猪melk抑制bcl-g介导细胞凋亡的研究

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1、学校代码：10712分类‘'S828研究生学号：2012051298UDC：636.4密级：公开*灶农林奇牧夫学2015届攻读硕士学位研究生学位（毕业）论文猪MELK抑制BCL-G介导细胞凋亡的研究学科专业基础兽医学__________研究方向动物神经内分泌与免疫调控_研究生____________陈晓霖_____________指导教师___________张德一礼____________完成时间__________2015J______________中国陕西杨凌Classificationcode:S828Universitycode:10712UDC:636.4Postgradu

2、atenumber:2012051298Confidentialitylevel:PublicThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015PORCINEMELKINHIBITINGBCL-GMEDIATEDAPOPTOSISBYSTSMajor:BasicVeterinaryMedicineResearchfield:AnimalneuroendocrineandimmuneregulationNameofPostgraduate:ChenxiaolinAdviser:Prof.ZhangdeliDateofsubmission:

3、May,2015YanglingShaanxiChina研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如杲违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。导

4、师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的颂士研究生我的硕士研究生所呈交的硕士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取獨萬于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕北）论

5、文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，必须以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任.任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或

6、扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名:时间年月飞，曰猪MELK抑制BCL-G介导细胞凋亡的研究摘要母系胚胎亮氨酸拉链激酶（MELK，maternalembryonicleucinezipperkinase），参与广泛的细胞变化过程，如细胞凋亡和细胞增殖过程等。MELK蛋白N端的催化结构域是该蛋白的最主要活性部位，但是受UBA和TP-rich结构域的制约。在乳腺癌细胞中MELK可以直接磷酸化BCL-GL，抑制BCL-GL介导的细胞凋亡作用，进而促进乳腺癌细胞的存活和增殖。本实验室已克隆出猪MELK（pMELK）和猪BCL-G（pBCL-G）基因，并通过免疫共沉淀证明pMELK能与pBCL

7、-G相互作用。本论文运用流式细胞术着重研究了pMELK对pBCL-G介导细胞凋亡的影响。研究结果如下：1、本实验将pMELK和pMELK催化功能域（catalyticdomian，cd）部分分别连接到pEGFP-C1真核表达载体，构建重组载体pEGFP-pMELK和pEGFP-cd。采用脂质体法转染。通过荧光显微镜观察和westernblot鉴定了融合蛋白GFP-pMELK和GFP-cd的表达。2、瞬时过表达GFP-pMELK蛋白或