日本血吸虫wnt分泌相关蛋白的抑制研究及wnt1的鉴定分析

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1、密级：论文编号：中国农业科学院学位论文日本血吸虫Wnt分泌相关蛋白的抑制研究及Wntl的鉴定分析EffectsofInhibitiononSchistosomaJaponicumWiltsSecretionAssociatedProteinsandCharacterizationofSJaponicumWntl硕士研宄生：塔嫌指导教师：苑纯秀副研宄员申请学位类别：鲁医硕士专业领域名称：魯医培养单位：上海鲁医研宄所研宄生院2015年5月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽

2、我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年/月^円关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、

3、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：时间年<月7曰加心年G月幺R导师签名:1錢时间中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目日本血吸虫Wnt分泌相关蛋白的抑制研究及Wntl的鉴定分析，论文作者塔娜专业领域兽医研究方向不区分研究方向乂-指导教师苑纯秀培养单位(研究所、中心）上海#医研究所姓名职称单位专业签名盲评评阅盲评人盲评辩程训佳教授复旦大学预防兽医学主席朱建国教授上海交通大学预防兽医学冯新港研究员上海兽医研究所预防兽医学答刘金明研究员上海兽医研究所预防兽医学辩朱传刚副研究员上海兽医研究所预防

4、兽医学委员会议记录（秘书）顾惠明论文答辩时间地点2015年5月27日，上海兽医研究所密级:论文编号:中国农业科学院学位论文日本血吸虫Wnt分泌相关蛋白的抑制研究及Wnt1的鉴定分析EffectsofInhibitiononSchistosomaJaponicumWntsSecretionAssociatedProteinsandCharacterizationofS.JaponicumWnt1硕士研究生：塔娜指导教师：苑纯秀副研究员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：上海兽医研究所研究生院2015年5月

5、Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationEffectsofInhibitiononSchistosomaJaponicumWntsSecretionAssociatedProteinsandCharacterizationofS.JaponicumWnt1M.S.Candidate：NaTaSupervisor：Chun-xiuYuanDegree：MasterofVeterinaryScienceSpecialty:VeterinaryM

6、edicineMay2015摘要血吸虫(Schistosome)感染人及多种哺乳动物，具有重要公共卫生意义。Wnt信号通路是参与调控胚胎形态发育和生长，成体组织内环境的稳态等生物学过程的保守的信号通路。Wnt蛋白的分泌对Wnt信号通路的开启具有重要意义，本研究利用Wnt信号蛋白分泌抑制剂及RNA干扰Wnt信号蛋白分泌相关基因(Porcupine及Wntless)来阻碍Wnt蛋白的分泌，探索Wnt信号通路转导的抑制对日本血吸虫生长发育及内环境稳态的影响；同时，对日本血吸虫Wnt1基因进行鉴定。1.日本血吸虫Wnt分泌相

7、关蛋白的抑制研究选择以Porcn为靶点的Wnt信号蛋白分泌抑制剂C59给体外培养血吸虫添加及给感染血吸虫的小鼠口服，观察对体外培养和宿主体内生长虫体的Wnt信号通路的调节及产生的生物学效应。利用荧光定量PCR技术对Wnt信号通路成员基因mRNA水平进行比较，确定20nmol/L为C59的最佳作用浓度；添加C59的第6天，体外培养的14天童虫的Wnt信号通路开始受到相对持续的抑制；添加C59的第7天体外培养的7天及14天童虫作用虫体的Wnt信号通路受到抑制程度最大；C59对14天童虫Wnt信号通路的抑制效果要比7天童虫

8、更明显。荧光定量PCR分析，结果显示C59处理的7天童虫及14天童虫的促凋亡相关因子及DNA损伤相关因子的转录水平均有不同程度的上调，且14天虫体这些基因的转录水平上调的程度更大，推测是Wnt信号通路的抑制程度越大，细胞就更趋于凋亡。体外培养的14天虫体的扫描电镜结果显示：C59组虫体与DMSO组及空白对照组相比，体表结构没有明显差别，表明C5