大熊猫和奶牛粪便中纤维素降解菌的筛选与鉴定

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1、Ｓ８１１分类号：（６单位代０３８９码：密级：学号：１１２０６．？－、＇■、：：福建农林大学硕士学位论文，、大熊猫和奶牛粪便中纤维素降解菌的蹄选与鉴定学科门类：农学一级学科名称：动物科学二级学科名称：动物营养与饲料科学研究方向：动物营养与调控’研究生：曹涵文、．指导教师：梁学武教授『‘－？、二—兒成时间：０五年四月．考Ｊ分类号：Ｓ８１４．６单位代码：１０３８９１１２７００８：学号０６５密级：福建农林大学硕士学位论文大熊猫和奶牛獎便中纤维素降解菌的筛选与鉴定学科门类：农学一级学

2、科名称：动物科学二级学科名称：动物营养与飼料科学研究方向：动物营养与调控研究生：曹涵文指导教师：梁学武教授二—完成时间：０五年四月ＣａｔｅｒｇｏｒｙＮｕｍｂｅｒ：Ｓ８１４．６ＵｎｉｔＣｏｄｅ：１０３８９ＳｅｃｒｅｔＤｅｇｒｅｅ：ＳｔｕｄｅｎｔＮｕｍｂｅｒ：１１２０６５７００８Ｄ＇ｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｆｏｒｍａｓｔｅｒｓｄｅｇｒｅｅｏｆＦＡＦＵＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｅ－ｄｅｌｌｕｌｏｓｅｇｒａｄａｔｉｏｎｂａｃｔｅｒｉａｆｒｏｍａｎｄａｐａｎｄｃｏｗｄｕｎｇ

3、ＣｌａｓｓｏｆＳｕｂｅｃｔ：Ａｒｏｎｏｍｊｇｙｓｔ－ｒｅｅｅｃａＦｉｒｄｅＳｉｌｔｙ：ＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅｇｐ－ｕＳｅｃｏｎｄｄ＾ｒｅｅＳｐｅｃｉａｌｔｙ：ＡｎｉｍａｌＮｔｒｉｔｉｏｎａｎｄＦｅｅｄＳｃｉｅｎｃｅＲｅｓｅａｒｃｈＦｉｅｌｄ：ＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｎｄＲｅｕｌａｔｉｏｎｇｅｒｖｒ－Ｓｕｐｉｓｏ；Ｐｒｏｆ．ＸｕｅｗｕＬｉａｎｇＳｕｂｍｉｔｔｅｄＤａｔｅ：Ａｐｒ，２０１５独创性声明（本人声明，所呈交的学位毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我

4、所知，除了文中作了标注和致谢中已作了答谢的地方外一，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位（毕业）论文作者亲笔签名：舊日期：论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅学校可以公布论文的全部或；部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。口。不保密，本论文属于不保密学位（毕业）论文作者亲笔

5、签名：日期：指导教日期：丨问福建农林大学硕士学位论文摘要本研究以大熊猫和中国荷斯坦奶牛粪便为实验对象，采用形态学观察、菌株的生理生化实验，蹄，、菌株的分子鉴定及酶活性测定等方法选大熊猫和奶牛粪便纤维素降解菌旨在为寻找高效纤维素降解菌提供理论依据。一实验：纤维素降解菌筛选。纤维素降解菌的筛选包括初蹄和复蹄两个阶段。初筛过程是将獎样放入到液体发酵培养基中恒温震荡培养３ｄ，然后将发酵液稀释并在固体培养基，平板中涂布，挑取单菌落进行纯化培养然后将纯化后的菌株滴加到固体培养基中再进行培，养，之后用刚果红染色进行鉴定选取透明水解圈较大的菌株。菌株的复筛主

6、要是测定菌株的ＣＭＣａｓｅ和ＦＰＡａｓｅ两种酶的酶活性，选取酶活性较高的菌株，进行后续的鉴定。本实验分别从大熊猫和中国荷斯坦奶牛粪便样本各筛选出５株纤维素降解菌。二实验：纤维素降解菌鉴定。纤维素降解菌的鉴定包括形态学观察、生理生化实验及分子生物学鉴定等三个方面，观察菌落的。形态学观察主要包括革兰氏染色并观察菌的形状颜色、质地、边缘特征及隆起形状等。生理生化实验参、形状、菌落大小、透明度、光泽度照《伯杰氏细菌鉴定手册》的有关方法进行生理生化测定。包括糖醇的发酵实验、淀粉的水解实验－Ｐ、Ｖ实验、甲基红实验、氧化酶实验、接触酶实验及确酸盐还原反应等。分子生物

7、学鉴定主要通过聚合＿链式反应，测定基因序列，并与Ｇｅｎｂａｎｋ基因库的已知序列进行比对分析，鉴定菌株的种类。经鉴定从大熊猫和中国荷斯坦奶牛粪便中蹄选得到的纤维素降解株菌分别为白色链霉菌（ＮＣ０２０９９０）、假单胞菌（ＮＣ０２０２０９）、芽孢杆菌（ＮＣ０２ｉｒ７１）、克雷伯菌（ＮＣ０１６６１２）、类芽孢杆菌（ＮＣ０１２９１４）和假单胞菌（ＮＣ０２０２０９）、志贺氏菌（ＮＣ００７３８４）、液萝泛菌（ＮＣ０１３９５６）、嗜麦芽寡养单胞菌（ＮＣ０１