开放阅读框编码，编码个氨基酸；序列比对分析表明：雅测的氨基酸序列含有的保守结构和一个高度保守的生长素输出载体（，蛋白结构域，与番前、豌豆、芥菜、小麦的同源性分别为，，；系统进化树分析表明：跟番茄的沒？層亲缘关系较近。表达特性分析：蜻蜓凤梨在大株和小株中一天内都有表达，大株中有明显的昼夜节律变化。蜻蜓凤梨大株中的组织特异性表达由高到低为：心叶根尖茎尖，而小株中则为：根尖茎尖心叶。蜻蜓凤梨大株和小株中的都能受到乙烯诱导的响应，大株和小株中的对乙烯诱导

6、的响应时间不同。表达载体构建及功能鉴定：构建过表达载体，利用农杆菌介导的方法将其转化到拟南芥中，通过和技术检测已成功获得转拟南芥苗。通过对代转庙表型观察，结果表明的转的拟南芥晚花；的转拟南芥的茎上有部分花序出现紊乱，同时茎上含有芽状突起。启动子的克隆及功能鉴定：抓的基因组序列和启动子序列的获得，分别为和。基因组序列含有个内含子和个外显子。启动子序列分析表明，可能会受光、脱落酸、茉莉酸甲酯、生长素、低温诱导等响应元件调控，但没有乙烯响应相关的顺式调控元件。将启动子连接报告基因表达载体的构建，利用农杆菌介导法转化烟草愈伤组织进行基因瞬时表达检测，结果表

7、明因的启动子序列具有启动功能。关键词：蜻蜓凤梨；例克隆；生长素；载体构建；启动子克隆AbstractThefloweringofBromeliaceaeplantsinducedbyethylenehasbeenusedwidely,butthemolecularmechanismbehinditkeepsunrevealling.Auxinandethyleneplayanimportantroleintheprocessofplantgrowthanddevelopment.Theyalsohadacloseconnectionandcould

8、promotethesynthesisofeachother.Previousstudiesshowedthatthefl