小麦-多年生簇毛麦渐渗系的鉴定和新型分子标记的分离

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1、職馴ＳＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＥＬＥＣＴＲＯＮＩＣＳＣＩＥＮＣＥＡＮＤＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＯＦＣＨＩＮＡ■Ｅ硕±学位论支ＭＡＳＴＥＲＴＨＥＳＩＳ＊ｌＰ＇－Ｊｊｌｅｅｉｈ—论文题目小麦－多年生簇毛麦渐渗系的鉴定型分子标记的分离和新Ｉ．ｆｌＩ学科专业生物化学与分子生物学．学号２０１２２１０９０３０４作者姓名李东海ｉ指导教师杨足君教授独剑性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加

2、标往和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得电子科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明碗的说明并表示谢意。作者签名：拆啤日期：兴资年６月日论文使用授权本学位论文作者完全了解电子科技大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁。盎，允许论文被查阅和借阅本人授权电子科技大学可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存。、汇

3、编学位论文（保密的学位论文在解密后应遵守此规定）作者签名：戈京导师签名：為—控／曰期：＞《年６月＞１＾３分类号密级注1UDC学位论文小麦-多年生簇毛麦渐渗系的鉴定和新型分子标记的分离（题名和副题名）李东海（作者姓名）指导教师杨足君教授电子科技大学成都（姓名、职称、单位名称）申请学位级别硕士学科专业生物化学与分子生物学提交论文日期2015.04.15论文答辩日期2015.05.20学位授予单位和日期电子科技大学2015年06月答辩委员会主席评阅人注1：注明《国际十进分类法UDC》的类号。Molecularandcytogeneticidenti

4、ficationofwheat-DasypyrumbreviaristatumintrogressionlinesanddevelopmentofnewspecificmarkersAMasterThesisSubmittedtoUniversityofElectronicScienceandTechnologyofChinaMajor:BiochemistryandMolecularBiologyAuthor:DonghaiLiAdvisor:Prof.ZujunYangSchool:SchoolofLifeScienceandTechnology摘要摘

5、要簇毛麦属（Dasypyrum）是小麦野生近缘物种，具有抗旱和抗病等特性，其中一年生二倍体簇毛麦的许多优良抗病基因已经导入小麦背景中，极大的提高了小麦的抗病能力，因此簇毛麦属物种可作为改良小麦品种优异基因源。但是当前对四倍体多年生簇毛麦的研究较少，其优异基因也较少被导入小麦背景中，因此限制了对其优良农艺性状的应用。本研究通过利用小麦与小麦-多年生四倍体簇毛麦部分双二倍体杂交、回交的方法，创制了一系列小麦-多年生四倍体簇毛麦渐渗系材料，丰富了多年生四倍体簇毛麦基因源在小麦育种中的应用。本研究以多年生四倍体簇毛麦全基因组DNA为探针，对小麦-多年生四倍体簇毛麦

6、渐渗系材料进行基因组原位杂交，确定了D2146、D2147、D2148、D2149材料中导入两个多年生四倍体簇毛麦染色体整臂片段，并与两条小麦染色体发生罗伯逊易位。以pTa535、pSc119.2为探针对这四个研究材料进行荧光原位杂交，结果发现两条易位染色体的小麦染色体臂的端部有pSc119.2探针的信号，没有pTa535探针的信号，通过对比小麦pTa535、pSc119.2探针原位杂交标准图，我们确定发生易位的小麦染色体片段是5A的短臂（即5AS）；同时发现导入的多年生四倍体簇毛麦染色体整臂片段的端部有pSc119.2探针的信号，在近端部有微弱的pTa5

7、35探针的信号，通过对比多年生四倍体簇毛麦pTa535、pSc119.2探针原位杂b交标准图，确定导入的外源染色体整臂片段可能是多年生四倍体簇毛麦的1VL、bbbb1VS、2VL、3VL、5VL。为了确定导入小麦背景中的多年生四倍体簇毛麦染色体整臂片段的归属，本研究筛选了145对PLUG引物、256对EST引物和56对COS引物。应用PCR扩增技术结合限制性内切酶酶切分析，发现定位于小麦、水稻或大麦的第5同源群染色体上的TNAC1485、TNAC1554、TNAC1567、TNAC1618、aCINAU157、CINAU446、CINAU448、CINAU

8、455、COS93共9对标记引物在多年生四倍体簇毛麦、小麦-多年生