稀有鮈鲫kissgpr54基因克隆及17α-乙炔雌二醇暴露对其表达的影响

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1、分类号：0173学校代码：10712UDC：597/599研究生学号：2012050527密级：公i@*灶农林奇牧大学2015届攻读硕士学位研究生学位（毕业）论文稀有鮑鲫Kiss/GPR54基因克隆及17a-乙炔雌二醇暴露对其表达的影响学科专业渔业资源研究方向鱼类环境评价与保护研究生杨彦平指导教师王在照教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌Classificationcode:Q173Universitycode:10712UDC:597/599Postgraduatenumbers:2012050527Confidentialitylevel:PublicThesi

2、sforMaster’sDegreeNorthwestA&FUniversityin2015MolecularidentificationofKiss/GPR54andfunctionanalysiswithmRNAexpressionprofilesexposureto17α-ethinylestradiolinrareminnowGobiocyprisrarusMajorFisheryResourcesResearchfIeldFishEnvironmentalEvaluationandProtectionNameofPostgraduateYangYanping

3、AdviserProf.WangZaizhaoDateofsubmissionMay,2015YanglingShaanxiChina研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用

4、过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间：>/jr年t月#曰导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的硕士研究生；所呈交的硕士学位(毕此）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得“¥究结果!，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。导师签名:时间：年_r月曰关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学

5、位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，必须以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，

6、不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）I稀有鮈鲫Kiss/GPR54基因克隆及17α-乙炔雌二醇暴露对其表达的影响摘要17α-乙炔雌二醇(EE2)是一种具有强雌激素效应的环境内分泌干扰物，也是人工合成口服避孕药的主要成分。它进入水体积累后严重危害人类和野生动物。这些危害主要包括破坏生殖、干扰内分泌平衡、影响生物个体的正常发育以及严重时可能造成水体鱼类的性腺逆转。本实验旨在研究EE

7、2对稀有鮈鲫Kiss/GPR54系统基因表达的影响，并为检测环境中外源性雌激素而筛选可能的生物敏感性标志物。另外，对脑和性腺中kiss1、kiss2、GPR54a、GPR54b基因表达的研究，将有助于探索外源性雌激素通过神经内分泌系统影响稀有鮈鲫生殖发育的可能机制。本研究通过同源克隆技术和RACE技术克隆得到稀有鮈鲫kiss1、kiss2、GPR54a和GPR54b基因的全长cDNA序列。并通过实时定量PCR技术检测这四个基因在稀有鮈鲫成鱼脑、眼睛、鳃、肝脏、肠、肌肉和精卵巢中的组织特异性分布情况。使用孵化后105天的稀有鮈鲫成鱼，采用半静态暴露方法