西南地区柳杉优良无性系组培快繁体系的建立

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1、＋２０２６５０公巧号Ｓ７２２．３７学号Ｓ１１四川巧业大学顾七学位论文西南地区柳杉优良无性系组培快繁体系的建立蒋时猿－指导教师万雪寒巧巧学科专业抹木遗传育种研究方向生物技术在林业方向上的应角２０１５年６月、．．．一，■．．＇．．＇－■－■－－＾ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＲａｐｉｄＰｒｏｐａａｔｉ

2、ｏｎｆｏｒｇＳｕｅｒｉｏｒＣｌｏｎｅｓｏｆＯｙ？份ｗｍＶｚ／ｏＷｗＭｃ／ｐ／Ｈｏｏ化ｒｅｎｋｅｘＯｔｔｏｅｔＤｉｅ化ｉｎＳｏｕ化ｗｅｓｔｏｆＣｈｉｎａｂＴｉｓｓｕｅＣｕｌｔｕｒｅｙＢｙＪｉａｎＳｈｉｉａｏｇｊＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｏｒｆ．ＷａｎＸｕｅｑｉｎＳｕｂｊｅｃｔ：ＦｏｒｅｓｔＧｅｎｅｔｉｃｓａｎｄＴｒｅｅＢｒｅｅｄｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈｄｉｒｅｃｔｉｏｎ；ＡｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＢｉｏ化ｃｈｎｏｌｏｇｙｉｎＦｏｒｅｓｔ

3、ｐｐＣｈｅｎｇｄｕＳｉｃｈｕａｎ，Ｐ．Ｒ．（３ｈｉｎａ化ｎｅ２０１５，论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果，学位论文中不包含其他个。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：爲的知兴达年ｙ月》Ｌ日关于论文使用

4、授巧的声明本人完全了解四川农业大学有关保留，：、使用学位论文的规定即学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可化巧不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。；但４论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＿＂＂（请在Ｗ上□内划Ｖ）研究生签名：義村食年月｝＾日；导师签名：年＾月２巧摘要－柳衫是南方地区主要的用材及园林树种之，在木材生产和生

5、态建设中发挥着重要作用。目前生产上使用的几乎都是实生苗木，良种产量少且不稳定，优势未得到充分发挥，，而其无性繁殖技术尚不成熟，不能满足大规模造林的需求。因此本试验Ｗ无菌条件下萌发的种子苗Ｗ及成年树茎段为外植体，研究不同基本培养基和植物生长调节剂对丛生芽诱导、增殖及生根的影响，建立了完整的组培快繁体系。主要结果如下：（１）栅杉种子组培快繁体系的建立°种子的预处理为：用化３％ＷＡ〇ＫＭｎ〇４溶液２ｈ４５Ｃ的水浸（浸泡，再用始温为．１％（Ｗ／Ｖ）洗衣３０ｍｉｎ泡２４ｈ，使其吸水膨涨

6、。用０粉水浸泡，流水下冲洗５ｈ。种子的预处理能增强灭菌效果，并刺激种子萌发。种子经预处理后，巧八％酒精浸泡２０Ｓ，再用０．１％ＨｇＣｌ２浸泡１０ｍｉｎ的灭菌效果最好，其污染率最低为１０．００％，成活率最高可达８２．巧％。将灭菌后的种子接种于－－ｉ■’．Ｌ仅含薦糖３０和琼脂７Ｌ的空白培养基上，此时萌发的幼苗即为无菌种子苗。ｇｇ－ｉ，－ＢＡ０无菌种子苗诱导丛生芽萌发的最适培养基为ＤＣＲ＋６．２ｍＬｇ，诱导率最高，为７３．３３％，其丛生芽萌发迅速，叶色嫩绿，长势较好，高生长明盈；化生芽

7、増殖的－－ｌｌ？－？＋６ＢＡ０．２ｍＬ＋旧Ａ０Ｌ，最适培养基配方为ＤＣＲｇ．０５Ｉｎｇ，平均株高达到５．６３ｃｍ増一殖倍数达到１１．００适宜的生根培养基为，且丛生芽生长致健壮、茎叶生长正常；——ｉ１‘＋，ＤＣ民＋ＮＡＡ０ｍＬＩＢＡ０．２ｍＬ，生根率为９０．００％，平均生根数为４．０９，生根．０１ｇｇ质量较好，主根数量较多，长且粗壮并有侧根发生；试管苗移栽最适宜的基质是纯河砂，其移栽存活率达到８９％。（２）柳杉茎段组培快繁体系的建立一２％成年树茎段的预处理为：将木质化新稍假植于大

8、棚，每周喷洒定量的０．（Ｗ／Ｖ）的多菌灵溶液进行灭菌预处理。将茎段用洗涂剂溶液浸泡３０ｍｉｎ，刷去表面灰尘，置于流水下冲洗３ｈ，再用０．２％（Ｗ／Ｖ）的多菌灵溶液浸泡３０ｍｉｎ。该预处理一定程度上控制外植体的污染可在。成年树茎段灭菌的最佳方案为７５％酒精灭菌１０ｓ、化ｌ％ＨｇＣｌ２灭菌６ｍｉｎ，此时为１７．３３％污染率较低，成，．６７％，，活率