枣黑斑病症状表现、病菌分析及室内药剂筛选

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1、枣黑斑病症状表现、病菌分析及室内药剂筛选摘要为了明确新疆枣黑斑病在叶、花、果等组织上的症状表现及病菌归属，更有效地开展防治工作，对黑斑病的田间症状表现进行了观察和记录，并对不同病组织进行了病原菌分离及致病性测定，在此基础上采用形态学观察，结合核糖体ITS序列分析和微管蛋白β-tubulin序列分析，对病原菌进行了鉴定。结果表明，叶片、花和果均可感染黑斑病菌，室内接种和田间观察表现出相同的症状，且为害枣叶、枣花和枣果的病原菌可以相互侵染，表现出不同组织枣黑斑病典型症状。从不同发病组织上分离纯化得到357株分离株，形态观察结果表明，

2、感染叶、花和果的菌株均为链格孢属链格孢(A.alternata)。选取3个具有代表性的菌株，利用真菌rDNA-ITS通用引物(ITS1和ITS2)和β-tubμlin引物进行PCR扩增并测序和比对分析，结合形态学特征确定引起骏枣果实、叶片和花的病菌均为链格孢菌Alternariaalternate(Fr.)Keissler。采用菌丝生长速率法和凹玻片法测定了7种杀菌剂对红枣黑斑菌菌丝的生长和孢子萌发的抑制作用。结果表明，除20%噻菌铜外，其余6种杀菌剂对菌丝生长均具有一定的抑制作用，其中22.2%抑霉唑对菌丝生长的抑制作用最强，

3、其次为25%吡唑•醚菌酯和10%苯醚甲环唑。凹玻片法测定结果表明，60%唑醚•代森联、80%代森锰锌和22.2%抑霉唑对红枣黑斑病菌分生孢子萌发具有较好的抑制作用。离体果实接种测定结果表明，60%唑醚•代森联、80%代森锰锌对黑斑病具有很好的保护，22.2%抑霉唑、25%吡唑•醚菌酯、10%苯醚甲环唑和55%硅唑•多菌灵具有较好的治疗作用。显微观察结果表明，对菌丝具有明显抑制作用的药剂可致使黑斑病菌菌丝生长形态异常，出现菌丝扭曲肿大，分支增多短小、菌丝壁溃解、原生质浓缩及外渗等异常现象；对孢子萌发具有明显抑制作用的药剂可致使孢子

4、肿大畸形或破裂。关键词：枣黑斑病；病原分析；杀菌剂毒力测定；Pathogenanalysis、symptomexpressionandfungicidescreeningagainstPathogenofJujubeBlackSpotDiseaseAbstractTodefinitethesymptomexpressionofjujubablackpatchandtaxonomicpositionofpathogenfromthetissueofleaves,flowers,fruitandtocontrolthedisease

5、,thesymptomsofjujubeblackspotwereobservedandrecorded,thepathogenwereisolatedfromdifferenttissueandthepathogenicitywasdetermined.CombinedwithrDNA-ITSsequenceandβ-tubuLinsequenceanalysis,thepathogenwereidentificatedbymorphologicalobservation.Theresultsshowedthattheleav

6、es,flowersandfruitswereinfectedbyAlternariaspp.,thesymptomexpressionoffieldobservationwasthesameasindoor,andthepathogencouldinfectfromthejujubeleaves,flowersandfruitseachother,thetypicalsymptomsofjujubefruitswereshowed.357isolateswereobtainedfromdifferenttissue.Thest

7、rainsfromtheinfectedleaves,flowersandfruitswereidentifiedasA.alternatabythemorphology.3strainswereselectedasmolecularidentificationbyPCRamplificationusingthefungirDNA-ITSuniversalprimers(ITS1andITS2)andβ-tubuLinprimersandsequenceanalysis.Thepathogensfromleaves,flower

8、sandfruitswereidentificatedasAlternariaalternatebymorphologicalobservationandmolecularsequenceanalysis.Theinhibitoryeffectsof7fungi