吻合血管冷冻保存同种异体骨关节移植免疫学研究

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1、分类密级学校代码10367号UDC编号学号20127031138吻合血管冷冻保存同种异体骨关节移植免疫学研究Immunologicalresearchonthetransplantationofcryopreservedallogeneicosteoarticularwithvessels论文类别:学术研究型作者姓名徐勋指导教师姓名周建生申请学位级别硕士学位授予单位蚌埠医学院学科专业外科学研究方向关节外科论文答辩时间2015年5月学位授予日期2015年6月答辩委员会主席:论文评阅人:2015年5月硕士学位论文吻合血管冷冻保存同种异体骨关节移植论文题目:免疫学研究Immunologicalres

2、earchonthetransplantationofcryopreservedallogeneicosteoarticularwithvessels研究生姓名:徐勋指导教师:周建生学科专业:外科学研究方向:关节外科论文工作时间:2013年8月至2015年3月学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作巧取得的研究成果。本论文中除引文外,所有实验、数据和有关材料巧是真实的。本论文中除引文和致谢的内容外,不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。巧他同志对本研究所做的贡献均己在论文中作了声明并表示了谢意。—"学位论文作者签名:^曰

3、期:少別STrMTi余晏衣_学位论文使用授权声明研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属昭培医学院。学校巧权保存本学位论文的电子和纸质文档,可借閱或上网公布本学位论文的部分或全部巧容,可W采巧影印、复印等手段保存、汇编本学位论文。学校可向国家有。(关机关或机构送艾论文的电子和纸质文档,允许论文被查阅和借阅保密论文在解密后遵守此规定)保密论文注释:本学位论文属于保密论文,密级:保密期限为年。学位论文作者签名:导师签名:巧、种曰期;日期:口目录一、中文摘要………………………………………………………..1二、英文摘要…………………………

4、……………………………..3三、论文正文1、引言……………………………………………………………62、材料与方法………………………………………….….……....83、结果……………………………………….…………................174、讨论……………………………………………………….…..225、结论……………………………………………………….…..286、参考文献……………………………………………………...297、致谢……………………………………………………….......32附录A、英文词汇对照表…………………………………………...33B、综述……………………………………

5、…………………….34吻合血管冷冻保存同种异体骨关节移植免疫学研究中文摘要目的:本实验通过对SD大鼠吻合血管的经冷冻保存同种异体膝关节、未经冷冻的吻合血管的同种异体膝关节移植以及吻合血管同种异体膝关节移植短期应用CyA的手术前后血浆中T淋巴细胞CD25+细胞比例及CD4+/CD8+值变化的检测,以及移植前后血浆中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10含量的测定,观察移植后排斥反应情况,探讨冷冻保存对吻合血管的同种异体骨关节移植的免疫反应的影响。方法:分组情况:SD大鼠55只,其中15只作为膝关节供体,空白对照组10只,吻合血管的同种异体膝关节移植组10例,吻合血管的冷冻保存的同种异体膝关节

6、移植组10例,吻合血管的同种异体膝关节移植术后应用CyA14天10例。参考Yaremchuk等[1]实验模型,将供体股动、静脉留取较长段,然后在腹股沟韧带处切断股动、静脉,同时保留部分肌袖,锯断股骨及胫腓骨,移植时将此带血管的膝关节移植于受体腹部皮下,血管与受体SD大鼠的股动、静脉端端吻合。冷冻组将切取的供体膝关节放入盛有15%DMSO冷冻保护剂的冻存管中,于4℃冰箱中放置1.5小时,然后置于超低温冰箱中,以1℃/min速度降温至-60℃,维持1小时,投入-196℃液氮中保存28天。移植术前自液氮中取出供体膝关节,放入37℃水浴中复温,肝素生理盐水冲洗管腔,去除低温保护剂。术后各组肌注青霉素4

7、万U/kg.d,共用3d;阿司匹林0.3g,潘生丁25mg溶于250ml水中饮用,连续7d。应用环孢霉素A组将CyA溶于99%二甲基间酰胺(DMF),使其浓度达10mg/ml肌注5mg/kg.d,术后当天应用,连续14天。术前及术后1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周、12周抽取各组SD大鼠的外周血,采用流氏细胞仪法检测血浆中T淋巴细胞CD25+细胞比例及CD4+/CD8+值变化。用ELIS

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