普陀山苔草(carex putuoshan sp.)铅锌耐性机制初步研究

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1、分类号巧３．学号Ｓ２０１２１３２１四川巧化大学顽壬学位论义普陀山苔草（ＣａｒａｃｐｗｆｗｏｓＡｔｗ铅锋耐性机制初步研究蓝焕杰指导热柄朱雪梅教巧，那巧荣巧巧学科专业！化态学研巧方向：农业巧境生态．＇１．？：—－Ｉ２０１５年６巧，—１ｊ．－又■．＇．＇矿＾－ｆ１．．％‘Ｖ．．．ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮＳｕｂｍｉｔｅｄｉｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔ民ｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ

2、ｆｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇＴｏｌｅｒａｎｃｅＭｅｃｈａｎｉｓｍＰｒｅｌｉｍｉｎａｒＳｔｕｄｏｆＣａｒｅｘｙｙｕｔｕｏｓｈａｎ－ｐ５？．ｕｎｄｅｒＰｂＺｎＳｔｒｅｓｓ／Ｂ：ＨｕａｎｉｅＬａｎｙｊＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＸｕｅｍｅｉＺｈｕＰｒｏｆ．ＪｉｒｏｎｇＳｈａｏＰｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ：ＥｃｏｌｏｇｙＪｕｎｅ２０１５论文独创性声明本人巧重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进斤研究工作所取得的成果。尽我所知，学位论文中，除了文中特别加Ｗｆｅ注和致谢的地方外不包含其他个

3、人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教巧机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。；０硏究化签名三（５年＾Ｈ８曰关于论文使用授巧的声明，本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定即：学校有权保留并向固家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体七发表、传播学位论文的全部或部分内容。＾幸＜论文不保密。□本论

4、文保密，在年解密ｌ＾＾适ｗ本授权，＂＂７）（巧在Ｗ上□内划硏究生签名：兴年Ｗ８曰達淚苗養／５＾导师签名：年片《曰＇一ｉ摘要本文ｗ课题组前期在雅安狭源县普陀山铅锋矿区所发现的苔草属一疑似新种普一陀山苔草（Ｃａｍｔ／ｗｆｔ／ｏｓＡａｒｔｗＯ为研究对象，通过人工砂培控制性试验，在铅、巧单及复合处理下，从铅粹亚细胞分布、抗氧化系统响应、藝合作用Ｈ个方面对普陀山苔草耐受重金属机制进行了研究；利用同源克隆的方法克隆了普陀山苔草两个重金属耐－？性基因，金属硫蛋白ＩＩ型基因和Ｙ谷氨醜半脫氨酸合成酶基因ＧＣＳ的（Ｑ）保守片段；利用实时巧光

5、定量ＰＣＲ技术分析了普陀山苔草在铅巧胁迫下邱Ｍ巧和ＣｐＧＣＳ的表达量。为植物在复合重金属±壤污染耐性机制研究提供参考，为生物工程治理修复重金属±壤污染提供理论依据。主要研究结果如下：１在不同浓度铅摔胁迫条件下，普陀山苔草根亚细胞组分中铅巧含量均大于叶（）片亚细胞组分中铅巧含量。普陀山苔草叶片和根各亚细胞组分中铅含量分布均呈现出，＞＞细胞壁组分（Ｆｌ）可溶性组分（Ｆ３）细胞膜及细胞器组分（Ｆ２），而巧含量分布均呈现出，可溶性组分（Ｆ３）＞细胞壁组分巧１）＞细胞膜及细胞器姐分（Ｆ２）。铅巧复合处理下，铅浓度越高，普陀山苔草亚细胞叶片各组分铅含量随

6、着铅浓度的升高而升高，细胞壁组分（Ｆ１）中的锋含量随着铅浓度的升高而升高，可溶性组分（Ｆ３）中的巧含量却随着铅浓度的升高而降低。不同重金属离子通过不同的方式积累在不同的亚细胞组分中，且铅可一能在定程度上能抑制锋进入普陀山苔草细胞内，降低巧对细胞的毒害作用。（巧在不同浓度铅巧胁迫条件下，普巧山苔草叶片的超氧化物歧化酶巧ＯＤ）活性均高于过氧化氨酶（ＣＡＴ）活性，旦ＳＯＤ活性下降时，ＣＡＴ活性増加。说明由于ＳＯＤ与ＣＡＴ不同活性氧的清除功能，在普巧山苔草抗氧化过程中所起到的不同的作用。谷脫甘狀还原酶（ＧＲ）和抗坏血酸过氧化物酶（ＡＰＸ）活性均随着处理

7、浓度的升高呈现先升高后降低的趋势，但ＧＲ活性变化差异显著高于ＡＰＸ活性变化，说明这两种酶均具有低促高抑的特性，但Ｇ艮在普陀山苔草抗氧化作用中与ＡＰＸ相比，更为活跃。抗坏血酸ＡｓＡ与还原性谷腕甘狀ＧＳＨ相同，都是在低浓度的铅巧胁迫下诱导合成，（）（）又在高浓度铅锋胁迫下大量消耗，但ＧＳＨ含量的变化差异窩于ＡｓＡ含量变化差异。说明ＧＳＨ在普陀山苔草抗氧化过程中发挥着更重要的作用。（３）通过同源克隆的方法，Ｗ龙葵基因的简并引物进行ＰＣＲ扩増，获得ｂ。了普陀山苔草砂Ｍ７２基因的保守片段，长度为２３７ｐＮＣＢ