trim29蛋白在非小细胞肺癌增殖、侵袭及顺铂化疗过程中的作用

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1、单位代码:10025分类号:R65学号:112012000151密级:CapitalMedicalUniversity博士学位论文TRIM29蛋白在非小细胞肺癌增殖、侵袭及顺铂化疗过程中的作用TheeffectofTRIM29oncellproliferation,invasionandcisplatinchemotherapyofnon-small-celllungcancer研究生:刘春晓学科专业:外科学(胸心外)指导教师:李辉导师单位:首都医科大学附属北京朝阳医院完成日期:二○一五年四月首都医科大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导

2、师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名:日期:年月日导师签名:日期:年月日首都医科大学博士学位论文目录中文摘要……………………………………………………………………………1英文摘要……………………………………………………………………………3前言…………………………………………………………………………………6第一部分TRIM29蛋白在非小细胞肺癌中的表达………

3、……………………8引言………………………………………………………………………………8材料和方法………………………………………………………………………8实验结果………………………………………………………………………10讨论………………………………………………………………………………13第二部分TRIM29对肺鳞癌NCI-H520细胞增殖、侵袭能力的影响……………15引言………………………………………………………………………………15材料和方法………………………………………………………………………15实验结果………………………………………………………………………

4、…23讨论………………………………………………………………………………25第三部分TRIM29对肺鳞癌NCI-H520细胞顺铂敏感性的影响………………29引言………………………………………………………………………………29材料和方法………………………………………………………………………29实验结果………………………………………………………………………30讨论………………………………………………………………………………33结论…………………………………………………………………………………39文献综述…………………………………………………………………………40参

5、考文献…………………………………………………………………………56附录…………………………………………………………………………………68攻读学位期间发表文章情况……………………………………………………69致谢………………………………………………………………………………70个人简历…………………………………………………………………………71首都医科大学博士学位论文TRIM29蛋白在非小细胞肺癌增殖、侵袭及顺铂化疗过程中的作用摘要目的:肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤之一。肺癌的临床治疗包括外科手术、化学治疗、放射治疗及分子靶向治疗等多学科综合治疗。对肺癌发生发

6、展分子机制的研究能为肺癌的治疗提供新的靶点。以往的研究表明,TRIM29在多种肿瘤组织中表达异常增高,但对其具体作用的研究仍较少。本课题旨在研究TRIM29在非小细胞肺癌增殖、侵袭及顺铂化疗过程中的作用,为肺癌的治疗提供新的靶点。方法:(1)采用免疫组化的方法检测TRIM29在非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织中的表达,并分析TRIM29在两者之间的差异,及其与临床病理因素之间的关系。(2)将针对TRIM29的siRNA导入NCI-H520细胞;用RealtimePCR和Westernblotting法检测TRIM29基因及蛋白的表达情况;MTT法和Trans

7、well小室法检测细胞的增殖和侵袭能力。(3)利用siRNA干扰NCI-H520细胞中TRIM29的表达,Westernblotting法检测促凋亡因子Bax、凋亡抑制因子Bcl-2的变化情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:(1)TRIM29在癌旁正常肺组织中呈阴性表达,而在非小细胞肺癌组织中的阳性率为63%(63/100)。TRIM29的高表达在不同年龄及性别之间无统计学差异(P>0.05),而与组织类型、TNM分期以及区域淋巴结转移密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)将特异性siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及阴性

8、对照siRNA(siRNANC)转入NCI-H520

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