南京地区汉族人群a血型亚型的分子机制调查与分析

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1、乘兩大？參硕±学位论文南京地区巧族人群乂血型亚型的分子机制调查与分析专业名称；临庆检验诊断学硏究生姓名：陈妍导师姓名：陈宝安乂ｎａｌｓｉｓａｎｄｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｍｏｌｅｃｕｌａｒｙｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｎＡｓｕｂｒｏｕｓｉｎＮａｎｉｎｇｐｊｇＨａｎｏｕｌａｔｉｏｎｐｐＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄ化ＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒｔｈｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＢＹＣＨＥＮＹａｎＳｕｐｅ

2、ｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆ－．Ｐｒｏｆ．ＣＨＥＮＢａｏａｎＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｏｆＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＮｏｖｅｍｂｅｒ２０１４东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研巧工作及取得的研巧成果．，。尽我所知除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。聲軒

3、＇八：：研巧生签名日期东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档。，可Ｗ采用影印、缩印或其他复制手段保存论文本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阐－可Ｗ公布（包括Ｗ电子信息形式刊登）论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布（包括Ｗ电子信息形式刊登）授权东南大学研充生院办理。．Ｉ种导师签名：：巧期研究生签名：目录中文摘要ＩＡＨｂｓｔｒａｃｔＩ１引言１２

4、实验材料６３试強方法９４硏究郎１２５Ｗｉｆｅ１９ｔ６ｇｉｆｅ２６参考文献２８综述３２＃考＊巧３９附录１个人简介４２致谢４３中文摘丟中文摘要南京地区巧族人群乂血型亚型的分子化制调查与分析研巧目的一－血型是人类血液的主要特征之，表达了产生抗原抗体系统的遗传特征。与临床相关的主要是ＡＢＯ、Ｒｈ、Ｋｅｌｌ、Ｋｉｄｄ、ＭＮＳｓ等十余个血型系统，其中ＡＢＯ、Ｒｈ血型系统最为重要。ＡＢＯ血型与部分疾病的发生具有关联性，不仅与输血有密切的关系，也与器官移植、溶血性

5、疾病、法医鉴定和人类学有关。ＡＢＯ血型系统有Ａ、Ｂ、Ｈ抗原，出现的表型有Ａ、Ｂ、０、ＡＢ血型，该系统最常见亚型出现在含Ａ抗原的人群中，Ｂ亚型不多见。Ａ型个体大多数属于型，少数属于Ａ，ｚ型及更少频率的Ａ３、Ａｘ及Ａｍ等亚型。在这些稀少的Ａ亚型中不仅具有很强的抗Ｂ抗体，还会产生抗原性不同的抗Ａ抗体，这就给临床血型的鉴定和配血带来困难，从而影响临床输血的安全。目前国内对Ａ亚型的概率分布报道的不多，且南京地区未见关于该方面的报道。本研巧拟通过较大样本量对南京地区汉族人群Ａ血型亚型的基因分析，获取本地区人群Ａ血型基因多态性

6、的分布资料，为中国汉族人群Ａ血型亚型多样性提供数据，丰富人类血型学内容，为进化、迁徙的研究提供依据；为血清学检测存在疑问的标本提供其基因分子的佐证，；根据亚型调查的结果考虑建立ＡＢＯ亚型资料库的可行性，确保临床输血安全。实验方法２０１３０－２０随机选择年１月１４年６月来江苏省血液中符合《献血者健康检查要求》的无偿献血者ＡＢＯ血型定型为Ａ型和ＡＢ型的ＥＤＴＡ，．Ｋ２抗凝全血标本其中Ａ型标本７８巧人份、ＡＢ型标本２１７３人份，共计１００１２人份。采用微板法’进行Ａ亚型的血清学筛查－。收集弱凝集和不凝集标本的白细胞膜层

7、，置２０Ｃ冰箱低温保存。采用原平鞋（天津）生物技术有限公司商用试剂盒按照说明书提取样本基因组ＤＮＡ－，对ＡＢＯ血型基因的第６７外显子进行测序，采用ＳｅｑＳｃａｐｅＩ东南大学硕±学检论文Ｖ２．５软件进行数据分析，将Ａ１０１序列作为标准序列，测定序列与标准序列比对－后，获取ＡＢＯ基因６７外显子多态性，将多态性情况与ＡＢＯ血型突变数据库序列比较，从而确定ＡＢＯ血型序列及基因型。结果、０．３１％，＾ＡＡ１南京地区Ａ血型亚型在Ａ型人群中的比例约为其基因＾２０１，其基因型＜亚型为主，而在ＡＢ型人群中的比例约为

8、１．８０％ｌｉｌＡ２０５亚型为主；２、在２１阴名ＡＢ型人群中检出１例ＣｉｓＡＢＯｅ和１例Ｂ（Ａ）０２，各占ＡＢ型的化０４６％（１／２１６