甜菜夜蛾拓扑异构酶ⅰ氨基酸多型性对其活性的影响

《甜菜夜蛾拓扑异构酶ⅰ氨基酸多型性对其活性的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、密级：：论文编号中国农化科学悦学位论文甜菜夜蛾拓扑异构酶Ｉ氨基酸多型性对其活性的影响＊Ｅｆｆｅｃｔｏｆｏｌｍｏｒｐｈｉｓｍｏｎ化６〇分０７／６／＂ｅ乂ｐｙ卸／ＴｏｏｉｓｏｍｅｒａｓｅＩｓｅｃｉｆｉｃａｃｔｉｖｉｔｐｐｙ硕：ｔ研究生张佩指导教师：蒋红云研究员申请学位类别：农业推广硕±专业：植物保护专业领域名称：农药毒理培养单位：植物保护研巧所研究生院２０巧年５月Ｓｅｃｒｅｃｙ：Ｎｏ．ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕ

2、ｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＥｆｆｅｃｔｏｆｏｌｍｏｒｈｉｓｍｏｎｔｈｅＳｏｄｏｔｅｒａｅｘｉｕａｐｙｐｐｐｇＴｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅＩｓｐｅｃｉｆｉｃａｃｔｉｖｉｔｙＭｓ．Ｃａｎｄｉｄａｓ：ＰｅｉＺｈａｎｇＡｄｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏ化ｓｓｏｒＨｏｎｕｎＪｉａｎｇｙｇＭａｏｒ：ＭａｓｔｅｒｏｆＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＥｘｔｅｎｓｉｏｎｊｇＳｅｃｉａｌｔ：ＰｅｓｔｉｃｉｄｅＴｏｘｉｃｉｔｐｙｙＭａｙ２０巧独创性声明本人声明所盈

3、交的论文是我个人在导师指导下进行的研巧Ｘ作及取得的研巧成果。尽我所知，除ｒ文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的巧究成果，也不包含为获得中國农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料…。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。：研究生签名：时间＾巧年备月Ｍ３关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被蜜阅和借阅，可Ｗ采用

4、影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。罔意中園农业科学院可Ｗ用不罔方式在不同媒体ｉ：发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：时间；年占月文因导师签名；：时间年＾月＞日中国农化科学院硕主学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目甜菜夜蛾拓扑算构酶Ｉ氨基酸多型性对其活性的影响论文作者张佩专业植物傑护研巧方向指导教师蒋红云培养華位（研究所）植物保护研究所硕）姓名职称＾５单位专业签名导师评硕导口—＾阅輕５—

5、硕导口人博导□￣￣￣＂—ｉ．＂潘灿平教授中国农化大学理学院祕学以Ｉ置、詰讳＜＾病＿申国植物黄獻良研究Ｍ农药学ｇ謂ｇ競競相农药学—答Ｉ中园源与孔垂华麵生态学畏言号＾苗！禹唉辩邵娜巧振铜組推广研硕导口全国农业技术推广販啦农六药－学哲巧ｙｆｒ究员樽导口务中也、委秦冬梅研究员农业部农巧检定所农药学ｌｇｌ何雄奎教授中国农业大学理学院农药学＿－￣￣硕导□＾傅导□Ｉ＿＿Ｊ＿＿＿＿Ｊ＿＿会议记录（秘书）张燕宁论文答辩时间地

6、点２０１５年５月巧日靈期３，下午１３：３０，植傷所第二会巧室摘要ＤＮＡ拓化异构酶Ｉ（Ｔｏｐｉ）参与机体内的ＤＮＡ复制、转录和重组反应，是喜树碱类化合物的作用帮标。已知昆虫Ｔｏｉ，其结构变化会影响对喜树碱类抑制剂的敏感性本课题组通过对ｐ氨Ｉ４２０５３０６５３７２９基酸进行比对后，发现昆虫Ｔ邱在，，和四个位点存在多型性，这种多型性是否会影响昆虫对喜树碱类抑制剂的敏感性未见有报道。本研究通过对甜菜夜蛾ＴｏｐＩ基因进行定点突变、诱导表达及纯化ｏｉ，研巧了氨基酸多型性对Ｔｐ解旋活性Ｗ及对喜树碱类抑制

7、剂敏感性的影响ｏ。，并ＷＴｐｉ为鞭标进行了非喜树碱类抑制剂的初步筛选取得如下研究结果：完全重叠ＰＣＲ能实现甜菜夜峨ＴｏｐＩ定点突变，无其他突变引入。在选择的浓度范围内，ＩＰＴＧ均能成功诱导目的蛋白表达，且表达量随着ＩＰＴＧ浓度的増加而增加，但在相同浓度ＩＰＴＧ诱导下，突变蛋白的表达量较野生型明显减少。氨基酸多型性对甜菜夜蛾Ｔｏｉ与钟离。相同条件下ｐ子的亲和性及解旋活性有影响，与野生型蛋白相比，突变蛋白对钟离子的亲和性均有所增强，启动解旋反应时的钟离子浓度较野生型蛋白低，最适钟离子浓度也有所改

8、变。在最适钟离子浓度下，对ＤＮＡ的解旋活性也存在差异。其Ｌ５３Ｍ中，０Ｐ突变蛋白的最适钟离子浓度为ｌＯＯｍＭ，较野生型蛋白的最适钟寓子浓度（５０ｍ）１０％一ｘ９降低了３，致１．２８ｌ〇Ｕ／ｍｒｏＡ６５巧但两者在最适钟离子浓度下的催化活力，比活力均为ｇｐ；突变蛋白对钟离子的适宜浓度范围增宽