大针茅响应羊啃食的转录组学分析

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1、分巧号Ｑ５７学校化码１０１２９ＵＤＣ己７７学号２０１３２１１０４７義走落嗦乂＃硕±学位论文大针茅响应羊哨食的转录组学分析Ｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｔ；ｏｍｅａｎａｌｓｉｓｏｆ况Ｚ幻ｒａ巧成文ｒｅｓｏｎｓｅｔｏｓｈｅｅｅａｔｉｎｐｙ女各ｐｐｇ申请人：李春瑞学位类别；工程硕±领域：生物工程指导教师：韩冰教授论文提交日期－：二〇五年六月巧蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｌ义标注和致谢的地方外

2、，论文中不包括其他人巴经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在，与我论文中作了明确的说明并表示谢意。一申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担切相关责任。〕．忘日期．ｂ论文作者签名：寺啼：！／皮＼内蒙古农业大学硏究生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定：，巧研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文王作成果时署省单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者

3、，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电＾公布学位论文的全部或部。１子文档，允许论文被查阅和借阅学校可乂分内容，采用影印、缩印或其他手段保存论文。（保密内容除外）论文作者签《：净秦蛛指导教师签名：媒赤１曰＾仅期：２ｉ摘要大针茅（汉皆曰ｇｒａｎ油？０，属于针茅属光芒組（ｉＳｅｃｆ．Ｃａ护７／细曰６），是多年生密丛型旱生未本科牧草，主要分布于我国内蒙古中东部、东北、宁夏、甘肃和青海境内，由于其基生叶丰富且能很好的保存至冬春，因而是牲畜喜好也是非常重要的牧草之０，进行羊哨食

4、控制实验２本研究＾１大针茅为研究材料。对大针茅受到羊哨食后小时的ＤＳ（实验組）与未哨食处理的大针茅ＤＤ（对照组）叶片做的高通量转录组测序（ＲＮＡｓｅｑｕｅｎｃｅｓ），对得到的转录组数据库随机挑选５个基因，运用实时夷光定量ＰＣＲ手段对其表达量变化进行验证。对转录组数据进行数据统计、差异表达基因分析、〇〇和〇〇〇功能分析，＾及对转录組中的薦糖和淀粉代谢通路相关酶基１＾因表达分析。对大针茅受到羊哨食后化、４ｈ、８ｈ、１化和２４ｈ和未哨食处理作为对照，分析类黄丽代谢通路中的５个关键基因甘、Ｃ甘／、护好、￥ＣＬ和化：￥甘，利用实时夷光定量ＰＣ民对其进行

5、相对表达量的测定。研究得到如下结果：１Ｗ羊哨食后的大针茅为材料，提取总ＲＮＡ进行Ｉｌｈｉｍｉｎａ平台的转录组测序，共得到１４７５６１个ｒｅａｄｓ，組装成６４７３８条Ｕｎｉｇｅｎｅｓ，Ｕｎｉｇｅｎｅｓ平均长度为１３６７．２化口，Ｎ５０为２０１７ｂ，构建转录組数据库ｐ。２５－随机选取转录组数据库中的个基因，萌发素类蛋白、叶绿素ａｂ结合蛋白－３ｃ－ａ、叶绿素ａｂ结合蛋白２、酷氨酸激酶和松油醇合成酶，通过ｑＲＴＰＣ民检测，５个基因上下调趋势与转录组测序结果相符，证明转录组测序结果可靠。３ＤＳ（实验组）与ＤＤ（对照组）共有６４１９９个基因表达，其

6、中ＤＳ与ＤＤ相比．，有４９８４４个基因共同表达，占所有基因的７７６２％ＤＳ（；只在实验组）中的表达基因有３２７３个，占所有基因的５．１％；只在ＤＤＣ对照组）中的表达基因有１１０９３＜＝＞＝如＜＝．．ｉ．个，占所有基因的１７２８％。转录组数据库中满足ｐ００１＆＆ｒａｔｉｏ２ｏｒｒｏ０５（）１７５１３３０１９１４４９４的差异表达的基因共有个，其中上调的基因有个，下调的有个。＇４类黄丽代谢通路中的５个基因Ｃ４町、０？／、巧５町、Ｃ化和化乂巿在２４小时之，内均表现为在羊哨食处理的叶片中基因表达量下调；与类黄酬含量相关性分析表明，’’Ｆｊ５甘和斯

7、王为黄丽类化合物代谢通路中的关键调节酶。５羊哨食后大针茅中类黄丽的含量与对照組相比均有所下降，表明大针茅响应羊哨食次生代谢物质含量下降，与昆虫哨食植物后的应微反应不同。关键词：大针茅；羊哨食；转录组测序；实时夷光定量；类黄丽Ｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｔｏｍｅａｎａｌｓｉｓｏｆ汾＇如ｒａ巧ｃｆｏｒｅｓｏｎｓｅｓｈｅｅｅａｔｉｎｐｙｇｐｐｇＡｂｓｔｒａｃｔ况少幻ｒａＭｆｉ／５ｉｓａｄｅｎｓｅｃｌｕ巧ｅｒｔｅｅｒｅｎ打ｉａｌｈｅｒｂ，ｂｅｌｏ打ｉ打ｔｏ口ｇｙｐｐｇ