山荷叶种子最适萌发条件及离体快繁技术的研究

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1、分类号：S322.3单位代码：10193密级：公开学号：2012057硕士学位论文山荷叶种子最适萌发条件及离体快繁技术的研究StudyonSeedOptimumGerminationConditionsandRapidPropagationTechnologyofAstilboidestabularis作者姓名：刘美彤学位类别：农学硕士专业名称：园林植物与观赏园艺研究方向：园林植物资源与种质创新指导教师：顾德峰教授所在学院：园艺学院2015年5月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致

2、谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查

3、阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日摘要本研究以山荷叶（Astilboidestabularis）为试验材料，对山荷叶种子的最适萌发条件进行首次研究，包括低温层积处理时间、浸种处理、发芽床的选择以及光温条

4、件对种子发芽的影响。山荷叶离体快繁技术的研究发现山荷叶可以通过“以苗繁苗”的方式繁殖，以丛生芽诱导培养获得大量无菌苗，缩短育苗周期；以山荷叶幼胚为外植体，成功地建立起山荷叶无性繁殖体系，探讨了无机盐含量、植物激素种类及配比、蔗糖浓度、活性炭的添加等对山荷叶离体快繁的影响，得出了离体快繁各阶段的最适培养基。用DPSv7.05软件对试验结果进行多重比较分析，试验主要得到以下结果：1.山荷叶种子没有休眠特性，采后即播的发芽率为44.67%，但山荷叶种子有生理后熟现象，90d低温层积处理可以显著提高山荷叶种子的发芽率、缩短发芽时间，发芽率由采后即播的44.67%提高至7

5、0.33%；低温冷冻处理严重阻碍种子正常萌发；90d层积后的山荷叶种子经过400mg/L的GA3处理后发芽率提高到93.33%，而NAA和6-BA对山荷叶种子萌发有抑制作用。琼脂培养基和滤纸为山荷叶种子最适发芽床，发芽率分别达到75%和72%；山荷叶种子是喜光性种子，最适光照条件为周期性光照（13h/d），发芽率为72%，是全黑暗下的3.18倍；变温处理更有利于山荷叶种子萌发，15℃℃/25变温处理是最适的温度处理，发芽率为75.33%；常规繁殖中园土：河沙：草炭=1:1:1的混合基质是山荷叶种子萌发的最适基质，发芽率为71.33%。2.山荷叶种子最佳灭菌方式为

6、75%酒精灭菌30s后0.1%升汞灭菌4min的灭菌组合，污染率为2.67%，发芽率为74.15%；培养基种类对种子的萌发无显著影响，但对种子萌发出幼苗以后的生长有较大影响，在MS培养基中平均苗高达到最高，为2.34cm；蔗糖含量对山荷叶种子的萌发和苗的长势均有一定影响，30g/L的蔗糖含量为宜；无机盐含量对幼苗的生长量有重要作用，减少无机盐含量不利于幼苗的生长；MS培养基为幼苗培养的最适培养基；在进行幼苗繁殖培养时，尽量选择苗高大于3cm的幼苗。诱导丛生芽最适培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA，增殖系数与芽长达到最高，分别为6.27和4

7、.23cm，丛生芽生长健壮，叶色浓绿。1/2MS培养基为最适生根培养基。3.山荷叶未成熟蒴果的最佳灭菌方式为75%酒精灭菌30s后0.1%升汞灭菌4min组合灭菌；山荷叶幼胚经过60d的培养，筛选出MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg/LNAA为愈伤组织诱导最适培养基，诱导率为97.24%，诱导的愈伤组织呈黄绿色疏松颗粒状的胚性愈伤组织。诱导的愈伤组织经过60d的培养，分化出大量不定芽，愈伤组织分化的最适培养基为MS+1.5mg/L6-BA+0.05mg/LIBA+1.0mg/LGA3，分化率为91.67%。山荷叶不定芽经过50d的培养，不断增殖形成丛生芽，

8、MS+0.5mg/L6-