猪嗜血支原体血液直接pcr方法的建立及抗猪嗜血支原体中药单体的体外筛选

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1、分类号S855.1学号靡13im山巧農素大參全日制硕±学位论文猪嗜血支原体血液直接PC民方法的建立及抗猪嗜血支原体中药单体的体外筛选姓名:张晋强指导教师:马海利教授学科专业:预防兽医学培养单位:动物科技学院中国?山西?太谷二〇—五年六月ShanxiAriculturalUniversitgyMast;erDereeDisseii;ationgEstablishmentofblooddirectPCRfbrassaya

2、nd-screeningnaturalcomoundswith2intiM.suisp加?activitw化0yName:JinqiangZhangSupervisor:Prof.Ha化MaMaor:Preven村yeVeterinarMedicinejyTrainingUnit:CollegeofAnimalScienceandVe化rinaryMedicineTaiguShanxiChinaJune.2015学

3、位论文原创性声明本人郑重声明,独立进:所提交的学位论文,是在导师指导下行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文研究做出过重要贡献的个人和集体k乂明确方,均已在文中式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签為(亲笔):带棄來年月曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定。即学位论文的知识产权属山西农业大学;同意学校保留并向国家有关部口或机

4、构送交论文的原件、复印件和电子版;允许论文被查阅和借阅人授权山西农业大学可从将学位论文的全部或部分内容编入有;本关数据库进行检索,可"采用影印、缩印或柱描等复制手段保存、疋编学位论文。作者签為(亲笔):次《豕年月曰导师签名(亲装年月日本研究由-山西省科技攻关项目(项目编号:201303110281)提供资助ThisresearchwassuortedbKeScien村巧CandTechiioloialppyygProectofShanx

5、iProvincejGrant-No.201303110281()目录摘要1前胃21猪嗜血支原体的特性21.1分类地位22形态21.及染色特征1.3培养特征31.4理化特性32猪嗜血支原体的致病性42.1概述42.2流行病学42.3发病机理42.4临床症状52.5病理剖检变化52.6病理组织学变化53猪嗜血支原体的检测方法63.1镜拾法63.26分子生物学方法4猪嗜血支原体病的治疗

6、药物74.1神制剂74.2抗血液原虫类药物74.3抗生素类药物84.4中药及其制剂85抗嗜血支原体药物筛选模型95.19体外培养药物筛选法5.2实验动物感染筛选法106研究目的和意义10材料与施121M料121.1猪只121.2病原体12-51.3PK1猪肾细胞121.4主要仪器口1.5试剂与耗材131.6主要试剂的配制131.7中药单体及对照药物152方&162.1血液直接PCR

7、的建立162.2重组质粒标准品的制备172.3中药单体的体外巧步筛选1924b.中药单体对Msw杀灭效果试验21结S231血液直接PCR的建立231.1血液直接PC民扩増及特异性试验巧1.2血液直接PCR目的片段测序231.3血液直接PCR敏感性试验241.4血R的比25液直接PCR与常规PC较2重组质粒的构建253中药单体溶解试验264中药单体安全试验275药物对血液直接PCR的影响276中药单体初步筛选29

8、7PCR扩増动力学曲线、标准曲线及烙解曲线30q8药物对Msm扣杀灭作用结果32■巧341血液直料CR342swiMs体夕愼养343qPCR检测Mjwis拷贝数354抗虹中药单体的体外筛选%结论39参考献40Abstract45附录47致谢49猪嗜血支原体Jfil液直接PCR方法的建立及抗猪嗜化支原体中药单体的体外締选摘要目’血液直接的:建立枪测Msws的PCR方法,筛选

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