血浆mirna-372373与hbv早期感染的相关性研究

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1、分类号：R34学校代码：10062密级：学号：2011702287硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：血浆miRNA-372/373与HBV早期感染的相关性研究TITLEStudyontherelationshipbetweenmiRNA-372/373inplasmaandtheearly-stageinfectionofHBV一级学科：基础医学二级学科：病原生物学论文作者：安蓬蓬指导教师：汤华教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R34学校代码：10062密级：学号：2011702287学位类别：科学学位专业学位学科门类：

2、医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：血浆miRNA-372/373与HBV早期感染的相关性研究TITLEStudyontherelationshipbetweenmiRNA-372/373inplasmaandtheearly-stageinfectionofHBV一级学科：基础医学二级学科：病原生物学论文作者：安蓬蓬指导教师：汤华教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或

3、集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的

4、:目前，在采供血机构中进行血液筛查时，乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的ELISA检测和核酸扩增检测技术（NAT）的平行使用已被大范围推广，尤其是NAT的使用，在很大程度上缩短了HBV感染的检测窗口期，提高了输血的安全性。但受病毒复制及核酸拷贝数等因素的影响，NAT也并不能完全杜绝HBV经输血途径的传播。microRNA（miRNA）是一类微小的、单链的RNA分子，它的长度约为21-25nt，它能够通过与目标mRNA的3’-UTRs的不完全配对，来调节目标mRNA的稳定性或抑制其翻译。人们已经发现，miRNAs在血浆中的差异表达与多种疾病密切相关，而且，它可以在血浆

5、中稳定存在，可作为疾病诊断的分子标记物。本文应用实时定量PCR方法检测HBV早期感染的无偿献血者血浆中和正常献血者血浆中的miRNAs（miRNA-372/-373）的表达差异，进而分析这两种miRNA作为HBV早期感染诊断标志物的潜在价值和对献血者进行HBV筛查的可行性。方法:收集来源于2013年3月至9月间天津市内无偿献血者所献血液的血浆标本留样，共54份，均经过ELISA检测及核酸检测，其中ELISA检测HBsAg及核酸检测HBV核酸均为阴性的正常的血浆标本18份（正常组）；仅ELISA检测HBsAg阳性而核酸检测HBV核酸阴性的标本18份（E单阳组）；EL

6、ISA检测HBsAg及核酸检测HBV核酸均为阳性的标本（EN双阳组）18份（此54份血浆标本的其他常规血液筛查项目均正常，相应的献血者体检符合中华人民共和国卫生部于2011年12月30日发布的《献血者健康检查要求》，HBsAg阳性的相应献血者均为无明显症状的轻度早期感染者）。提取此3组共54份血浆标本中的miRNA，并用实时定量PCR方法检测miRNA-372和miRNA-373的相对表达水平。最后，分别比较miRNA-372和miRNA-373在“E单阳组”、“EN双阳组”的HBV早期感染者与正常献血者之间的表达差异，并对各组间的miRNA表达趋势进行统计学分析

7、；同时，对miRNA-372、miRNA-373的相对表达水平分别与核酸检测HBV核酸阳性血浆标本中的HBVDNA拷贝数进行相关性分析。I天津医科大学硕士学位论文结果:经实时定量PCR检测，与正常献血者相比，miRNA-372、miRNA-373在“E单阳组”和“EN双阳组”中均表达上调，其中，miRNA-372、miRNA-373在“EN双阳组”中表达上调更为显著。进一步分析发现，在“EN双阳组”中，miRNA-372、miRNA-373均与相应的HBVDNA拷贝数呈正相关性，其中，与miRNA-372相比，miRNA-373与相应的HBVDNA拷贝数的正相关性

8、更为明显。