牙鲆多聚免疫球蛋白受体与黏膜免疫球蛋白免疫应答动态分析

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1、斯火々義）相］ｆＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ硕±学位论文ＭＡＳＴＥ民ＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ牙鲜多聚免疫巧蛋白受体与黏膜免疫球蛋白论文题目：免疫应答动态分析Ｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｏｌｍｅｒｉｃｉｍｍｕｎｏｌｏｂｕｌｉｎｐｙｇｒｅｃｅｔｏｒａｎｓｅｃｒｅｏｒｉｍｍｕｎｏｌｏｂｕｌｐｄｔｙｉｎｓｉｎｇ英文题目；ｆｌｏｕｎｄｅｒＰａｒａｌｉｃｈｔｈｙｓｏｌｉｖａｃｅｕｓ）｛作者：王占飞指导教师：

2、绳秀珍教授学位类别：全日制学术学位专业名称；水产养殖硏究方向：水产养殖病害学＾谨＾此论文献给所有关心、支持和帮助过我的亲人、１师长和朋友！—王占飞牙鲜多聚免疫球室白受体与親膜免疫球蛋白免疫应答动态分析学位论文答辩口期：指导教师签字：＊义巧辩委巧会成巧签乎：乂作Ｗｆ變独创ｆ明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进巧的研究ＩＬ作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人

3、己经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得其他教肯机构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：：签字曰期：２〇Ｓ年ｆ月２占曰王６飞（学位论文版枚使用授枚书本学位论文作者完全了解学校有关保留，有权保留、使用学位论文的规定。并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被査阅和借阅本人授权学校可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、汇编学位论文。同时授权

4、中国科学、缩印或扫描等复制手段保存技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务）。（保密的学位论文在解密后适用本授巧书：学位论文作者签名：＾导师签字至！；５１签字日期月日签字日期：１巧５年月日：议年５乂＾牙解多聚免疫球蛋白受体与黏膜免疫球蛋白免疫应答动态分析摘要黏膜免疫系统作为免疫防御的第一道防线，能够参与保护机体免受病原体的侵害。黏膜免疫系统Ｗ分泌型免疫球蛋白（ｓｌｇｓ）为主要的防御因子。多聚免疫球蛋白受

5、体（ｐｏｌｙｍｅｒｉｃｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｒｅ说ｐｔｏｒ，ｐＩｇＲ）是黏膜免疫中的重要组成成分，其特异性地转运ｓｉ巧通过上皮细胞保护机体。因此ｐＩＲ的有效分泌是ｇ多聚免疫球蛋白发挥黏膜防御功能的必要条件，在黏膜免疫中起着举足轻重的作用。目前对硬骨鱼类ｐＩｇＲ的研究已经日渐活跃，而ｐＩｇＲ与ｓｉｇｓ的免疫应答动态也备受关注。？仏本文利用灭活援弧菌沁ａｎｇｗ／ｍｍ）通过注射和浸泡两种方式免疫牙’’巧（戶ａｒａ／ｉｃＡ却ｙｓｏ／ｉｖａｃｅｗ），测定了免疫后牙巧组织

6、中ｐＩｇＲ与ＩｇＭ基因水平的表达变化，并检測了免疫后牙巧皮肤黏液、叛黏液、肠裂液及胆汁中ｉ民及ＩＭｐｇｇ蛋白水平的表达变化－Ｍ复合物，研究了血清、胆汁及Ｈ种黏液中的ＩＲＩｐｇｇ，最Ｍ在牙巧黏膜免疫相关组织中的分布一后定位ｐＩｇＲ及Ｉｇ，为进步研究硬骨鱼类黏膜免疫机制莫定了基础。本文具体研究结果如下：用灭活巧弧茜采用注射和浸泡两种方式对牙巧进行免疫，利用实时巧光定虽ＰＣＲ法对免疫后牙巧各组织中ｐＩｇＲ及ＩｇＭ基因水平表达变化进行了巧定。结果一，ＩＲ基因的表达变化趋势与ＩＭ

7、基本致表明免疫后的牙巧各组织中ｐｇｇ，巧呈现先上巧后下巧的趋势，巧而ｐＩｇＲ基因水平上升比ＩｇＭ快，到达峰值的时间也比ＩｇＭ早，在皮肤、巧和后肠中，浸泡组ｐＩｇＲ的峰值商于注射组，而在其余组织中，则低于注射组；在皮肤和巧中，浸泡组ＩｇＭ的峰值商于注射组，而在其余组织中，则低于注射组。利用ＥＵＳＡ法对任弗茜免疫后牙＃ｐＩｇＲ及ＩｇＭ蛋白水平的表达变化进行检Ｍ的蛋白水平变化趋势基本一一測。结果表巧，各免疫组中ｐＩｇＲ与Ｉｇ致，在段时间之内均呈现先上升后下巧的趋势，然而ｐＩｇ

8、Ｒ蛋白水平上升比ＩｇＭ快，到达巧值的时间也比ＩｇＭ早，在皮肤巧巧巧抵巧液中，浸泡组ｐＩｇＲ的峰值较注射组，高，而在》巧液和胆汁中，其巧值较注射组低；在皮肤黏巧和巧黏巧中浸泡组ＩＩＭ的峰值ｇ较注射组高，而在肠黏液和胆汁中，其峰值较注射组低。将牙特血清、皮肤黏液、觸黏液、肠黏液及胆汁在非变性电泳条件下进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验。结果显示，抗牙鲜血清ＩｇＭ单抗２Ｄ８和抗牙解皮肤黏液单抗１Ａ２与牙鲜血清、皮肤黏液、鲍黏液、肠黏液及胆汁均反应，均在分子量约８