脑脊液改良抗酸染色法的建立与临床应用

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1、授予单位代码10089学号或申请号13887HebeiMedicalUniversity硕士学位论文在职科学学位脑脊液改良抗酸染色法的建立与临床应用学位申请人：冯建纯导师：吴淑慧副教授专业：病原生物学二级学院：基础医学院2015年3月河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研宄所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任

2、。研宄生签名导师签章二级学院领导盖章：年月日河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导师签章：年月曰目录中文摘要………………………………………………………………………..1英文摘要………………………………………………………………………..5英文缩写………………………………………………………………………10研究论文脑脊液改良抗酸染色法的建立与临床应用前言………………………………………………………………

3、………11材料与方法………………………………………………………………12结果………………………………………………………………………16附图………………………………………………………………………19附表………………………………………………………………………21讨论………………………………………………………………………25结论………………………………………………………………………30参考文献…………………………………………………………………31综述结核性脑膜炎实验室诊断进展..........................................................34致

4、谢……………………………………………………………………………42个人简历………………………………………………………………………43中文摘要脑脊液改良抗酸染色法的建立与临床应用摘要目的:结核性脑膜炎(tuberculousmeningitis,TBM),是由结核分枝杆菌引起的中枢神经系统感染性疾病,是结核病中最严重的类型之一,如不及时治疗其破坏性和预后非常差，所以早期诊断和及时治疗对于降低发病率和死亡率至关重要。结核性脑膜炎的诊断最为困难，往往和病毒性脑膜炎、细菌性脑膜炎、脑膜癌相混淆，很不容易分辨清楚，结核性脑膜炎的诊断[1]以发现结核杆菌或者以培养出结核杆菌作为“金标准”但是因为脑脊液标

5、本量少，而涂片传统抗酸染色和结核菌培养需要大量的脑脊液标本，往[2-3]往对结核杆菌的检出率非常低，传统抗酸染色有报道检出率在10%以内传统结核杆菌培养法罗氏法(Lowenstein-Jensen）需要时间长，大约在4-6[4]周才会检测出结核杆菌的生长，虽然现在有先进的BD液体快速培养技[21]术，但是也往往需要2-3周才会观察到结核杆菌生长，这样往往会耽误病情诊断及后续治疗。血清学方法比较方便，但是缺乏敏感性和特异性，[5]往往作为辅助诊断。近年来，DNA技术以及其他快速培养技术的发展使得检测结核杆菌的时间大大缩短，但由于价格昂贵，不适用于在临床广泛使用。本研究旨在探寻一种快速、高效、

6、经济的临床检测方法便于推广普查结核性脑膜炎的临床检测方法，鉴于抗酸染色是结核杆菌感染的最佳诊断方法但其对结脑患者CSF检出率低，不适用于TBM的普查诊断。因此本研究欲将在传统抗酸染色的基础上建立的改良抗酸染色法和目前临床实验室针对脑结核病进行的多种诊断方法（包括浓缩集菌抗酸染色，传统抗酸染色，脑脊液ADA检测，实时荧光定量PCR技术等）做一个平行比较以及分析在病情发展过程中相互之间的关系，以了解其在TBM诊断中的阳性率，突出改良抗酸染色在对结脑的诊断中阳性率高，准确，操作简便，快速等优点，为改良抗酸染色在临床TBM的筛查提供理论依据。方法：1收集河北省胸科医院2014年1月-2014年10

7、月结核内科和神经内科疑似结核性脑膜炎的64位患者脑脊液216份标本（每位患者采集不低于3份标本且间隔时间都不低于一周），患者都是从14年1月开始新入院。1中文摘要2指标检测：对采集的64位疑似结核性脑膜炎的患者共216份标本进行了改良抗酸染色检查。这216份标本还分别进行了脑脊液常规检查、脑脊液浓缩集菌抗酸染色检查、脑脊液普通涂片染色检查、脑脊液生化检查（项目包括脑脊液葡萄糖测定、脑脊液Cl离子测定、脑脊液蛋白测定、脑脊