自噬在维持卵巢癌干细胞特性中的作用

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1、分类号：单位代码：密级学号：硕士学位论文中文论文题目：自噬在维持卵巢癌干细胞特性中的作用英文论文题目：申请人姓名：彭巧华指导教师：谢幸专业名称：妇产科学研究方向：妇科肿瘤所在学院：医学院论文提交曰期年月自噬在维持卵巢癌干细胞特性中的作用论文作者签名：、指导教师签名：论文评阅人万小云主任医师浙江大学医学院附属妇产科医院评阅人程晓东主任医师浙江大学医学院附属妇产科医院评阅人赵小峰副主任医师浙江省人民医院评阅人评阅人答辩委员会主席：吕卫国教授浙江大学医学院附属妇产科医院委员陆燕教授浙江大学转化研究院委员王亮主任医师浙江省人民医院委员委员委员答辩日期浙江大学研究生学位

2、论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙江大学或其他教言机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名巧介签字日期：年月曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授杈浙江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印

3、、缩印或扫描等复制手段保存、编学位论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书）签字曰期：年多月曰：玄年？月日签字曰期浙江大学硕士学位论文致谢致谢时光匆匆，三年的研究生生活就这样结束了，在浙大的学习生活美好而又充满挑战，很庆幸在浙大能遇见我的良师益友，是他们让我的生活变得丰富多彩。首先，我要感谢我的导师谢幸教授，一位让我肃然起敬的智者，他不仅是一位优秀的临床医生，知识渊博的学者，更是一位伟大的教育工作者。感谢他在这将近三年来对我无私的帮助和指导，感谢导师在课题设计、实施、论文写作等诸多方面给予的启迪和改进，在我困惑迷茫的时候为我点亮一盏明灯，指引我继续前进的道路。

4、他渊博的知识，严谨的治学态度，一丝不苟的作风以及诲人不倦的精神，深深的感染并激励着我不断奋斗和前进，并将使我受益终身。另外也要特别感谢吕卫国教授，感谢吕老师在课题上给予的指导和鼓励，吕老师给我们营造了一个舒心温暖又和谐的学习生活坏境，以及在学习生活上所给予的温暖关怀，吕老师积极乐观的人生态度深深感染着我，在我的心中吕老师和谢老师一样，都是我们最最敬爱的导师。同时也要感谢万小云老师，程晓东老师，王新宇老师。您们不仅经常在课题上指导和帮助我们，而且对我们每个学生都关怀备至，让我们整个肿瘤组变得更加温馨，给我们带来一种家的感觉。最后，还要感谢实验室里的师兄师姐师妹们

5、：王培师姐、张松法师兄、左鹏师兄、许君芬师姐、黄璐、黄永洁、马月江、曹竹、邹健、章鉴洋、杨诗舟、冯燕、陈婷婷、张徐、俞燕、徐珊珊因为有你们的陪伴，让我的研究生活变得愉快而难忘，感谢你们手把手的教我实验技术，细心的帮助我解决在实验中所遇到的各种困难，我们一起奋斗，一起吃，一起玩，一起愁容满面、一起谈笑风生，感谢您们陪我度过的每一个日曰夜夜，这必将成为我人生中一段美好而难忘经历。难忘同门之情，难忘我们在浙大结下的缘分。浙江大学硕士学位论文中文摘要自噬在维持卵巢癌干细胞特性中的作用浙江大学医学院妇产科学硕士研究生彭巧华导师谢幸教授中文摘要目的：观察卵巢癌干细胞的自噬

6、活性，并明确自噬激活对维持卵巢癌干细胞干性特征的作用。方法：以浆液性卵巢癌细胞株为亲本细胞，通过无血清悬浮培养的方法获得卵巢癌干细胞。收集卵巢癌干细胞，利用流式细胞术检测细胞表面标记分子表达，采用和技术分别检测干性标记物、和的和蛋白表达。釆用检测细胞和卵巢癌干细胞自嗟湘关蛋白和的表达；进一步用抑制溶酶体降解过程，一方面采用共聚焦荧光显微镜观察转染质粒后细胞内阳性小泡数量的变化，另一方面，釆用检测和表达变化，观察细胞自噬流的大小。通过干扰自嗟基因，采用自噬抑制剂和分别抑制卵巢癌干细胞自噬活性首先用孔板球囊形成实验，观察细胞自我更新能力的变化再通过流式细胞术检测细

7、胞表面标记物的变化；最后利用检测细胞对紫杉醇的敏感性。浙江大学硕士学位论文中文摘要结果：卵巢癌细胞株通过无血清添加生长因子悬浮培养天左右可以获得表型为的卵巢癌干细胞，并且高表达干性标记物、和。和卵巢癌细胞相比，卵巢癌干细胞自噬合成蛋白表达增加，而自噬降解蛋白表达降低；用溶酶体抑制剤抑制自噬降解后，一方面，卵巢癌和卵巢癌干细胞在共聚焦显微镜下阳性小泡数量均发生累积但是卵巢癌干细胞累积效果更明显；另一方面，抑制自噬降解后，两种细胞和蛋白表达均增加，但是卵巢癌干细胞增加更显著。抑制自噬后，卵巢癌干细胞的自我更新能力降低（所形成的球囊直径变小、数量变少）、表型的细胞比

8、例上升、对紫杉醇的敏感性增加。结论：卵