葡萄芽休眠相关基因vvarp和vvcdk的表达及休眠解除过程中氮素、抗氧化指标的变化

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5、SSIONOFTWOGENESASSOCIATEDWITHGRAPEBUDDORMANCYANDCHANGESOFNITROGENANDANTI-OXIDATIONSYSTEMDURINGTHEPROCESSOFDORMANCYRELEASEMajor:VineandwineResearchfield:ViticultureNameofPostgraduate:ZhuoMinAdviser:Pro.YulinFangDateofsubmission:2015.05YanglingShaanxiChina项目支持本研究得到了国家“十二五

6、”科技支撑计划“优质果酒加工关键技术研究及产业化示范”（2012BAD31B07）的资助。葡萄芽休眠相关基因VvArp和VvCdk的表达及休眠解除过程中氮素、抗氧化指标的变化摘要休眠是多年生木本植物在长期的自然进化过程中形成的对季节性气候变化的生物学适应性。作为一种多年生木本植物，葡萄新梢上的芽包括当年形成即可萌发的的夏芽及保持休眠状态、直到翌年环境条件适宜时才萌发的冬芽这两种着生部位相邻的芽。基于本课题组曾构建的冬芽和夏芽抑制消减cDNA文库，本研究以赤霞珠葡萄冬芽和夏芽为材料，将同源克隆和RT-PCR技术相结合，对部分候选基因进行

7、克隆和生物信息学分析，并利用Real-timePCR技术对不同萌发状态的夏芽及其相邻位置的冬芽中及单氰胺破眠处理不同阶段基因表达模式进行了分析，同时对单氰胺破眠处理不同阶段氮素、抗氧化指标的变化进行分析，为揭示葡萄芽生理休眠及解除的本质奠定基础。主要研究结果如下：1.通过克隆获得了葡萄生长素抑制蛋白基因VvArp的全长序列，VvArp编码的蛋白质中含Auxin-repressed家族的保守结构域，属水溶性非分泌型蛋白，不含信号肽和跨膜结构域。基因表达模式分析结果表明：随着夏芽的萌发，VvArp基因在不同节位的冬、夏芽及在同一节位的冬、

8、夏芽之间表达量大体上呈现显著性差异；另外，VvArp基因在单氰胺破眠处理组和对照组中表达量均呈降低趋势，且在各个阶段的冬、夏芽中均有差异性表达，相对而言，对照组降低幅度较小。2.通过克隆得到了葡萄细胞周期蛋白依赖激酶基因