ctla4ig联合青藤碱对异种鼠肾移植排斥反应中fasfasl表达的影响

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1、％／分类号脱９潭级公开＇６、１０５５５ＵＤＣ１０学校代码表＠？義孝义拿硕±学位论文（专业学位）ＣＴＬＡ４１ｇ联合青藤碱对异种鼠肾移植排斥Ｆａ＊反应中Ｆａｓ／ｓＬ表达的影研究生姓名：陈选才指导教师、职称：李建军副教授）专业学位类别（领域）：临床医学（外科学研究方向：器官移植所在学院：第二临床学院二〇—五年五月戀＃义爹ＣＴＬＡ４１ｇ联合青藤碱对异种鼠肾移植排斥反庭中口Ｆａｓ／Ｆ过ｓＬ＾ｉ＾台勺＾向论文作者签名：货４才指导教师签名：雜、／，论文评阅人一１；苟欣授＾民科大

2、学附属第，教，硕导，車民院评阅人２：吴刚，副教授，博古，第云军医大学第王附属医院笞辩委员会主席；潘光辉，教授，硕导，广州戾科乂学附属第二民院委员１：罗志刚，教授，硕导，南华大学附属第二區院２一委员：李解方，教授，硕导，南华大学附属第睽院委员３；彭荣章，韦伟睽师，南华大学附属第二民院委员４；阳宁，副主巧医师，南华大学附属第二展院答辩日期；２０１５年５月２３日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成或果撰。尽写我过所知，除了论文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表料的研究

3、成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材识。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意到本声明的法律结果由本人承担。作者签名南华大学学位论文版权使用授权书本论文本的学研位究论成文果是归本南人华在大南学华所大有学，攻本读论（文硕的）研±究学内位容期不间得在Ｗ导其师它指单导位下的完名成义的发学表位。论本义人。同意南华大学有关保留、使用学位论论文的规定，目Ｐ：学校有权保留学位论文，允许学位论文手被段保查阅和借阅；学校可Ｗ公布学位文的全部或部分内容，可Ｗ采用复印、缩印或其它文留学位论文；学校可根据国家或湖南

4、省有关部口规定送交学位论文。同意学校将论据加入《中国优规秀博硕±学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕±学位论文全文数库出版章程》定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到论《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位文，解密后适用该授权。＇＾作者签名东；３月曰导师签月沪产／CTLA4Ig联合青藤碱对异种鼠肾移植排斥反应中Fas/FasL表达的影响摘要:目的本实验主要利用PLNCX2-FLAG-CTLA4Ig基因包装成逆转录病毒局部转染豚鼠肾脏，通过其表达产生的CTLA4Ig阻断CD28-B7共同刺激通路

5、,营造免疫抑+制微环境，同时联合应用青藤碱抑制受鼠外周血CD4T细胞增殖，通过研究两者的协同作用探究其对异种鼠肾移植排斥反应中相关凋亡因子Fas/FasL表达的影响，从而为临床治疗肾移植排斥反应及未来异种肾移植的临床应用提供新的方法和思路。方法选用雄性SD大鼠（12-14周龄）、雄性豚鼠（12-14周龄）各40只，完全随机分为4组（每组SD大鼠、豚鼠各10只）。实验分为4组，A组：空载体逆转录病毒基因转染+生理盐水空白对照；B组：空载体逆转录病毒基因转染+青藤碱；C组：CTLA4Ig逆转录病毒基因转染+生理盐水；D组：CTLA4Ig逆转录病毒基因转染+青藤碱。手术方式为先通过逆转录病毒载

6、体将CTLA4Ig基因局部转染到豚鼠双肾，再将豚鼠双肾整体异位移植到SD大鼠颈部，其中左肾留作移植肾，切下右肾用于检测CTLA4Ig的表达。观察术后各组SD大鼠移植肾存活时间、受鼠存活时间；采用HE染色观察术后各组SD大鼠移植肾排斥反应病理分级；术后48小时受鼠尾静脉抽血查肌酐值，同时监测48小时尿量；采用Westernblotting检测被切右肾CTLA4Ig的表达；Westernblotting及免疫组化技术检测受鼠移植肾Fas/FasL蛋白的表达。I结果1.肌酐及尿量的监测术后48h尾静脉抽血查肌酐值：B、C组移植鼠肌酐值分别为（9.20±0.83）mg/L、（9.00±0.71）

7、mg/L，明显低于A组（15.00±1.00）mg/L（P<0.05），而D组移植鼠肌酐值最低，为(4.20±0.84)mg/L，与其他3组相比差异有显著性（P<0.05）。术后48h尿量值：B、C组移植鼠尿量分别为（11.80±1.09）ml、（11.60±1.14）ml，明显高于A组（6.40±0.55）ml（P<0.05），而D组移植鼠尿量最多，为（19.20±0.81）ml，与其他3组相比差异有显著性（P<0.05）。2.移