幼龄羔羊超数排卵及体外生产胚胎技术的研究

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1、分类号：S852.1单位代码：10193密级：公开学号：2012608硕士学位论文幼龄羔羊超数排卵及体外生产胚胎技术的研究TheStudyonSuperovulationandInVitroEmbryoProductioninLambs作者姓名：尹峰学位类别：农学硕士专业名称：基础兽医学研究方向：动物解剖与组织形态学指导教师：王利民教授所在学院：动物科学与技术学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文

2、中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送

3、交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人(同意/不同意，务必打印后填写)吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版(涉密学位论文解密后应遵守此协议)。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日项目资金吉林省教育厅“十二五”科学技术研究（No.2012042）Jilinpro

4、vinceeducationdepartment"theTwelfthFive-YearPlan"scientificandtechnicalresearch(No.2013AA102506)国家高技术研究发展计划资助项目（863计划）(No.2013AA102506)ThenationalhightechnologyresearchanddevelopmentprogramofChina(863program)(No.2013AA102506)摘要东北细毛羊为肉毛兼用优良品种，本试验研究了东北细毛羊幼母羔超数

5、排卵、卵母细胞成熟培养及体外受精的影响因素，旨在为该技术在生产实际中应用提供相关借鉴。试验共分为三部分：分别研究了羔羊超数排卵效果影响因素、卵母细胞成熟液成熟效果和精子获能方法及受精卵发育的影响因素，结果如下：1.6周龄羔羊回收卵枚数、回收率及可用卵枚数高于4周龄组和8周龄组，但差异不显著(P>0.05)，可用卵率显著高于4周龄组(P<0.05)；采用FSH+PMSG(加拿大产)超排后回收率及可用卵率均高于其它三组，其中可用卵率极显著高于FSH+LH(国产)组(P<0.01)；秋季可用卵率高于春季并极显著高于夏

6、季(P<0.01)；首次超排卵母细胞回收率极显著高于重复超排组(P<0.01)，可用卵率高于重复组但无显著差异；非运输组可用卵率极显著高于运输组(P<0.01)，卵回收率无明显差异(P>0.05)。2.比较了五种培养液的成熟效果，各组间成熟率差异不显著(P>0.05)，表明可以使用10mg/mlBSA替代血清(10%FBS)的添加。3.相同获能时间内，对照组获能率显著低于肝素添加组(P<0.05)，肝素添加组获能2h获能率达到峰值，并显著高于对照组(P<0.05)；25μg/mL组精子存活时间显著低于对照组(P

7、<0.05)，同时显著高于50μg/mL、100μg/mL添加组(P<0.05)；综合结果表明，肝素浓度25μg/ml，处理2h的精子获能效果最好。卵母细胞直径>130μm组第二极体率显著高于d<120μm组，卵裂率显著大于120μm

8、0.01)，添加量为20ng/mL较10ng/mL囊胚率有极显著提高(P<0.01)。SOF体系卵裂率显著高于TALP体系(P<0.05)，而SOF体系囊胚率极显著高于TALP体系(P<0.01)。关键词：羔羊；超数排卵；体外成熟；体外受精；胚胎发育IAbstractThenortheastfine-woolsheepwasafinevarietiesusedformeatandwoo