模式识别受体介导的小鼠睾丸和附睾的天然抗病毒反应

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1、＾京碱和皆ｆ像博±研究生学位论文Ｗ北京协和医学院研究生院学校代码：１〇〇２３学号：Ｂ２０１３００５００７北京协和區学院博壬研究生学位论文模式识别受体介导的小鼠睾丸和附睾的天然抗病毒反应－ｖＰａｔｔｅｒｎｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｉｔｉａｔｅｄｉｎｎａｔｅａｎｔｉｉｒａｌｒｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎｔｈｅｍｏｕｓｅｔｅｓｔｉｓａｎｄｅｐｉｄｉｄｙｍｉｓ研究生：朱伟伟导师：韩代书教授专业：细胞生物学研究方向：生殖免疫所在所隐：基础学院

2、入学时间：２０１０年８月答辩时间：２０巧年５月北京协和医学院博±研充生学位论文目录摘要２Ａｂｓｔｒａｃｔ３缩略織４前言７实验材稱１５实验滿２４实验结果３１一２第部分ｐ〇４介导單丸抗病毒ＤＮＡ的功能３１第二部分ＲＬＲ启动宰丸抗病毒ＲＮＡ的反应３９第三部分ＰＲＲ介导的附牵天然抗病雜制５０巧论６３小结６７参考文献６８文纖述７３９７絲文＃致谢９８１北京协和医学院瞎±研究生学位论文摘要。背巧

3、与目的：病毒感染引起的睾丸炎和附睾炎，是破坏男性生育能力的重要因素目前这两个生殖器官的天然抗病毒免疫机制尚不清楚，本论文主要研充模式识别受体介导的睾丸与附睾天然抗病毒机制，为预防和治疗相关疾病提供新线索。材料与方法ＳＷ小鼠为模型，用ｐ〇ｌｙ（Ｉ：Ｃ）和ＨＳＶ６０模拟病毒感染，利用实时定量ＲＴ－ＰＣＲＲＮＡＷｅｔｒｎｂｌｏｔ检测基因的ｍ水平，ｓｅ测定基因的蛋白水平，免疫组化染色定位蛋白的分布－，ＥＬＩＳＡ检测细胞因子和睾酬的分泌。利用ＴＬ反３基因敲除（ＴＬＲ３小鼠和ＲＮＡ干扰技术确证基因的功能。ｅ

4、ｄ－２０４结果：睾丸Ｌｙｉｇ细胞姐成性表达病毒核酸受体ＭＤＡ５、ＲＩＧＩ和ｐ，其中－ＭＤＡ５也在圆形和长形精子中表达。ＭＤＡ５和民ＩＧＩ可被ｐｏｌｙ（Ｉ巧激活，ｐ２０４可Ｗ被ＨＳＶ６０激活，诱导睾丸抗病毒反应。附睾上皮细胞组成性表达多个病毒核酸３－ＡＬ受体，包括ＴＬＲ、ＲＩＧＩ和Ｄｐ２０４与ｃＧＡＳ可被ＨＳＶ６０诱导表达。ＴＬＲ３－１Ａ和ＲＩＧＩ可＾被口〇柳：（：）激活，而ＤＩ、ｐ２〇４与ｃＧＡＳ可１＾被ＨＳＶ６０激活，启动附睾天然抗病毒反应。在睾丸及附睾细胞中，ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｑ和ＨＳＶ６０都能诱导

5、Ｉ型干扰素和抗病毒蛋白－ｏｌ－化０１５、０ＡＳ１和ＭＸ１的表达。ｐｙＩ：Ｃ可Ｗ显著上调炎症因子ＴＮＦａ和ＭＣＰ１（）－－／－的表达－。，但ＨＳＶ６０并不影响ＴＮＦａ和ＭＣＰ１的表达在ＴＬＲ３细胞中或用ｓｉＲＮＡ－敲低民陌１、ＤＡＩ、ｐ２０４或ｃＧＡＳ时，抗病毒反应明显减弱，说明该凡个受体协同介导睾丸及附睾的天然抗病毒反应。－在睾丸中，ＭＤＡ５／ＲＩＧＩ启动抗ＲＮＡ病毒的反应，而２０４介导抗ＤＮＡ病结论：ｐ－ＤＡＴＬＲ３与ＲＪＧＩＲＮＡ病毒的反应Ｉ、０４毒的天然免疫反应；在附睾中，介导抗，的和ｃＧＡ

6、Ｓ参与抗ＤＮＡ病毒的反应。１＾；１上结果说明睾丸与附睾组织特异细胞具有完善的天然抗病毒能力。关巧词：Ｌｅｙｄｉｇ细胞；精子；附睾上皮细胞；天然抗病毒反应；．模式识别受体２北京协和医学院博±研究生学位论文ＡｂｓｔｒａｃｔＢ过ｃｋｇｒｏｉｍｄａｎｄｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ；Ｖｉｒａｌｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅ１；ｅｓｔｉｓａｎｄｅｐｉｄｉｄｙｍｉｓｍａｙｃａｕｓｅｏｒｃｈ化ｓａｎｄｅｍｓｗｈｃａｉｒｍａｅｅ．ｅｍｅｃｈａｎｓｍｓｎｄｅｒｎｎｎａｅｐｉｄｉｄｙｉ

7、ｔｉｉｈｉｍｌｆｒｔｉｌｉｔｙＴｈｉｕｌｙｉｉｔ，ｐｇａｎｔｉｖｉｒａｌｒｅｓｐｏｎｓｅｓｍｅｒｉｔｃｌａｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄａｔｔｅｒｎｒｅｃｏｎｉｔｉｏｎｐｐｇｒｅｃｅ－－ｈｒｉｎｉｔｉａｔｅｄｉｎｎａｔｅａｎｔｉｖｉｒａｌｒｅｓｏｎｓｅｓｉｎｔｈｅｔｉｓｓｕｅｓｐｅｄ行ｃｃｅｌｌｓ．ｐｐＭａｔｅｒｉａｌｓａｎｄｍｅｔｈｏｄｓ：Ｐｒｉｍａｒｙｔｅｓｔｉｃｕｌａｒｃｅｌｌｓａｎｄｅｐｉｄｉｄｙｍａｌｅｉｔ

8、ｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓＥＥＣｓｐ（）－－＇ｍｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＣ５７／ＢＬ６ａｎｄＴＬＲ３ｋｎｏｃｋｏｕｔ（ＴＬＲ３）ｉｃｅ．Ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打ａｔ－ｚｅｄ－ｍＲＮＡｌｅｖｅｌｗａｓａｎａｌｙｂｙｒｅａｌｔｉｍｅＲＴＰＣ民