牙髓干细胞应用于肌腱韧带组织再生的体内外研究

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1、分类号：R781.4学校代码：10392学科专业代码：100302学号：2120904389硕士学位论文牙髓干细胞应用于肌腱/韧带组织再生的体内外研究InVitroandinVivoInvestigationofEngineeredTendonUsingDentalPulpStemCells学位类型：医学硕士所在学院：口腔医学院申请人姓名：陈玉英学科、专业：口腔临床医学导师：闫福华教授林敏魁副教授研究起止日期：2012年9月至2015年5月答辩委员会主席：肖殷教授答辩日期：2015年5月28日基金项目：国家自然科学基金（81171470）江苏省“六

2、大人才高峰”高层次人才选拔培养项目（2013-SWYY-006）二○一五年六月目录英文缩略词表…………………………………………………………..2中文摘要…………………………………………………….………….4英文摘要………………………………………………………...……...6绪论……………………………………………………………...……...7实验研究第一部分：牙髓干细胞的分离培养和鉴定……………….………….10第二部分：人牙髓中肌腱相关蛋白表达情况的研究………………...22第三部分:PGA复合支架诱导牙髓干细胞腱系分化的体外研究………………………

3、…………………………………..….35第四部分:牙髓干细胞-PGA复合支架构建工程化肌腱样组织的体内研究…………………………………………………………48全文总结………………………………………………………………..65参考文献………………………………………………………………..67综述……………………………………………………………………..75致谢…………………………………………………………………….86英文缩略词表缩写英文全称中文全称α-MEMalphamodificationofEagle’smedium细胞培养液Colcollagen胶原蛋白c

4、DNAcomplementaryDNA互补脱氧核糖核酸DPSCsdentalpulpstemcells牙髓干细胞DMSOdimethyesulfoxide二甲基亚砜DPPdentinphosphoprotein牙本质磷蛋白EDTAethylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸ESCsembryonicstemcells胚胎干细胞FBSfetalbovineserum胎牛血清FCMflowcytometry流式细胞仪HEhematoxylin-eosin苏木精-伊红MSCsmesenchymalstemcells间充质干细胞

5、MTTMethyl-thiazolyl-tetrazolium四甲基偶氮唑蓝NCPsnon-collagenousproteins非胶原的蛋白ODopticaldensity光密度值PDLFsperiodontalligamentfibroblasts牙周韧带成纤维细胞PBSphosphate-bufferedsaline磷酸盐缓冲液RealtimePCRreal-timefluorescencequantitative实时荧光定量聚合Polymerasechainreaction酶链反应PGApolyglycolicacid聚乙醇酸PFApara

6、formaldehyde多聚甲醛PDLSCsperiodontalligamentstemcells牙周韧带干细胞TEMtransmissionelectronmicroscope透射电镜TNMDtenomodulin腱调蛋白TNCTenascin-C腱糖蛋白TDSCstendon-derivedstemcells肌腱干细胞SEMscanningelectronmicroscope扫描电镜SCXscleraxis肌腱转录因子牙髓干细胞应用于肌腱/韧带组织再生的体内外研究中文摘要肌腱/韧带是连接肌肉/骨骼和骨骼的规则致密结缔组织，并起到传递张力负载的

7、作用。肌腱/韧带组织自身修复能力有限，受损后无法恢复原有的机械力学性能，且伴随有大量疤痕组织增生，引起严重的功能紊乱和残疾，导致关节运动异常和疼痛。传统的治疗理疗方法只能缓解疼痛，而手术治疗如手术缝合、自体或异体移植方法虽有一定效果，但是疗效有限，即使是自体肌腱移植修复液只能达到正常肌腱力学性能的40%左右，且伴随着大量瘢痕组织增生。同时，这些治疗方法都存在不可避免的并发症，例如供体区的受损、疾病的传播、移植物的免疫排斥反应、反复发生的肌腱撕裂等问题。在过去的20年随着生物材料学及临床医学的不断发展，肌腱组织工程研究取得很大的进步，为缺损肌腱的修复

8、提供一条崭新的可行性途径。近年来，通过利用干细胞复合支架材料构建人工组织以促进受损组织再生，为肌腱组织的再生带来了全新的希