堆肥过程中碳氮代谢相关基因表达及细菌多样性的研究

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1、专化单化巧古单化论义堆肥过程中碳氮代谢部分相关基因表达及细菌多样性的研究？－．’．．．．？．黄逸蠢巧爲Ｉ乂榮二０—五年Ｈ月分类号Ｘ７０５密级公开ＵＤＣ硕±学位论文堆肥过程中碳氮代谢相关基因表达及细菌多样性的研究黄逸蠢学科专业环境工程指导教师李群良副教授何曜光副研究员论文答辩日期２０１５年１月１０日学位授予日期２０１５年３月３０日答辩委员会主席韦万兴教巧广西大学学位论文原创性和使用授权再明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研充所取得的

2、研究成果。除己特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的研巧成果，也不包含本人或他人为获得广西大一学或其它单位的学位而使用过的材料。与我同工作的同事对本论文的研巧工作所做的贡献均己在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归目属广西大学，Ｐ：学校有。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权权保存并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可Ｗ采用影印、缩印或其它复制手

3、段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：□保密，在年解密后适用授权。包木保密。＂＂（请在Ｗ上相应方框内打Ｖ）论文作者签名曰期：＞／主２ｆｔ為句）？指导教师签名：：曰期＞分句參一爭：作者联系电话：电子邮箱堆肥过程中巧巧代谢巧分相关基因表达及细菌多样性的研究摘要利用微生物作用好氧发酵处理有机固体废弃物生产有机肥料是环境保一。护中废弃物处理与处置的种有效方式实验采用自行设计堆肥系统，采用两种不同强制通气方式（罐体内嵌式通气和整体式通气），Ｗ牛粪和甘薦叶为原料进行好氧堆赃，测定堆肥过程中堆体理化参数变化

4、，并结合分子－ｔ生物学方法巧光定量聚合酶链式反应（ＲｅａｌｉｍｅＰＣＲ）技术对碳氮代谢相－变性梯度凝胶电泳ＰＣＲ－ＤＧＧＥ）关基因表达进行分析和聚合酶链式反应（技术对细菌群落多样性进行研究。理化参数测定结果表明，罐体肉嵌式通°’Ｃ气与整体式通气方式堆肥均在第４天达到最高温度，分别为巧．０Ｃ和５３．４；有机质含量分别下降为４９．１０％和４６．２２％呈现出先上升后下；镑态氮含量均降最后趋于平稳的庭势ｌ〇９９．６７ｍ／ｋ；最终硝态氮含量分别达到ｇｇ和＂４３．９６ｍ／ｋ。ｇｇ采巧实时焚光定量ＰＣ艮技术对两种不同强制通气方式堆肥

5、过程中细菌－ｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ，包括细菌１６ＳｒＤＮＡ总量和碳氮代谢相关基因表达，ｐｇ，？ｎｘＡ公Ｊ基因进行了定量分析，并对比研究了发酵过程中理化参数及堆体中碳氮代谢相关基因表达。实验结果表明，在堆肥过程中，罐体内嵌式通气发醇堆体细菌总量大于整体式通气发酵；罐体内嵌式通气与整体式通气发酵－ｏｓ中ｌｕｃｉｄａｓｅ基因拷贝数分别在堆肥第７天与第４天达到最大值，该数Ｐｇ．０倍和６．２倍值分别是堆肥第１天的４，表明发生强烈生物降解作用，碳代Ｉ谢活动剧烈；ＡＯＢ在强制通风好氧发酵的高温期含量极少，直至腐熟期才＊大量积累，导

6、致大量钱态氮转化为氨气造成氮损失公／基因表；高温对ｎｘ／达有严重阻碍作用，在腐熟阶段罐体内嵌式通气方式发酵中Ｗ地／基因优先于整体式通气发酵表达并达到峰值。通过聚合酶链式反应－变性梯度凝胶电泳－ＤＧＧＥ）技术（ＰＣＲ对罐体内嵌式通气和整体式通气堆肥过程中细菌群落多样性进行研巧，ｙＪｌ细菌１６ＳｒＤＮＡ基因片段ＰＣＲ扩増产物为ＤＧＧＥ分析对象。实验结果表明，随着堆肥进行，细菌群落在各个时期不断演替，部分细菌直至发醇后期才出现，而部分细菌在整个堆肥过程始终存在，发生了较大的演替变化；罐体内嵌式通气堆肥的细菌多样性比整体式通气堆

7、肥更丰富。关键词－ＤＧＧＥ化ＳｒＤＮＡ：堆肥巧巧代谢巧光定量ＰＣＲＰＣＲｎ巧ＵＤＩ巧ＯＮＧＥＮＥＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＲＥＬＡＴＥ）ＴＯＣＡＲＢＯＮＡＮＤＮＩＴＲＯＧＥＮＭＥＴＡＢＯＬＩＳＭＡＮＤＭＩＣＲＯＢＩＡＬＤＩＶＥＲＳＴＹＤＵＲ…ＧＣＯＭＰＯＳＴ１ＮＧＰＲＯＣＥＳＳＡＢＳＴＲＡＣＴＷｉｔｈｔｈｅａｃｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓａｅｒｏｂｉｃｃｏｍｐｏｓｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｉｄｗａｓｔｅ化ｒｏｄｕｃｅｏｒａｎｉｃｆｅｒｔ

8、ｉｌｉｚｅｒｉｓａｎｅｆｅｃｔｉｖｅｗａｙｏｆｗａｓｔｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ