无乳链球菌浓度与水温对罗非鱼免疫相关基因转录水平的影响

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1、分类号：S941.42+9密级：公开UDC:591.2学号：2111201112硕士学位论文无乳链球菌浓度与水温对罗非鱼免疫相关基因转录水平的影响杨洪帅指导教师：王辉教授串请学位类别：理学硕士专业名称：海洋生物学研究方向：海洋经济动物发育生物学学院名称：水产学院中国•湛江2015年6月考ft铪夂冬科奏J会锒成主席：0^委员:时间：学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研宄所取得的研宄成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以

2、明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：肩涔仏潘4也学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权广东海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于1、保密口，在______年解密后适用本授权书。2、不保密0。(请在以上相应方框内打“V”)作者签名：名；尹小，24年/月i日无乳链球菌浓度与水温对罗非鱼免疫相关基因转录水平的影响摘

3、要本试验选取与罗非鱼抗菌机制(溶菌→抗原呈递→除菌)相关的C型溶菌酶、MHCⅡ、IgM、Hepcidin基因作为研究目标，采用中心复合试验设计和响应曲面分析法，在试验室条件下研究了温度(18-34℃)、无乳链球菌(Streptococcusagalactiae)浓度（0.4-6.4×105cfu/mL）对此4个基因在吉富罗非鱼幼鱼肠(intestine)、肝脏组织(hepatopancreas)基因表达量的联合效应。结果表明：(1)温度一次效应、二次效应对罗非鱼肠、肝脏组织IgM基因表达量均有极显著影响（P<0.01）；无乳链球菌浓度一次效应对基因表达量无显著

4、影响（P>0.05）。只在肠组织，温度与无乳链球菌浓度间互作效应显著（P<0.05），且温度效应大于浓度。分别建立了吉富罗非鱼肠、肝脏IgM基因表达量模型（方程中T代表温度，S代表无乳链球菌）：Y-i=0.89416-0.11213T+0.40982S-5.49×10-3T×S+3.69×10-3T2-0.041717S2Y-h=5.91988-0.49657T-0.3665S+8.25×10-3T×S+0.012332T2+0.027961S2方程决定系数分别为0.9832、0.983，说明方程的拟合度很高；校正系数分别为0.9665、0.9661，模型选择

5、恰当，预测系数分别为0.8329、0.8317，表明可用于吉富罗非鱼IgM基因表达量的预测。（2）温度一次效应、二次效应，以及无乳链球菌浓度一次效应对罗非鱼肠、肝脏组织MHCⅡ基因表达量均有极显著影响（P<0.01）；无乳链球菌浓度二次效应无显著影响（P>0.05）。温度与无乳链球菌浓度间互作效应不显著（P>0.05），且温度效应大于浓度,分别建立了吉富罗非鱼肠、肝脏MHCⅡ基因表达量模型：Y-i=-2.01656+0.15758T+0.12399S-8.02×10-5T×S-2.38×10-3T2-8.37×10-3S2Y-h=-4.99697+0.4338

6、7T-0.10429S+4.79×10-3T×S-7.26×10-3T2+0.012283S2方程决定系数分别为0.9775、0.9843，说明方程的拟合度很高；校正系数分别为0.9551、0.9685，模型选择恰当，预测系数分别为0.7989、0.8694，表明可用于吉富罗非鱼MHCⅡ基因表达量的预测。（3）温度一次效应、二次效应，以及无乳链球菌浓度一次效应对罗非鱼肠、肝脏组织C型溶菌酶基因表达量均有极显著影响（P<0.01）；病菌浓度二次效应不显著（P>0.05）。在肝脏组织双因子互作效应显著（P<0.05），且温度效应大于浓度。分别建立了吉富罗非鱼肠、肝

7、脏C型溶菌酶基因表达量模型：Y-i=7.89294-0.60287T+0.15724S-2.4×10-3T×S+0.012645T2-1.51×10-3S2IY-h=9.08919+-0.71431T+0.14081S-4.76×10-3T×S+0.015534T2+0.010734S2方程决定系数分别为0.983、0.9935，说明方程的拟合度很高；校正系数分别为0.9659、0.9871，模型选择恰当，预测系数分别为0.8591、0.9373，表明可用于吉富罗非鱼C型溶菌酶基因表达量的预测。（4）无乳链球菌浓度的一次、二次效应以及温度的一次效应对罗非鱼肠、

8、肝脏组织Hepcidin基因表达量均有