产甜甙v罗汉果内生真菌的研究

《产甜甙v罗汉果内生真菌的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、￣￣单位代码１０６０２Ｉ学号２０１２０１巧１４分类号Ｘ１７２级公开方心／？作働吁據ＧＵＡＮＧＸＩＮＯ口ＭＡＬＵＮＩＶ巨口ＳＩＴＹ硕去学化冷文产甜武Ｖ罗汉果內生真菌的研究ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＭｏｇｒｏｓｉｄｅＶｐｒｏｄｕｃｉｎｇＥｎｄｏｈｔｉｃＦｕｎｕｓｐｙｇｆｒｏｍＳｉｒａｉｔｉａｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉｇ学院：环境与资源学院专业：环境王程研究方向：资源开发与利用年级；２０１２级研究生：蒋智指导教师；谣斌完成日期：２０１５年６月产甜成Ｖ罗汉果内生真菌的研究

2、专业名称：环境王程申请人：蒋智指导教师；谣域论文答辩姜员会Ｉ主席＇：节帝委员：秦考广西师范大学硕±研究生论文产甜祇Ｖ罗汉果内生真菌的研究研究生：蒋智导师！堪斌专业！环境工程研究方向；资源开发与利用年级：２０口级中文摘要罗汉果（况ｒａ伽［ｍｓｖｅｎｏ已被确认。罗汉果甜ｇ哨属于葫芦科植物，其食品和药品价值巧是一种从罗奴果果实里提取的低热量、高甜度、健康的天然甜味剂，而甜巧Ｖ又是其一０－中的主要成分．５１．４％，在罗紋果干果中占比为，是种葫芦烧Ｈ荫糖昔类化合物。同时人们希望找到合适的内生真菌能

3、够产出有用的代谢产物，从而将内生真茜可发展成一种重要的生物资源。近年来的研究表明，内生真菌与宿主协同进化，可Ｗ产生与宿主相同或相似的代谢产物，对相应的内生真菌及其代谢产物的研究已经成为寻找重要代谢－产物的种新途经，。因此如果从罗没果中分离出的内生真菌能产生与宿主相同的次生一代谢物如甜戒Ｖ，这将成为种获取甜式Ｖ的新途径。本文通过对采自广西永福县罗汉果植株的根、茎、叶和果实中的内生真菌进行分离，筛选出可产生甜巧Ｖ的真菌、Ｗ及优、用形态学和分子生物学方法对菌株种属进行鉴定化菌株产甜巧Ｖ的发酵条件，为研究提供了重要理论依据。现将取得

4、的主要研究成果归纳如下：１、内生真菌的分离和培养。通过ＰＤＡ固体培养基分离培养，从罗汉果组织内分离出１５种内生真菌，４株分离自叶，４株分离自茎，２株分离自根，５株分离自果实。２、产甜武Ｖ内生真菌的筛选。使用高效液相色谱分析发酵液中甜巧Ｖ的存在。通过比较标准品和样品的保留时间来判断甜巧Ｖ的有无－ＭＳ。产武菌株也通过ＨＰＬＣ和ＬＣ－（－Ｆ５和ＬＨＧ－Ｌ４的内生真菌技术被筛选出来编号为ＬＨＧ，其中ＬＨＧＦ５甜巧Ｖ产量为ｍＬ－３乂，ＬＨＧ６７５／ｍＬ）。１４惦／Ｌ４甜祇Ｖ产量为２．帖３、产甜武Ｖ内生真菌的鉴定。采用经典

5、的形态学鉴定和电镜扫描的方式对编号为－ＬＨＧ－Ｆ５和ＬＨＧＬ４的真菌的菌丝及抱子显微形态进行观察，随后对这两株产甜巧内生－ｒＤＮＡ－真菌的ＩＴＳ序列进行系统发育分析。通过ＩＴＳ序列分析技术将ＬＨＧＦ５菌株鉴定－为当归间座壳菌（Ｚ）崎ｗＡｅａｎｇｅ／心ｅ），将ＬＨＧＬ４菌株鉴定为腐皮鎌刀菌（ＦｗａＷｗｗｓｏｌａｎＯ。Ｉ广西师范大学硕±研究生论文４、产甜巧Ｖ真菌的发酵条件优化。采用单因素和正交试验方法对甜巧Ｖ产量较高ＬＨＧ－Ｆ５－的菌株生长的营养因素和环境因素进行优化。确定了ＬＨＧＦ５产甜祈Ｖ的最优－发酵条件，Ｌ

6、ＨＧＦ５的最优发酵方法是在ｌＯ／Ｌ马铃著液体培养基的基础上，加上ｇ葡萄糖为补充碳源，２．５ｇ／Ｌ的硫酸Ｓ为补充氮源，培养基装液量为２５〇１１１１＾呈角瓶装液１５０ｍＬ，发酵时间为’５天，发酵温度为２８Ｃ，初始Ｈ值为７。检测产物中甜祇Ｖ的含量达到ｐ７．１５６惦／ｍＬ，是进行发酵条件优化前甜武Ｖ产量的１．８７倍。关键词：罗汉果；内生真菌；甜式Ｖ；菌种鉴定；发酵条件优化ＩＩ广西师范大学硕±硏究生论文ＳｔｕｄｉｅｓｏｎＭｏｇｒｏｓｉｄｅＶｐｒｏｄｕｃｉｎＥｎｄｏｈｔｉｃＦｕｎｕｓｇｐｙｇｆｒｏｍＳｉｒａｉｔｉａ

7、ｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉｇＣａｎｄｉｃａｔｅ：ＪｉａｎｇＺｈｉＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＣｈｅｎＢｉｎＳｐｅｃｉａｌｉｔｙ：ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＧｒａｄｅ：２０１２民ｅｓｅａｒｃｈｄｉｒｅｃｔｉｏｎ：民ｅｓｏｕｒｃｅｓＤｅｖｅｌｏｍｅｎｔｎｄＵｉｌｉｚａｉｏｎｐａｔｔＡｂｓｔｒａｃｔＳｉｒａｉｔｉａｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉｉ，ｂｅｌｏｎｇｉｎｇｔｏｔｈｅｆａｍｉｌｙｏｆＣｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ．Ｉｔｓｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｍｅｄｉｃｉｎａｌａｎｄｅｄｅｖａｕｓ

8、ｅｅｎｉｒｍｅｉｂｌｌｅｈａｂｃｏｎｆｄ．Ｍｏｇｒｏｓｉｄｅｓａｒｏｕｏｆｔｒｉｔｅｒ