某规模化猪场猪流行性腹泻病毒检测及主要毒力基因克隆分析

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1、分类号:S851.3学校代码:10712UDC:636.09研究生学号:2013050711密级:公开级*灶农林奇牧夫学2015届全日制硕士专业学位研究生学位论文某规模化猪场猪流行性腹泻病毒检测及主要毒力基因克隆分析类型兽医硕士领域、方向预防兽医学研究生许夏澎指导教师张彦明教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌研究生学位论文的独创性声明本人声明:所呈交的全日制硕士专业学位论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果;论文中的研究数据及结果的荻得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》,如果违反此

2、规定,一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知,除^了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结杲,也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:外灰私时间::x〇l少年《月3曰导师指导研究生学位论文的承诺本人承诺:我的全日制硕士专业学位研究生所呈交的硕士学位论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结茅......................彳职务工作的结

3、果,并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》,我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研究生学位论文使歷权的说明本学位论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸廣版和电子版,允许论文被查阅和借阅;同意西北农林科技大学将本学位论文的全部或部分内雜权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版,并享受相关权益。本人保证,在毕业离开(或者工作调离)西北

4、农林科技大学后,发表或者使用本学位论文及其相关的工作成果时,将以西北农林科技大学为第一署名单位,否则,愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律贝任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人(包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意,不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为,否则,按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内,不得以任何方式发表、借阅、复印、神或扫描复制手段保存、汇编论文)研究生签名:时间••年/月〉曰Classificati

5、oncode:S851.3Universitycode:10712UDC:636.09Postgraduatenumber:2013050711Confidentialitylevel:PublicThesisforMaster’sDegreeNorthwestA&FUniversityin2015THEDETECTIONOFPEDVANDCLONINGOFMAJORVIRULENCEGENESINALARGE-SCALEPIGGERYMajor:MasterofVeterinaryResearchfield:PreventiveV

6、eterinaryMedicineNameofPostgraduate:XuXia-pengAdviser:Prof.ZhangYan-mingDateofsubmission:May2015YanglingShaanxiChina某规模化猪场猪流行性腹泻病毒检测及主要毒力基因克隆分析摘要猪流行性腹泻(Porcineepidemicdiarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)引起的以呕吐、腹泻和脱水为主要特征的猪急性接触性肠道传染病,对新生仔猪的致死率可达100

7、%。该病在世界范围内频发,给养猪业造成了巨大的经济损失。本研究以2014年11~12月份在陕西渭南某规模化养猪场发生的疑似PEDV感染仔猪为研究对象,经临床症状观察和病理剖检,初步诊断为猪流行性腹泻;通过对20份小肠病料进行PEDVM基因的RT-PCR检测,检测出了9份猪流行性腹泻病毒核酸,PEDV检测阳性率为45.0%。参考GenBank中CV777经典毒株全基因组序列(AF353511.1),设计了扩增PEDVORF3基因、M基因和S基因部分序列的引物,对相应基因进行了克隆和序列分析,通过与CV777株对比分析,发现分离株的M基

8、因具有高度保守性,可以作为检测PEDV的靶基因;WN毒株与经典毒株CV777相比,ORF3基因共存在11处碱基突变,这些碱基突变是否导致病毒毒力的改变还有待研究。S基因变异较大,S蛋白内分的核心中和表位(CEO,499-638aa)共

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