渤海湾沉积物原油降解菌群的筛选及其降解条件优化

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1、中图分类号X522论文编号1006015-0406学科分类号610.3020密级A身域>A旁TIANJINUNIVERSITYOFTECHNOLOGY硕士学位论文.S.DISSERTATION渤海湾沉积物原油降解菌群的筛选及其降解条件优化EnrichedofOil-degradingMicrobialFlorafromSedimentsintheBohaiSeaandOptimizationof�一flmmm环境科学与工程环境科学与工程雷霆王晓丽副教授天津理工大学研究生部二〇一四年十二独釗性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作和取得的研究成果，除了文中特别加以

2、标注和致谢之处外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得天津理工大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论丈作者答名：、•答孛《期：加5年3月1日学位袼文板权使用援权书本学位论文作者完全了解天津理工大学有关保留、使用学位论文的规定。特授权天津理工大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编，以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复本和电子文件。(保密的学位论文在解密后适用本授权说明）•学位论文作者筌名：

3、雷智导师答名AMIG签孛QM：2o(S年3月7筌孛£1期年3月？日分类号：610.3020密级：天津理工大学研究生学位论文渤海湾沉积物原油降解菌群的筛选及其降解条件优化（申请硕士学位）学科专业：环境科学与工程研究方向：环境污染修复作者姓名：雷霆指导教师：王晓丽副教授2014年12月ThesisSubmittedtoTianjinUniversityofTechnologyfortheMaster’sDegreeEnrichedofOil-degradingMicrobialFlorafromSedimentsintheBohaiSeaandOptimizationofDegradat

4、ionByLeiTingSupervisorWangXiaoliDecember，2014摘要在海洋以及沉积物环境中存在着大量以原油为碳源的微生物，筛选出的原油降解菌在实验室中均能表现出很好的降解效果，但在溢油现场进行生物修复时降解效果明显下降。因此，在海洋溢油事故中微生物修复技术的研究重点是通过构建菌群和优化修复条件，从而强化微生物降解原油的能力。本研究主要目的是从海洋沉积物中筛选原油降解菌，构建降解菌群，并对其降解条件进行优化。旨在为海洋及近海岸溢油修复提供降解菌源，为强化溢油修复技术提供理论依据。从渤海湾采集原油污染沉积物样品，利用不同培养基富集驯化原油降解菌群，通过平板划线分

5、离筛选得到原油降解单菌株，利用单菌株构建混合菌群；选取影响原油降解的环境条件（pH、N/P、原油含量、接种量）设计实验，获得各环境条件对单菌株降解原油的影响特性；最后通过模拟泥水混合体系，研究构建的菌群对沉积物中原油的降解能力，并对不同环境温度下菌群降解效果进行条件（N/P、接种量）优化。研究结果如下：1.采用2种培养基（原油为唯一碳源、葡萄糖加原油为共同碳源）经过3周期驯化，从渤海湾沉积物中富集得到原油降解菌群。利用原油为唯一碳源的无机盐培养基驯化原油菌群降解率较高，28d达到58.2%。2.从驯化得到的菌群中筛选出2株原油降解菌戈登氏菌GordoniaamicalisD12和红球

6、菌Rhodococcussp.D2。菌株D12在24h后进入对数生长期，菌株D2在12h后进入对数生长期。3.通过对影响单菌株原油降解能力的环境条件进行研究得出，D12在pH值9.0时原油的降解效率最高（为43.98%），D2在pH值为8.0时原油的降解效率最高（为23.75%）；D12和D2在不同pH条件下降解率之差小于9%，pH对原油降解率影响较小；菌株D12在N/P为7:1时降解率最高（为42.71%），菌株D2其在N/P为5:1时降解率最高（为31.87%）；菌D12和D2在原油浓度为3-9g/L降解率均较高，原油浓度的改变对菌株的降解效果影响不大；菌株D12的接种量为11%

7、时原油的降解效率最高（为36.28%），菌株D2的接种量为9%时原油的降解效率最高（为21.53%）。4.将戈登氏菌GordoniaamicalisD12和红球菌Rhodococcussp.D2构建混合菌群接种到泥水混合体系中，通过对影响菌群原油降解的环境条件的优化研究得出，随着接种量的增加菌群的降解率增大（接种量为20%降解率最大为67.43%）；菌群在N/P为5:1降解率是最高的（为72.19%）。5.菌群降解率随着温度升高而增大（30℃降解率最大为8