东乡野生稻耐冷qlop2、qpsr2-1的克隆及功能研究

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2、研究，＾－：，４Ｊ．Ｖ、—＾ｍ，、＇＇＇．建芒勺＾；，姜、赛去．指导教师姓名：陈建民教授，扬州大学，江苏扬州２２５００９＿＿，＿＿＿；ｉ＼古申请学位级别：硕去学科专业名称：细胞生物学二之々：？…争论文提交口期、：２０１５年６月１日论文答辩日期：２０１５年５月２３日‘学位授予单位＇巧：扬州大学学位授予日期：２０１５年６月３０日答般员会主席；热研究贾—＂＂＂、－？．ｉ和：辦气．‘２０１５扩辜／續＞年６月．於ｆ成、勺＼：；－：斧今、麥吿，；．我遍＾的篆囊游惹餐麵目录摘要ｉＡＢＳＴＲＡＣＴ

3、ｉｉ符号说明ｉｖ一章文献综述第１１引言１２水稻耐冷研究背景及东乡野生稻的发现１２．１水稻耐冷研究背景１２．２东乡巧生稻的发现及相关研究２３ＱＴＬ定位研究２３．１ＱＴＬ定位及克隆基本原理２３．２耐冷ＱＴＬ定位４４ＤＲＥＢ转录因子家族４４１．转录因子结构５４．２转录因子家族分类６４．３ＡＰ２／ＥＲＥＢＰ家族的结拘特点７４．４ＤＲＥＢ类转录因子在植物抗逆方面的作用８究的目的和意义９第二章耐冷ＱＴＬ的基因克隆及表达分析１１１１１２材料与方法１１２．１＃料１１

4、２．２方法１２３结果与分析１５３．１东乡野生稻耐冷ＱＴＬ的克隆１５３．２目的基因的序列及结构分析１７３．３实时《光定量ＰＣＲ表达谱１８４讨论１８第Ｈ章农杆菌介导目的基因转化水稻２０１前言２０２实验材料２０２１２０．植物材料２．２质粒载体２０２．３菌株２１２．４培养基２１３实验方法２２双Ｔ－３．１含目的基因的农杆菌ＤＮＡ区载体构建２２３．２载体质粒ＤＮＡ的提取２３３．３农杆菌感受态细胞的制备２３３．４载体质粒转化农杆菌２３３．５农杆菌介导法转化水稻２５３．６转基因

5、Ｔｏ代植株的ＰＣＲ检测２５４结果与分析２５－４２．１转基因双ＴＤＮＡ区载体的拘建５４２６．２再生植株的化得４．３阳性植株的获得２７５ｉｆｉｔ２９第四章转基因Ｔｉ代的生理功能分析３０１前言３０２材料与方Ａ３０２．１材料３０２．２转基因Ｔ１代植株生理指标测定３０２．３转基因Ｔ１代植株存活率测定３１２．４叶绿素含量的测定３１２３１．５叶绿素羡光的测定２．６相对含水量（ＲＷＣ的测定３２）２．７脯氣酸Ｐｒｏ的测定３２（）含量２８巧二酪ＭＤＡ３２．含量的测定（）３结果与分析３３３

6、．１转基因Ｔ代植株耐冷表型和存活率巧ｉ３．２叶绿素含量的测定３４３．３叶绿素巧光的测定３４３．４相对含水量的测定３５３．５Ｐｒｏ含量的测定３５３．６ＭＤＡ含量的测定３５４讨论３６３８参考文献致谢４３攻读硕±学位期间发表的学术论文４４扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书４５－黄维男：东乡野生稻耐冷如０巧ｉ、抑况？２／的克隆及功能研究东乡野生稻耐冷如０户２、抑併口的克隆及功能研究研究生；黄维男导师；陈建民教授（扬州大学，江苏扬州，２２５００９）摘要水稻是世界Ｈ大粮食作物之一，

7、仅次于玉米和小麦，由于其基因组相对较小，遗传转化体系成熟且与其他禾本科作物存在共线性，使其成为植物分子遗传学及基因组学研究的模式植物。近年来世界气候变化异常、环境越发恶劣，冷害频发，严重制约着水稻的种植范围，并引起大规模减产，时刻危及我国的粮食安全生产。因此，开展水稻耐冷研究，了解其耐冷机制Ｗ及培育耐冷新品种显得尤为重要。本研究通过叶片渗透势和幼苗存活率两个耐冷指标，在精细定位东乡野生稻苗期耐冷＞一Ｌ饼汾口－＾至３９主效ＱＴ（如２和抑．３化范围内的基础上，进步分离克