血清抗体提取工艺及抗体冻干工艺的研究

《血清抗体提取工艺及抗体冻干工艺的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、血清抗体提取及抗体冻干工艺的研究Studyonthenewprocessofextractionandfreeze-dryingofserumantibodies作者姓名：侯春苗领域(方向)：兽医指导教师：雷连成教授类别：兽医硕士答辩日期：2015年6月6日中文摘要血清抗体提取及抗体冻干工艺的研究抗体（Antibody）又称免疫球蛋白，存在于人和动物血液（血清）、组织液及其他外分泌液中。抗体是机体对抗原物质产生免疫应答的重要物质，具有各种免疫功能，在疾病爆发时可通过被动免疫方式用于紧急治疗。但是目前为

2、止提取抗体的生产工艺依然是传统的硫酸铵盐析法，此方法由于所提抗体得率低、提取过程繁琐致使抗体价格昂贵而得不到广泛应用。因此寻找新的提取工艺代替传统盐析法来大量提取抗体、降低生产成本是解决抗体价格昂贵的根本方法。为寻找适合提取血清中抗体的新工艺，本研究以双水相系统为对象，筛选并优化出适合提取血清中抗体的双水相系统。对双水相系统提取血清中抗体的得率、纯度及扩大后的稳定行进行检测。通过对比传统工艺分析双水相系统的优越性，探讨双水相系统的应用价值。最后对提取的抗体进行冻干保存。根据抗体的特性筛选出适合抗体液冻

3、干的最佳保护剂，将提取的抗体进行冻干保存。方便了抗体的运输，保证了抗体的长期存放。本研究主要包括以下几个方面：1.萃取血清抗体的双水相系统建立与优化。首先对双水相系统的组成成分进行筛选，得出最佳聚合物和亲液盐种类。然后优化双水相系统萃取条件，主要包括盐水相浓度及中性盐的浓度、pH大小等条件的优化。得出双水相系统的组成为50%（w/w）PEG6000、20%（w/w）硫酸铵、pH=7.0、加入5%（w/w）氯化钠后效果更佳。对双水相系统与血清添加比例进行筛选。得出双水相系统与血清的最佳比例为聚合物水相体

4、积：盐水相体积：血清体积=3：3：1。2.利用双水相系统工业化生产血清中抗体。通过扩大500倍(500mL)、10000(10000mL)倍，所提抗体得率及纯度均不变，工艺稳定性好。本研究还从生产成本、人力、物力、生产周期、所提抗体纯度及得率等方面与目前用于工业生产的硫酸铵盐析法进行对比分析。此工艺可提高得率近1倍，且工艺简单、成本低、节省时间、人力和物力。3.抗体冻干条件的筛选。本研究对不同冻干保护剂以及保护剂的浓度进行筛选，确定适合保护抗体液冻干的保护剂为蔗糖。为确保冻干后抗体的物理性状良好且效价

5、无降低，在反复筛选后得出抗体最佳冻干保护剂为5%（w/w）的蔗糖。I根据筛选的冻干曲线加入适当浓度保护剂冻干后抗体常温放置一年后效价无影响。双水相系统的研究为血清中抗体的提取提供新工艺，为替换传统工艺提供依据。抗体冻干工艺的研究为抗体的保存与运输提供方法。也为今后抗体的广泛应用提供条件。关键词：血清，双水相系统，抗体，冻干IIAbstractStudyonthenewprocessofextractionandfreeze-dryingofserumantibodiesAntibodiesarekno

6、wnasimmunoglobulins,whichpresentinhumanandanimalblood(serums),exocrinetissuefluidsandotherliquids.Antibodiesaretheimportantsubstances,withwhichlettheorganismengendertheimmuneresponsetoantigen.Theyhaveavarietyofimmunefunctionsandcanbeusedforemergencytrea

7、tmentbywayofpassiveimmunizationwhenthediseasesoutbreaks.Neverthelesstheextractionproductiontechniqueofantibodiesisstillconventionalammoniumsulfatesalting-outmethodbyfar.Sincetheammoniumsulfateprecipitationmethodobtainslowerrateofantibodiesandtheprocesso

8、fextractioniscomplicated,thepriceofantibodiesisexpensive,asaresultofwhichthemethodisnotwidelyused.Thereforefindinganewextractionprocessinsteadofthetraditionalsaltingastoreduceproductioncostsandimprovetheyieldoftheantibodiesisthef