鸭viperin蛋白抗新城疫病毒机制的初步研究

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1、－－－？＊．．＇－Ｉ－Ｖ？／密级：论文编号：中国农业科学院学位论文鸭Ｖｉｐｅｒｉｎ蛋白抗新城疫病毒机制的初步硏究ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒＳ化ｄｏｎＡｎｔｉｖｉｒａｌ乂ｃｔｉｖｉｔｏｆＤｕｃｋＶｉｅｒｉｎＰｒｏｔｅｉｎｙｙｙｐａｇａｉｎｓｔＮｅｗｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ硕壬研究生钟自富’－一？指导教师：朱启运研巧员申请学位类别：农学硕击专业；预防兽医学研究方向：兽医微生物及其分子生物学培养单位：兰州兽医研究所研究生院

2、２０１５年５月Ｓｅｃｒｅｃ：Ｎｏ．ｙＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓｇＤｉｓｓｅｒｔａ巧ｏ凸ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙＳｔｕｄｙｏｎ乂凸ｔｉｖｉｒａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＤｕｃｋＶｉｐｅｒｉｎＰｒｏｔ：ｅｉｎａｇａｉｎｓｔＮｅｗｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅＶｉｍｓＭ．Ｓ．Ｃａｎｄｉｄａｔｅ：ＺｈｏｎＺｉｆｕｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏ化ｓｓｏｒＺｈｕＱｉｙｕｎＭａｏｒ：ＰｒｅｖｅｎｔｉｖｅＶｅｔｅｒｉｎａｒＭｅ

3、ｄｉｃｉｎｅｊｙＳｐｅｃｉａｌｔｙ：ＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙＭａ２０１５ｙ独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，餘了文中特别加（ｉｌ栋注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农ｉｋ科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＾研究生签名时间：＞

4、＾７作年歹月处曰关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁蓝，允许论文被查阅和借阅，可１＾＞１采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可Ｗ用、传播学位论文的全部或部分内容不同方式在不同媒体上发表。研究化签名：象时间：年日甲导师签名：时间：年／中国农业科学院硕壬学位论文评阁人、答辩委员会签名表论文题目鸭Ｙｉｐｅｒｉｎ蛋白抗新城疫病毒＃１制的初步研究论文作者钟自舊专业预

5、防兽医学研究方向指导教师朱启运培养单位（研究所）兰州兽医研究所姓名职称单位专业签名二－－扭一人細答．曾巧英教授’甘肃农业大学丽舊匿学貴若巧雲寺Ｊ杨孝朴教授甘齋农业大学预防替医学刘光亮研究员兰州兽医研究所预巧兽医学扛Ｉ＂殷相平劃研究员呈州兽医研究所预防兽医学ｉ辩／硕导白、）少兰菩翻硏究员兰州魯医研究所预防兽屋学委——每—防巧：：会议记乘（秘书）吉艳红论文答辩时间地点２０巧年５月１５円兰州兽医研究所综合楼置機

6、学术报告厅摘要２００一１年首次报道Ｖｉｅｒｉｎ是种受干扰素、病奉等刺激诱导的基因。近年来，已经证实Ｖｉｐｅｒｉｎｐ不仅能被多种因素诱导而大量表达．而且还具有广谱的抗病毒和抗轴菌等作用，甚至还参与调节巧胞信号通路的功能。由此可见ＩＶｉｐｅｒｉｎ在天然免疫中发挥非常重要的角色。随着对Ｖｉｐｅｒｉｎ的深入和全面研巧，逐渐揭示Ｖｉｐｅｒｉｎ的抗多种不同病毒、抗细菌等作用机制。本研巧从长白鸭的外周淋己细胞中扩増鸭Ｖｉｐｅｒｉｎ基因并利用生物信息学方法对其进行详尽地基因分析。基于Ｖｉｐｅｒｉｎ参与抗病毒作用，通

7、过鸭Ｖｉｐｅｒｉｎ蛋白抗ＮＤＶ的试验研究．Ｗ揭示鸭Ｖｉｐｅｒｉｎ抗ＮＤＶ的分子机制。本研巧首先采集鸭抗凝血并分离其外周血淋己细胞，然后将外周淋己血细胞提取鸭的总ＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ。根据己公布的鸭的全基因组中ＲＳＡＤ２序列（登录号ＮＷ００４６７６９２２．１Ｗ及＿ＸＭ００５０１８５８０．１）设计相应的扩增引物，最终获得了鸭ＶｉｒｉｎＯＲＦ序列。根据获得的鸭Ｖｉｒｉｎ＿ｐｅｐｅ基因序列，使用生物信息学软件对扩増的鸭Ｖｉｐｅｒｉｎ序列进行详尽的功能分析。结果表明，鸭Ｖｉｐｅｒｉｎ的蛋白结构与其它已公布物种

8、的Ｖｉｐｅｒｉｎ蛋白非常相似，都包括Ｎ端区欺中屯呕域和Ｃ端区域。Ｖ－ｉｅｎ４Ｔ根据Ｖｉｐｅｒｉｎ的基因序列，将ｐｒｉ基因克隆到ｐＧＥＸ１原核表达载体，分别利用原核表达方法表达并纯化Ｖｉｅｒｉｎ的融合蛋白１，，ｐ。将该融合蛋白免疫月龄家兔检测血清抗体