多杀菌素抗性西花蓟马转录组测序及nachrα5和α7亚基的克隆分析

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1、密级：论文编号：中囯农业科学院学位论文多杀菌素抗性西花蓟马转录组测序及nAChRa5和a7亚基的克隆分析DenovoSequencingoftheTranscriptomeofSpinosad-susceptibleand-resistantFrankliniellaoccidentalis(Pergande)andtheCloningofnAChRa5andalSubunits硕士研究生：刘秋嘉指导教师：吴青君研究员申请学位类别：农业推广硕士专业领域名称：植物保护培养单位：蔬菜花卉研究所中国农业科学院研究生院2015年6月Secrec

2、y:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationDenovoSequencingoftheTranscriptomeofSpinosad-susceptibleand-resistantFrankliniellaoccidentalis(Pergande)andtheCloningofnAChRα5andα7SubunitsM.S.Candidate：LiuQiuleiSupervisor：Prof.WuQingjunDegree：MasterofAgriculturalExte

3、nsionMajor：PlantProtectionChineseAcademyofAgriculturalSciencesJune2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：夕K年彡月3>曰关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科

4、学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：时间：年<月j曰中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目多杀菌素抗性西花蓟马转录组测序及nAChRa5和ct7亚基的克隆分析论文作者刘秋磊专业领域植物保护研究方向农业昆虫与害虫防治指导教师吴青君研究员培养单位（研究所、中心）蔬菜花卉研究所姓名职称单位专业签名评阅人答辩北京

5、市农林科学院张芝利研究员农业昆虫与害虫防治主植保环保所7斜席中国农业科学院植郑永权研究员农药学物保护研究所中国农业科学院植万方浩研究员农业昆虫与害虫防治物保护研究所答中国农业科学院植李显春研究员生物化学与分子生物学物保护研究所辩戈峰研究员中国科学院动物所农业昆虫与害虫防治委员会议记录（秘书）谢文论文答辩时间地点2015年5月30日8:30中国农业科学院蔬菜花卉研究所综合楼摘要西花蓟马Frankliniellaoccidentalis(Pergande)是一种世界性的园艺作物上的主要害虫，可为害蔬菜、花卉和果树等多种作物。目前对于西花蓟马

6、的防治包括生物防治、物理防治以及广泛使用的农药防治等多种方法，其中药剂防治最为普遍。但由于西花蓟马发育周期短、繁殖力强、具有单双倍体繁殖系统，以及杂食性的特点，西花蓟马可通过多种途径对杀虫剂产生抗药性，成为抗药性最为严重的害虫之一。国外已有西花蓟马对防治其最有效的药剂——多杀菌素产生了极高水平抗性的报道，国内西花蓟马对多杀菌素的敏感性也呈下降趋势。根据已有文献，不同多杀菌素抗性西花蓟马种群的抗性机理存在明显差异，研究本地区西花蓟马对多杀菌素的抗性机制对西花蓟马的抗性治理具有十分重要的意义。本文研究了西花蓟马在低温下的生长发育及繁殖状况，

7、对多杀菌素敏感和抗性西花蓟马的转录组进行了测序，并根据RNA-seq结果对西花蓟马烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）α5和α7亚基进行了克隆和分析。上述研究可进一步了解西花蓟马的生物学特性、阐明西花蓟马对多杀菌素的抗性机制，为西花蓟马的有效防治提供理论依据。常年用多杀菌素处理的豆角饲喂该杀虫剂的抗性种群，通过不断的汰选，抗性种群对多杀菌素的LC50＞3,000mg/L，抗性倍数稳定在10,000倍以上，达到了极高抗性水平。敏感种群不接触任何药剂，两种群隔离饲养，为后续研究奠定了试虫基础。通过对5℃和10℃环境下西花蓟马生长发育和繁殖等状况

8、的观察研究，发现西花蓟马具有较高的低温耐受性，在5℃下西花蓟马无法完成生命周期，卵无法正常孵化，1龄若虫可以发育到2龄，但2龄若虫不能继续发育至蛹；蛹能够发育至成虫但成虫不能产卵；10℃下西花蓟马能够完成生