tgf-β_3与牙髓干细胞联合bio-oss骨粉在动物骨缺损修复中的作用研究

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1、分类号：密级：学号：2012409132单位代码：10759石河子大学硕士学位论文TGF-β3与牙髓干细胞联合Bio-oss骨粉在动物骨缺损修复中的作用研究学位申请人吴中明指导教师木合塔尔·霍加申请学位类别临床医学硕士专业名称临床医学研究领域肿瘤学所在学院医学院中国·新疆·石河子2015年6月EffectofTGF-β3andDentalPulpStemCellsCombinedwithBio-ossBoneMealinAnimalBoneDefectRepairADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFu

2、lfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineByWuZhongming(Oncology)DissertationSupervisor:Prof.MuhetaerHuojiaJune,2015摘要目的探索TGF-β3与牙髓干细胞（DPSCs）联合Bio-oss骨粉在兔牙槽骨缺损修复中的作用。方法（1）从新西兰幼兔前牙及磨牙牙髓组织中分离DPSCs进行体外培养（2）将24只实验新西兰兔随机分为空白组；对照组1；对照组2；实验组共四组，每组6只。在四组动物下颌无牙区牙槽骨人工制备10*4*4mm骨缺损区

3、,空白组骨缺损区填入0.25g粗颗粒Bio-oss+PBS20µL,对照组1中填入0.25g粗8颗粒Bio-oss+250ng/µLTGF-β320µL；对照组2填入0.25g粗颗粒Bio-oss+培养好的1×10/L的8DPSCs20µL；实验组填入0.25g粗颗粒Bio-oss+250ng/µLTGF-β320µL+培养好的1×10/L的DPSCs20µL。术后第6周分别处死动物,进行HE染色，免疫组织化学法检测骨钙素（OC）、骨涎蛋白(BSP)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)的表达。结果（1)原代培养的幼兔牙髓细胞少数纺锤形或多角形，多呈成纤维细胞样细胞，光镜下传

4、代培养的细胞形态特点与原代培养无明显差异；（2）HE染色：术后6周，空白组未见明显骨小梁生成；对照1组可见少量毛细血管,可见少量骨小梁；对照2组可见骨缺损区周围有少量成骨细胞和少量毛细血管,可见少量新生骨板；实验组骨缺损区可见大量毛细血管和大量成骨细胞,新生骨板量明显增加；（3）免疫组织化学：实验组BSP表达较空白组（0.192±0.030）、对照1组（0.215±0.026）及对照2组（0.231±0.052）较高（P<0.05）；实验组OC表达较空白组（0.243±0.037）、对照1组（0.272±0.058）及对照2组（0.275±0.046）较高（P<0.

5、05）；实验组COL-Ⅰ表达较空白组（0.135±0.026）、对照1组（0.151±0.033）及对照2组（0.176±0.028）较高（P<0.05）；说明实验组新生骨组织数量、质量、成骨情况优于其他组。结论（1）DPSCs增殖能力强，具有稳定的生物活性，可适应长期大量培养的需要。（2）外源性TGF-β3与牙髓干细胞可有效地促进颌骨缺损的修复，为后期的临床实验提供一定的理论依据。关键词：转化生长因子β3，DPSCs，Bio-oss骨粉，骨缺损，修复ⅠAbstractObjectiveTGF-β3combinedwithdentalpulpstemcells(DP

6、SCs)andBio-ossbonewerepositionedtotherabbitalveolarbonedefectareastoexploretheroleofTGF-β3inducenewboneregenerationandreparativethroughDPSCsdifferentiations.Methods1.DPSCswereisolatedfrompulptissueofNewZealandrabbit’sincisorsandmolarsandthenculturedinvivo.2.24experimentalNewZealandrabb

7、itsweredividedintoblankgroup，controlgroup1,controlgroup2andexperimentalgrouprandomly(sixrabbits/group).10*4*4mmalveolarbonedefectweremadeinanimalmandibularedentulousartificially.Inblankgroup,thedefectwasfilledwith0.25gBio-osspowdermixedbyPBS20µLonly；whilethedefect8wasfilledwith250ng/