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时间:2019-03-15
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1、季罗,....\分类号密级公开:::夺兴却UDC—学校化码10巧5.如'述鑽诚,穿為#义放索鸾%赫:UNIVERSITYOFSOUTHCHINA.石;硕±学位论文’(专业学位)'.幽‘當、^不閑菊萄糖浓度对HBV表达IflsAg与|—HIkAg的影响—‘'‘|‘|’;為V.1又—:,、.,..細‘;:'一典fe如.琴%^?备胡關漱'"'雜威*、?寺;.攒导教师、职称:宁文锋副主任医师TvT嘗、'JV‘A专业学位类别(领域):临
2、床医学(内科学).卽研究方向:乙型肝炎的基拙与临床研究'奏所在学院;南华大学附属第二临床学院._I議P:临.年.,翁'-'1:..i..命.:.,.,、邊經.縫Wf.,和苗UNIVERSITYOFSOUTHCHINA不同葡萄糖浓度对HBV表法HBsAq及HBeAq的影响论文作者签名:t巧词阁指导教师签名;论文评阅人一1;张秉强睽院,副教授,硕导,重庆医科大学附评阅人2;兰春慧,,副教榜,硕导第H:军睽大举大评医院评阅人3:答辩委员会主席:苏琼,教授,博导,南华大学委员1:杨铭,教按,硕导,永州市中也
3、民院委2;员张明亮,教巧,硕导,南华大举附二睽院委员3;张測二睽院,教授,硕导,南华大学附4委员二民=王m根,副教授,硕导,南华大举附院5委员;6委员:、月日答辩日:年;期y不同葡萄糖浓度对HBV表达HBsAg与HBeAg的影响摘要:目的:观察HepG2.2.15细胞在不同浓度葡萄糖培养基条件下HBsAg及HBeAg的表达差异,并探讨其表达是否与PGC-1a相关,初步研究乙肝病毒与代谢之间的关系。方法:1)本实验通过体外培养HepG2.2.15细胞,MTT法检测不同浓度葡萄糖培养基对HepG2.2.15细胞生长率影响。2)ELISA法分别
4、检测各组培养细胞上清液中HBsAg、HBeAg的表达量。3)荧光定量PCR检测不同葡萄糖浓度培养基下各组细胞PGC-1amRNA的表达差异。结果:1)MTT法检测不同葡萄糖浓度培养基对HepG2.2.15细胞生长率影响:高糖组(35mmol/L)葡萄糖培养基抑制细胞生长。除高糖组(35mmol/L)外,HepG2.2.15细胞在培养24h与48h时各浓度组细胞与正常组比较差异无显著性(P>0.05)。但在培养72h时,低糖组(2mmol/L)及无糖组细胞生长出现不同程度的抑制(P<0.05)。2)HBsAg及HBeAg的动态变化:HepG2.2.15表达HBsAg在72h时出
5、现高峰,HBeAg的高峰出现在96h。在48小时可以观察到两种蛋白的表达量已达到接近高峰。3)观察不同葡萄糖浓度HepG2.2.15表达HBsAg、HBeAg的量:低糖I组(2mmol/L)及无糖组细胞表达HBsAg、HBeAg量分别为(2.474±0.118、2.458±0.135)及(2.667±0.129、2.603±0.179)较正常组(1.450±0.220、1.486±0.186)高,并且差异有显著性(P<0.01)。低糖组(2mmol/L)与无糖组两两比较差异无显著性(P>0.05)。而15mmol/L、25mmol/L组与正常组比较差异无显著性(P>0.05)
6、。4)定量PCR检测不同葡萄糖浓度培养下各细胞中PGC-1amRNA表达差异:HepG2.2.15细胞在低糖组(2mmol/L)及无糖组PGC-1amRNA表达量分别为(1.584±0.134、1.312±0.199)较正常组(0.930±0.123)高,并且差异有显著性(P<0.05),低糖(2mmol/L)及无糖组之间差异也有显著性(P<0.05)。而15mmol/L、25mmol/L组与正常组比较无明显差异(P>0.05)。结论:1)低糖可能增强HBV表达HBsAg及HBeAg。2)低糖改变时能促进PGC-1a的表达量。3)低糖可能通过促进PGC-1a的表达促进HBV表
7、达HBsAg及HBeAg。关键词:乙肝病毒;转录因子;代谢;过氧化体增值活化受体r辅助活化因子aIISTUDYOFDIFFERENTCONCENTRATIONOFGLUCOSEIMPACTINGHBVEXPRESSINGOFHBsAgANDHBeAgHuYuanyuan(Gastroenterology)DirectedbyNingWenfengAbstract:Objective:ToobserveHepG2.2.15expressingHBsAgandHBeAgindifferentconcentr
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