骨髓间充质干细胞对于髓核细胞炎性损伤的保护作用

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1、？．分类号论文编号密级二若ｆ硕±学位论文骨髓间充质干细胞对于髓核细胞炎性损伤的保妒作用－ｄｅｒＴｈｅｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｉｖｅｄｐｍｅｓｅｎｃｈｍａｌｓ化ｍｃｅｌｌｓＢＭＳＣｓｏｎｙ（）ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｄａｍａｅｄｎｕｃｌｅｕｓｕｌｏｓｕｓ（ＮＰ）ｃｅｌｌｓ．ｙｇｐｐ研巧生姓名：胡津餘学号：２０１２１２８９指导教师：袁义教授第二军医大学附属长征医院骨科学科、专业：外科学（骨科）：临床医学专业学位

2、学位类型２０１５年４月答辩日期：二〇—五年四月第Ａ罕ＩＴ夫赛硕古単位论文骨髓间充质干细施对于髓核细胞炎性损伤的保护作用ｒｏ－Ｔｈｅｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄｐｍｅｓｅｎｃｈｍａｌｓｔ：ｅｍｃｅｌｌｓＢＭＳＣｓｏｎｙ（）ｍｆｌａｍｍａｔｄａｍａｅｄｎｕｃｌｅｕｓｕｌｏｓｕｓＮＰｃｅｌｌｓ．；ｏｒｙｐｐ（）ｇ研究生巧名蘭津給导师姓名袁文申请学位类型临床学位专业名称外科学培养单位第二军医大学长征医院二〇—

3、五年五月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工。１＾作除了文中特别加义标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己鐘发表或撰写过的研究成果一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签省：签字曰期；２０１４年５月２１曰学位论文使用授权书声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可Ｌ乂将学位

4、沦文的全部或部分内容编Ｌ、、入有关数据库进行检索，可乂采用影印缩印或扫描等复制手段保存汇编学位论文。（保密的学化论文在解密后适用本授权书）备－学位论＾著签名：导卿签名：女签字曰期：２０１４年５月２１曰签字曰期：２０１４年５月２１曰目录－－摘要１－ＡＢＳＴＲＡＣＴ－４缩略词表－７－前胃－８－第一部分大鼠髓核细胞、大鼠骨髓间充质干细胞的获取、分离、培养－－及鉴定１２一－－１２、材料和方法－－Ｈ、讨论１８四－１９－、小结二ＳＣＳ－－第部分非接触共培养模型下ＢＭ对炎性

5、损伤的保护作用．．．．．．．２２一－２２－、材料和方法－２５－—■、结果－Ｈ－２８、讨论－－四、小结３０第Ｈ部分骨髓间充质干细胞对于炎性损伤后髓核细胞的迁徙Ｗ及线粒－－。３３体传递现象一－巧－、材料和方法二－－、结果３４兰－－、讨论３６－－四＞小结３８－４－综述１－４８－参考文献骨髓间充质干细胞对于髓核细胞炎性损伤的保护作用摘要目的；在椎间盘退行性病变过程中－３，椎间盘内微环境中正１表达的升高被认为是其重（要的致病因素，而间充质干细胞

6、治疗椎间盘退行性病变也被认为是具有巨大潜为的治疗策略。在众多实验中间充质干细胞都表现出良好的髓核细胞分化特性，及体外实验中良好的恢复椎间盘离度的能力，本实验将从体外评价骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ－）对白介素巧（正ｉｐ）干预后的髓核（ＮＰ）细胞保护修复能力。方法：一二１．实验细胞的分离、培养和鉴定Ｗ及实验分组。型胶原，型胶原的细胞免疫组化鉴定。取Ｈ代ＢＭＳＣｓ通过流式细胞仪进行ＣＤ２９、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ９０位点鉴定细胞纯度。实验共分为Ｈ组：１．对照组：在无血清培养基条件下２４ｈ后更换为含有ｈ。２－（完

7、全培养基２４．炎性干预组（Ａ組）１２０ｎ／ｍｌ）：在无血清培养基条件下加入正０ｇ干预２化盾更换为含有完全培养基２他。３．共培养组（Ｂ组）：在无血清培养基条件下加入正－２０ｎ／ｌ１０（ｇｍ）干预２４ｈ后更换含有完全培养基同时置入预先种入ＢＭＳＣｓ细，胞的ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室，共培养２化，Ｈ组实验都分为２个阶段，时间各２他。－２．ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ：ＢＭＳＣｓ非接触共培养下炎性干预的ＮＰ细胞中基因的表达。采－用ＲｅａＰＣＲ－、－、１－ｌｔｉｍｅ检测兰组获得ＮＰ细胞的ＡＤＡＭＴＳ４、５７，ＭＭＰ３３ＴＩＭ

8、Ｐ１，的基因相对表达量。－３：ｅ．细胞调亡的检测根据ｂｙｏｔｉｍｅ提供的Ｃａｓｐａｓｅ３活性检测试剂盒说明书，对－３于Ｈ组细胞ＣＡＳＰＡＳＥ的活性进行检