干扰和过表达热休克转录因子2对肠上皮细胞凋亡和迁移的影响

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1、专业学位硕±学位论文单位代码；１０６７８分类号：Ｒ５７４．１学号；２０１２４７８密级：見略Ｓ种太常硕壬学位论文馨干扰和过表达热休克转录因子２对肠上皮细胞调亡和迁移的影响院樓一）、所昆明医科大学第临床医学院研究生姓名李小玉学科（消化内科）、专业内科学学位类型专业学位指导教师缪应雷教授二〇—五年五月尾略ｉｌ种天常硕壬学位论文干扰和过表达热休克转录因子２对肠上皮细胞渦ｔ和迁移的影晌研究生姓名李小玉学科、专业内科学（消化内科）申请学位类型专业学位指导教师缪应雷教授完成日

2、期二〇—五年五月尾跨Ｓ种常研究生学位论文研究撰写声明本人郑重声明；本学位论文是我本人在导师指导下，独立进行学位课题研究所取得的研究成果。论文中除特别加Ｗ标注和致谢的地方外，不包含他人或其他机构己经发表或撰写过的研究成果。对本研究和论文做过贡献的同道我均在论文中作了一明确的说明并表明谢意。该学位论文资料若有不实之处，本人愿承担切相关责任。论文作者＇（签名）：＾長＞（ｙ年ｒ月日＾尾巧Ｓ种，、掌研究生学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解昆明医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复

3、印件和电子版，允许论文被查阅和借阅（。学校可公布论文的全部或部分内容确属保密内容已注明，并在解密后遵守此规定）；学校可采用影印、缩印或其他手段保存本学位论文。学位论文作者（签名）：３心＾指导教师（签名）：Ｗ＾＾＾，户带月日年月日７＾５／／＂本人及导师同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盘版）电子杂志狂＂进行电子和网络出版，并编入ＣＮＫＩ系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容《》。，同意按中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程规定享受相关权益７（学位论文作者（签名）：、指导教师签名）：＾＾它、＾＾年少月曰年刊曰Ｌ

4、心ｒク目录英文缩略词表１中文摘要２英文摘要５前言８材料与方法１１境Ｗ：２５４０讨论结论４３参考文献４４研究经费和发表论文情况说明４７综述７８致胃５７昆明医科大学硕±研究生学位论文英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称ＩＢＤＩｎｆｌａｍｍａｔｏｒｏｗｅｌＤｉｓｅａｓｅ炎症性肠病ｙＢＵＣｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓ溃竊性结肠炎ＣＤＣ＊ｒｏｈｎｓｄｉｓｅａｓｅ克罗恩病ＨＳＦ２ｈｅａｔ浊ｏｃｋｆａｃｔｏｒ２热休克转录因子２ＳＰ

5、ＳｔｒｅｓｓＰｒｏｔｅｉｎ应激蛋白ＨＳＰｈｅａｔｓ；ｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ热休克蛋白ＨＳＦｓｈｅａｔｓｈｏｃｋｆａｃｔｏｒｓ热休克因子ＬＶｅｎｔｉｖｉｒａｌｖｅｃｔｏｒ慢病毒载体ｌＦＢＳｆｅｔａｌｃａｌｆｓｅｒｕｍ胎牛血清ＢＳＡＢｕｌｌＳｅｒｕｍＡｌｂｕｍｉｎ牛血清白蛋白－－－－ＭＴＴ３－４５－Ｄｉｍ她ｌ化ｉ犯ｏｌ２ｌ２５ｄｉｈｅｎｌｔｅｔｒａ四甲基偶氮嗤避，ｙｙ），ｐｙｚｏｌｉｕｍｒｏｍｉｄｅＶＤＦＦｌｏｙｖｉｎｙｌｉｄｅｎｅｄｉｆｈｉｏｒｉｄｅ聚偏氣乙婦ＳＢｓｏｄｉｕｍｂｕｔｙ

6、ｒａｔｅ了酸钢圧ＣＸｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐ她ｅｌｉａｌｃｅｌｌ肠上皮细胞ＭＨＭｕｃｏｓａｌｈｅａｌｉｎｇ黏膜愈合１昆明医科大学硕±研究生学位论文干扰和过表达热休克转录因子２对肠上皮细胞调亡和迂移的影响硕±生：李小玉导师：缪应雷教授中文摘要研究目的：通过慢病毒载体介导的ＲＮＡ干扰技术过表达和沉默肠上皮细胞ＨＳＦ２表达，研究其对肠上皮细胞调亡和迁移的影响。研究方法；ＨＴ－２９（人结肠癌细胞株）作为研究材料（①选取，下酸钢设置不同时间点／浓度）诱导细胞调亡，ＭＴＴ法检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞调

7、亡、周期。按实验结果选取最佳Ｔ酸销浓度及时间位点。②慢病毒载体介导的ＲＮＡ干扰技术过表达和沉默结肠上皮细胞ＨＳＦ２表达；用倒置巧光显微镜、ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法检测目的基因在细胞中的转染效率。⑤细胞迁移实验（划痕法／Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室）检测过表达和沉默ＨＳＦ２后细胞迁移能力的改变。④经过表达和沉默ＨＳＦ２后的细胞，给予下酸钢（根据①选取的最佳时间位点、浓度）诱导调ｔ，ＭＴＴ法检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞调亡率、细胞周期。研究结果：ＭＴＴ－巧细胞増值活性在实验观察期