天山雪莲细胞培养物体外抗骨质疏松作用研究

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1、犬左拔－大袭ＤＡＬＩＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕士享位论文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ／＾＼■１ｒ－＼＜Ｉ义ｆ資口天山雪莲细胞培养物体外抗骨质疏松作用研究彌虹学科专业作者姓名群帷教胃指导教师包永明教授————２０１５＾６Ｈ９Ｂ答辩日期硕士学位论文天山雪莲细胞培养物体外抗骨质疏松作用研究ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＳａｕｓｓｕｒｅａｉｎｖｏｌｕｃｒａｔａｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｏｎ

2、ａｎ－ｏｓｔｅｏｏｒｏｔｉｐｓｉｓｉｎｖｉｔｒｏ作者姓名：王南学科、专业：生物化工学号：２１２１８０９７指导教师：安利佳教授包永明教授完成日期：２０１５．０６．０９大遠嫂工大摩ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｙｇｙ大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请

3、学位或其他用途使用过的成果一同工作的同志对本研究所做的贡献。与我均巳在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。关＆袖辦杯学位论文题目：工作者签名：日期：年６月日挪天山雪莲细胞培养物体外抗骨质疏松作用研究摘要骨质疏松症现已成为全球性的公共健康问题。成骨细胞介导骨形成和破骨细胞介导骨吸收，二者动态平衡被破坏是引发骨质疏松的内在原因。天山雪莲ＱＳａｕｓｓｕｒｅａｌｔ，．），ｉｎｖｏｕｃｒａｔａＫａｒ．ｅＫｉｒＳｉｎｖｏｌｕｃｒａｔａ是我国稀有的传

4、统名贵药材具有补肾活血，强。筋骨，温肾助阳等功效雪莲培养物是采用现代生物技术而获得的愈伤组织团块或细胞，其药理及功效研究是当今天山雪莲研究及开发的热点。本论文研究是以人成骨细胞ＭＧ－山雪莲细胞培养物对成骨细胞增殖６３为对象，探究天、发育的影响及作用机制，以小鼠巨噬细胞ＲＡＷ２６４．７作为破骨前体细胞，探讨其对破骨细胞形成的影响以及对成熟破骨细胞的作用。ＲＡＷ２６４－ＫＢ受体活化因子（．７细胞在核因子配体ＲＡＮＫＬ）诱导下分化为破骨细胞。雪莲培养物的加入可抑制破骨细胞的形成，并且剂量依赖性地降低抗酒石

5、酸酸性憐酸酶－（ＴＲＡＰ）活性。对己形成的破骨细胞，乳酸脱氧酶（ＬＤＨ）活性检测和ＡｉｍｅｘｉｎＶＰＩ一ＬＤＨ双染流式细胞术结果致，雪莲培养物可破坏破骨细胞细胞膜，增加胞外酶活，一－诱导破骨细胞凋亡。ＲＴＰＣＲ结果进步说明，天山雪莲细胞培养物通过下调ＴＲＡＰ和－９基质金属蛋白酶（ＭＭＰ）ｍＲＮＡ表达抑制破骨细胞骨吸收功能。－６３．２．以ＭＧ细胞为研究对象，黄酮浓度为３１５ｉ／ｍＬ和６２５／ｍＬ，ＭＴＴ结果表明＾ｇ＾ｇ的天山雪莲细胞培养物对成骨细胞无细胞毒性，１２５＾ｉｇ／ｍＬ浓度下有细胞毒性。

6、天山雪莲细胞培养物可显著提高碱性磷酸酶（ＡＬＰ）活性从而促进其早期分化山雪莲细胞；天－培养物还可提高胶原蛋白中的４经脯氨酸含量，并促进矿化结节形成，从而促进成骨细胞矿化，ＯＰＧ／ＲＡＮＫＬ表达比值，从而影响骨形成活性。以３８特异性抑；同时并上调ｐ制剂ＳＢ２０３５８０干预成骨细胞，结果表明ＳＢ２０３５８０显著抑制天山雪莲细胞培养物对成骨细胞增殖、ＡＬＰ活性、矿化结节形成的促进作用以及对胶原蛋白积累量的提高作用；并抑制天山雪莲细胞培养物对成骨细胞ＯＰＧ／ＲＡＮＫＬ表达的上调，说明天山雪莲细胞培养物可通过

7、调控ｐ３８ＭＡＰＫ信号通路来促进成骨细胞骨形成活性。综上，天山雪莲细胞培养物对破骨细胞形成具有抑制作用，并能破坏己形成的破骨细胞，降低骨吸收活性，；同时能够促进成骨细胞增殖、分化和矿化，表明天山雪莲在细胞水平上具有潜在的抗骨质疏松功效。关键词－：天山雪莲细胞培养物骨质疏松成骨细胞ＭＧ６３巨瘦细胞；；人；小鼠ＲＡＷ２６４．７；ｐ３８丝裂素活化蛋白激酶通路－Ｉ－大连理工大学硕士学位论文ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆＳａｕｓｓｕｒｅａｉｎｖｏｌｕｃｒａｔｅｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｏｎ－

8、ｏｓｒｏｓａｎｔｉｔｅｏｏｉｓｉｎｖｉｔｒｏｐＡｂｓｔｒａｃｔＯｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄａｓａｌｏｂａｌｕｂｌｉｃｈｅａｌｔｈｉｓｓｕｅｉｓｃａｕｓｅｄｂｔｈｅｉｍｂａｌａｎｃｅｐ，ｇｐ，ｙｂｅｔｗｅｅｎｂｏｎｅｆｏｒ