人工合成甘蓝型油菜的创建及其表观遗传分析

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1、'—’;'.>片;e,甚品:苗v:為去苗巧/緣墳:’‘終一起於'与啤乂■.。广.'??一?-一户/分華号一'Mi20449_一V;学号举?:!,,一r-'、心一t?>f'.r:密.-;韦>级?;^; ̄--?、':L击-■'一々…-'.n方户-少-J感叫大聲"'豕-^YANGZHOUUNIVERSITY>M11户^户、硕壬学化冷文,淡^;-—抛、-一為V争(学术型)若考>^、、?^八。-.;、.'.言^-人工合成甘蓝型油菜的

2、创建及其表观遗传分析:];*?*?一4*'?■气、.:、-r^r古;t指导教师姓名':王幼平教授,扬州大学,江苏扬州,225009申请学位级别:硕壬学科专业名称:发育生物学.m,论文提交日期;2015年06月01日论文答辩日期:2015年05月23日i,学位授予单位:扬州大学学位授予日期;2015年06月30日秦答辩委员会主席:马鸿翔.■■*?片?,—'.'’.;.不.?;卢,託,少j續r/、豕完古、/.:繼鱗難京方>fy—化户旅余冷家砖i〇f;;分V冷參京

3、錢.—^子.'.萬.,於終私巧咎々矜乐獲一-、.''女.f評摩發来;.葦术式人王合成甘蓝型油菜的创建及其表观遗传分析i目录摘要VAbstractVII符号说明IX一第t综述11.1植物多倍体化研究11丄11植物多倍体1丄2多倍体的产生及鉴定11丄2.1多倍体产生途径11丄2.2多倍体的鉴忠21丄3植物多倍体的恃征及农业应用2U.3.1植物多倍体的特征21丄3.2植物多倍体的应用21.2异源多倍体甘蓝型油菜的人工合成及研究进展31.2.1禹式H角模型及甘

4、蓝型油菜起源31.2.2甘蓝型油菜的重要经济价值及其育种现状41.2.3人工合成甘蓝型油菜的研究现状51.2.3.1人工合成甘蓝型油菜的获得方法51.2.3.2人工合成甘蓝型油菜的研究现状631.植物异源多倍体的研究价值71.3.1植物异源多倍化过程中的遗传变异71.3.2植物异源多倍化过程中的表观遗传变异71.3.2.1表观遗传学与DNA甲基化71.3.2.2异源多倍化过程中的表观遗传学研究81.3.3人工合成甘蓝型油菜的遗传与表观遗传研究进展101.3.3.1人工合成甘蓝型油菜的遗

5、传变化10133.211..人工合成甘蓝型油菜的表观遗传变化1.4研巧目的12第二章材料与方法132.1植物材料3111扬州大学硕击学位论文2.2实验所用试剂及培养基132.2.1实验所用试剂配方132.2.2胚胎挽救所用培养基142.3实验使用的仪器与设备142.4人工合成甘蓝型油菜及其鉴定152.4.1人工杂交与胚胎挽救152.4.2人工合成甘蓝型油菜的分子鉴定152.4.2.1植物总DNA提取152.4.2.2人工合成甘蓝型油菜的SSR鉴定化2.4.3人

6、工合成甘藍型油菜的细胞学鉴定172.4.3.1染色体数目的统计172A3.2花粉活性观察172.4.4人工合成甘蓝型油菜农艺性状及产量性状的统计172.5全基因组DNA甲基化水平测定172.5.1植物DNA提取与预处理172.5.2HPLC法分析植物全基因组DNA甲基化水平182.6人工合成的甘蓝型油菜MSAP分析182.6.1植物全基因组DNA提取182.6.2DNA接头和MSAP引物182.6.3DNA切19酶2.6.4连接接头202.6.5预扩増202.6.6

7、选择性扩增212.6.7扩増产物的检测212.6.7.1聚丙赌醜胺凝胶制备212.6J.2电泳222.6J.3银染程序222.6J.4条带统计分析222.7甲基化差屏条带回收克隆及定量分析222.7.1甲基化差异条带的回收和克隆22人工合成甘蓝型巧菜的创建义其表观遗传分析m2.7丄1聚丙徐酷胺凝胶差异条带回收222.7丄2琼脂糖凝胶回收再次扩增产物232.7丄3连接与转化232.7丄4茜落PCR与测序24224.7.2MSAP差异片段的表达分析2.7.2.1植物

8、RNA的提取242.7.2.2总RNA中DNA的消化2527.23cDNA25

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