探究金银花有效成分的提取工艺及指纹图谱表征研究

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1、中南大学硕士学位论文金银花有效成分的提取工艺及指纹图谱表征研究姓名：赵国玲申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：刘佳佳20030315硕十学位论文摘要I{金银花为忍冬科(却，j而』如c∞0植物忍冬(￡伽jc啪伽D门jca劢脚厶)的干燥花蕾，为中医常用药，具有清热解毒，凉风散热、抗病毒、保肝利胆的功能。其主要活性成分为绿原酸和异绿原酸，别的药性成分还有黄酮类、挥发油等：译文主要研究了金银花中主要成份的提取工艺、金银花提取物的高效液相色谱分析以及金银花提取物的抑菌作用。在金银花提取工艺的研究中，对水提法、醇提法、水

2、提醇沉法以及酶解法各种方法进行了详细的研究，分别以提取物的得率和绿原酸的得率来比较各种方法的优劣。实验结果可知：以绿原酸得率作为指标来考察各种方法的优劣，尤以酶解法为最好，绿原酸的得率可达到12．82％，其次为醇提法较好，绿原酸的得率为10．05％；以提取物的得率作为指标来考察，也是以酶解法为最好，提取物的得率可达到37．63％，而其他方法较低。由此对酶解法，探讨了酶用蓐、酶处理时间、酶处理温度及酶的联合作用对绿原酸得率的影响。晦处理时间和酶用量对绿原酸得率有相同的效果，即减少酶用量，增加酶处理时间可以达到增加酶用

3、量，但减少酶处理时间同样的效果：纤维素酶处理的最适温度为40℃一50℃。—L／7在对金银花提取物的高效液相色谱分析中，对流动相进行了优化选择，分别实验了甲醇一水一冰醋酸、甲醇一10％磷酸氢二钠(pH=2．7)、甲醇一O．1mol／l磷酸二氢钠溶液(pH=2．7)、乙腈一水一冰醋酸等作为流动相，结果以甲醇一水一冰醋酸(30：70：O．5)为最佳。绿原酸与相邻峰基线分离较好。在此条件下记录297nm、310nm、325nm下三个波长的色谱图，结果波长为325nm的条件为最佳。绿原酸峰的保留值为4．2min，将各色谱峰按

4、大小顺序排列，并列出相应色谱峰的相对面积Ar的计算公式如下：Ar=(待测峰的面积值／参照物的面积值)利用上述公式来建立金银花提取物的高效液相色谱峰的特征峰群，从而将所有色谱图的共有峰作为依据，建立～个金银花的特征指纹图谱。依此可以鉴别金银花的不同品种、不同提取方法、并可鉴别金银花品种的真伪。在金银花提取物的抑菌实验中对13种不同的菌种进行了实验，结果表明金银花的提取物对金黄色葡萄球菌和金莉菌有明显的抑菌堕主堂垡堡兰———————————竺—兰二作用，而对其它菌种无明显抑菌作用。同时测定了金银花提取物对金黄色葡萄球菌

5、和金莉菌的最小抑菌浓度(MIc)，其中对金黄色葡萄球菌金银花提取物的MIC为6．25mg／ml，相对于绿原酸的抑菌浓度为1．8lmg／m1。对金莉菌提取物的MIc为12．50mg／m1，相对于绿原酸的抑菌浓度为3．62mg／ml。关键词：金银花，绿原酸，提取，抑菌，高效液相色谱，指纹图谱堡主兰焦堡壅．—————————!!—里ABSTRACT，吖Ds．肠门ic8阳8isaChinesetraditionalmedicine，whichhaVeseveralbenefitstohumans，includinganti

6、pyretic，antibacte“alarlddetoxifcationfunction．Itsmainactivein口edientsarechlorogenicacid，isochlorogenicacidandflavoneetc．Intheanicle，theextractionprogl’essofchlorogenicacid，}Ⅱ’LCfingerprintanalysisandthebacteriostatictestofextractwerestudied．Inthestudvon爿Ds．fD托

7、icPr口Pextractiontechn0109y，accordingtoextractionyieldandtheyieldofchirogenicacid，s01Ventextractlon、ethanolprecipitation、ethanolextractionandenzymatictreatmentwereinvestigatedindetail．Theresuhsshowedthatusingchlrogenicacidascriterion，enzymatictreatmentwasthebes

8、t，theyieldcanbeupto12．82％，thenthenextwasethanolextraction；andusingextractjonyjeldasstandard，enzymatictreatmentwasthebestaswell，upto37．63％，whiletheotherSwereworse．Sotheef绝ctofenzyme