猪传染性胃肠炎病毒感染st细胞差异蛋白质组学研究

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1、分类号：S855.3学校代码：10712UDC：636.09研究生学号：B08204密级：公开2015届攻读博士学位研究生学位（毕业）论文猪传染性胃肠炎病毒感染ST细胞差异蛋白质组学研究学科专业：预防兽医学研究方向：分子病原学与免疫学研究生马瑞丽指导教师：张彦明教授完成时间：2014年12月中国陕西杨凌Classificationcode:S855.3Universitycode:10712UDC:636.09Postgraduatenumber:B08204Confidentialitylevel:publicDiss

2、ertationforDoctorDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015PROTEOMICANALYSESOFSWINETESTICULARCELLSINFECTEDWITHPORCINETRANS-MISSIBLEGASTROENTERITISVIRUSMajor：preventiveveterinarymedicineResearchfield：molecularetiologyandimmunologyNameofPostgraduate：MaRuiliAdviser:：Prof.Zh

3、angYanmingDateofsubmission:：Dec，2014YanglingShaanxiChina研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的博士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它

4、教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:时间：>〇/多年去月么〇曰导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的博士研究生$务所呈交的博士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责

5、任。时间：如/土年d月从日关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关邵门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关

6、规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人）未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名：时间：p/d年3月曰导师签名时间：如/3年5月於曰猪传染性胃肠炎病毒感染ST细胞差异蛋白质组学研究摘要由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV)引起的猪传染性胃肠炎是一种急性肠道

7、传染病，以2周龄以下仔猪呕吐、脱水、严重腹泻，极高发病率和病死率（可达100％）为特征。该病的发生给世界养猪国家带来了巨大的损失。但关于该病毒的分子致病机制尚未完全清楚，且基于TGEV感染宿主细胞的蛋白质组学研究较少。猪睾丸（ST）细胞对TGEV病毒很敏感，常用来增殖、分离TGEV病毒。本研究用ST细胞作为靶细胞，采用同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）结合二维液相色谱-串联质谱（2DLC-MS/MS）高通量蛋白质组学技术对TGEV感染和未感染的ST细胞进行比较蛋白质组学分析，获得了TGEV感染宿主细胞差异表达蛋白质组

8、数据，并利用生物信息学方法对差异表达蛋白进行分析，以期发现新的诊断、预防和治疗靶标，为揭示TGEV致病机制奠定基础。具体内容和结果如下：（1）为了确定4重-iTRAQ标记蛋白质组学分析样品的时间，首先应用ST细胞进行TGEV感染试验，对TGEV感染引起的细胞病变效应（CPE）进行观察,并用RT-PCR试验对感染细胞中