刺参体内硒的分离测定及外源硒对其生物学指标的影响

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1、学校代码：10264研究生学号：M120150324上海海洋大学硕士学位论文刺参体内硒的分离测定及外源硒对题目：其生物学指标的影响AMethodforExtractingInorganicSeleniumandOrganicSeleniumandEffect英文题目：ofExogenousSeleniumonBiologicalIndicesinSeacucumber(Apostichopusjaponicas)专业：渔业研究方向：水产养殖姓名：李秀梅杨建敏研究员指导教师：孙国华副研究员二O一五年五月上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论

2、文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版

3、权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学李秀梅硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注孙振兴鲁东大学教授主席赵建民中科院海岸带研究所研究员委员杜荣斌烟台大学教授委员陈建强山东省海洋资源与环境研究院秘书答辩地点山东省海洋资源与环境研究院答辩日期2015-06-09上海海洋大学硕士学位论文刺参体内硒的分离测定及外源硒对其生物学指标的影响摘要本文对刺参(Apostichopusjaponicas)体内无机硒及有机硒的分离提取工艺进行了优化，建立了无机硒和有机硒的分离方法，进而进行了不同地区刺参群体不同组织内硒形态的初步分析，并研

4、究了不同浓度的外源硒对刺参的生物学影响，为研发一种新型绿色水产动物免疫增强剂以及获得天然安全的富含有机硒的刺参提供理论依据。主要研究内容包括：一、无机硒和有机硒的分离方法的建立与优化硒具有提高人体免疫力，对有害物质的解毒及抗衰老作用，是人体所需要的重要微量营养元素之一。硒特殊的生理、生化功能不仅取决于其总浓度水平，而且同硒存在的化学形态以及不同化学形态下硒化物的浓度水平密切相关，无机硒的毒性远远大于有机硒，因此采用准确有效的测定总硒及无机硒含量的方法非常重要。本文通过比较和实验，采用HCl水浴提取法、Tris-HCl-甘油提取法、透析袋透析法及超纯水超声破碎法四种方法进行有机硒和无机硒分

5、离，确定了超纯水超声破碎法浸提无机硒的效果最好。首次通过改变超声破碎的时间、设置不同的水浴时间及水浴温度、改变环己烷萃取次数的技术参数，确立了从刺参样品中提取硒的最优条件，建立和优化了无机硒与有机硒的分离方法，并对测定分析方法进行了方法检I上海海洋大学硕士学位论文出限计算及回收率、精密度实验，在优化的工作条件下，硒浓度为0~30μg/L，与荧光强度有良好的线性关系，线性方程为I=133.06*C+21.76，相关系数r=0.9998，最低检出限为0.0005ng/mL；样品总硒的回收率达到95.43%~99.74%，相对标准偏差为2.48%~5.26%，无机硒的回收率达到92.25%~9

6、5.36%，相对标准偏差为2.73%~6.10%，以上结果表明，测定总硒及无机硒的方法准确度高，重复性好，通过差减法得到的样品的有机硒含量是真实可信的，同时国家标准物质测定值在标准值允许误差范围内，说明该方法准确、可靠，能够满足水产品中总硒的检测要求。二、采用氢化物原子荧光法(HG-AFS)分析不同地区刺参总硒和无机硒的含量及分布规律人体内的硒元素主要是通过吸收食物中的硒而获得，并通过机体的代谢过程将其转化为机体所能利用的形式。而水产品刺参体内的硒含量较高，尤其是可被机体利用的有机硒的含量相当丰富。但刺参体内硒的研究还是比较薄弱，刺参各组织中有机硒和无机硒的比例如何、不同组织间和不同地区

7、间硒含量有何差异以及硒对刺参的生物学作用等方面还缺乏相关研究。本研究旨在探明环境中硒对刺参体内硒含量的影响及不同形态的硒在各组织中的富集代谢情况，为进一步进行分子生物学方面的研究提供参考。本文首次以黄渤海域大连、东营、烟台、青岛、日照五个典型地区刺参群体为研究对象（取样时间为2014年4月份），应用氢化物原子荧光法对刺参体内不同组织硒形态分布进行了初步分析，并比较了不II上海海洋大学硕士学位论文同地区间及不同组织间硒含量差异。结果显