大豆炸荚基因的克隆分析及遗传转化

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4、我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其它人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得北京农学院或其它教育机构的学位或证书而一使用过的材料。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。：如研究生签名：；时间少年月房日夺片１关于论文使用授权的说明本人完全了解北京农学院有关保留、使用学位论文的规定，即；学校有权保留送、交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同

5、意北京农学院可＾用不同方式在不同１＾媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：＾麻？时间；年名月／＞０导师签名：时间：＜月日北京农学院硕±学位论文摘要摘要一一炸英是大豆的种自然属性，是影响大直产量的重要因素之。本研究的目的在于找到大豆中控制大豆英开裂的基因，并通过转基因技术将该基因转入大豆中黄１０中，观察大豆表形变化。ｉ和巧批地化两个基因。研究显试验前期通过对相关文献的查找，分别在拟南芥及桃中发现Ｗ示

6、，送两个基因均与拟南芥花器官的发育及果英开裂性状相关，于是通过将该基因与大豆基因组进行比对，从而在大豆中找到与之相似度较高的大豆基因。我们将Ｇｍ／１化Ｓ基因与过表达载体ｐＣｉ／ｌ做１４山００／／正打甲连接并通过农杆菌侵染大豆子叶节的方法，对大豆中黄１０进行遗传转化，并对大豆访心化Ｓ基因进行生物信息学分析。试验结果表明，通过ＤＮＡＭＡＮ将执另与巧／ｉ和户如必ＩＤ说两个基因进行比化相似度分别为７８％和８０％。通过ＰＣＲ扩增的大豆中黄１０基因与ＮＣＢＩ中该基因序列比对，相似度

7、为９９．８４％。使用农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法，将历心ＧＺＳ基因转入大豆中。试验中对潮霉素的使用浓度进行了筛选，最终确定丛生芽培养基中潮霉素浓度为８ｍｇ／１，伸长培养基中潮霉素浓度为５ｍｇ／１。通过ＰＣ民检测及激光典聚焦显微镜检测证明Ｇｍ＾Ｇ王Ｓ基因已成功转入大豆中黄１０中。通过对Ｔｏ代转基因植株的农艺性，，状观察发现，Ｔｏ代转化株有花期提前花器官增多抖及花败育的情况出现。在英开裂性状方面，己经成熟的Ｔ，代果英还未出现开裂的性状。通过生物信息学分析发现，仿基因全

8、长８５５ｂｏｐＣＤＳ区为７３５ｂ，其中含有ＭＥＦ２结构、ＤＮＡ结合位点、假定憐酸化位点和多狀结合位点。系ｐ统进化树分析发现，大豆与菜豆、田青相似度较高，在进化树中关系较近。关键词：大豆；炸芙；ＧｍＡＧＬ８；转基因；生物信息学北京农学院硕±学位论文摘要ＡｂｓｔｒａｃｔＰｏｄｓｈａｔｔｅｒｉｎｇｉｓａｎａｔｕｒａｌａｔｔｒｉｂｕｔｅｏｆ化ｅｓｏｙｂｅａｎ？。ｉｓ０打ｅｏｆ也ｅｉｍｐｏｒｔａｎｔｆａｃｔｏｒｓｗｈｉｃｈｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｈ