《不同磷浓度对螺旋藻砷吸附、吸收及转化的影响研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
一ｆ．＇‘一；＾．心＇‘Ｃ；、；？一：．＇＂＇＇．．’，？分类号＿ｍｉ＿？学号為音泉違义參硕±学位论文不同碟巧度对螺旋藻神吸附、吸收及转化的影响研究王淑ＭＶｒ；，追乂—．－－，．：ｒ个气．．，．－Ａ－一．声＾一－—－＇’’户一ｔ＇’－．‘１Ｔ巧一？’，‘－，—…；；。；：？－．＊ＶＮ度Ｖ；指导教师葛縷教授＇ＩＩ．，ｖ今八？／专业名称环境科学研究方向环境污染控制与生物修复ｉ’尸—Ｖ／答辩日期二〇五年五月：．Ｖ，■■占争．．■．Ｖ－．＇’．－－ｒ、：－侣－；－＾：一＇ｒ０－－一？？？７Ｗ－－■．．；．＂一…．■；人―、．■’ｆ．．Ｖ ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＶＡＭＯＵＳＰＨＯＳＰＨＡＴＥＣＯＮＣＥＮＴＲＡＴＩＯＮＳＯＮＴＨＥＡＲＳＥＮＩＣＡＤＳＯＲＰＴＩＯＮＵＰＴＡＫＥＡＮＤ，ＴＲＡＮＳＦＯＲＭＡＴＩＯＮＩＮＳＰＩＲＵＬＭＡＰＬＡＴＥＮＳＩＳｂｙＷａｎＳｈｕｇＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆ的ｓｏｒＧｅＹｉｎｇＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｑＦｏｒＴｈｅｍａｓｔｅｒｄｅｇｒｅｅＣｏｍｌｅｔｅｄｉｎＭａ２０１５ｐｙ，ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＭａ２０１５ｙ， 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研巧工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名：主識Ａ广年月么日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被査阅和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进斤检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不巧巧向＾＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名；年＾月Ｘ日＇导师（需亲笔）签名：展方＂年／月２日左 不励縱媳对叛緻就峨附、吸收及转化的影嚇伉本研究得到＾＾下项目资助国家自然科学基金（４１３７１４６８；３１４００４５０） 目录目录巧￥————————＊—————————————■—Ｔｌｉｒ—■■——ＴＴＴ——一ＴＴＴ干ｔＴ干一巧章文献综巧１１．１螺旋巧的简介及其营养成分２１．１．１该旋藻的简介２１丄２爆旋藻的营养成分及功能３１．２淡水中的神与其在微藻中的代谢４１玉１水环境中Ａｓ的污染现状４１．２。Ａｓ与人类健康的关系５１．２．３Ａｓ的形态及毒性５１．２．４微藻Ａｓ的代谢机制６１Ａ．３Ｐ与ｓ的竞争作用８１．３．１微藻的Ｐ营养巧求８１．．３２Ｐ对微藻Ａｓ积累的影响９１ｓ．４螺旋藻Ａ污染研巧进展１０１．５拟解决的问题１１１．６研巧内容１１１．７研巧目的和意义１１１．７．１研巧目的１１１．７三研巧意义１２１．８技术路线１２—．．．Ｗ第二章不同Ｆ浓度对ｇ巧藻生长巧及吸附、吸收和转化神巧盐的影咱—．口２．１材輯骑法１４２＾＊１？１１３＾验Ｗ及培＾将？糸１４２丄２试验设计１５２．１．３测定项巨与方法１６２丄４数据处理１８２．２结果与分析１８ 不同巧浓度对度巧巧巧吸巧、吸化及转化的巧巧研巧２玉１不同Ｐ浓度对巧旋藻生长的影响１８２三对！ｌ．２Ａｓ（Ｖ）ｉ旋藻生物量的影响１９２．２．３摄旋藻对Ａｓ的宮集１９２．２．４Ｐ营养条件对语旋藻胞内Ａｓ形态的影巧２２；２．３１＾论２２２．４小２４Ｓ第兰章不同Ｐ浓度对？巧藻吸附、吸收和转化亚巧８＾的巧咱巧３．１材辑与方法２８３．１．１试验材料及培养条件２８３．１立试验设计２８３．１．３测定项目与方法巧３丄４数据分析２９３．２结果与分析２９３．１ｆｌ对爆旋藻生物＊的影响．２不同浓度ＡｓＣ）２９３．ｓ．２２爆旋藻对ＡＣｎｉ）的巧化３０３．２．３不同浓度Ａｓｆｌ对螺旋藻宮集Ａｓ的巧巧３１Ｃ）３．２．４不同浓度Ｐ和Ａｓ（ｍ）处理对摄旋藻宫集Ａｓ的影响巧３．２．５不同浓度Ｐ和Ａｓ（ｒａ对巧旋藻胞内Ａｓ形态的影巧３５）３．３讨论３６３．４小Ｓ３８第四章全文总结与展望巧４．１全文总结．３９４丄１不同浓度Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｒａ）对爆旋藻吸附、吸收和转化Ａｓ的巧响．．．．．．．．巧４丄２不同Ｐ浓度对塚旋藻积累和代谢Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｉｎ）的影响３９４．２创新之Ａ４０４．３研巧展望４０４１巧谢 图表目录图表目录－表２１Ｚａｉｒｏｕｋ培养基组分１５－２微量溶液Ａ表２ｓ和战的成分与用量１５－３不同Ｐ浓度下巧旋藻生物量表２、藻胆蛋白、叶绿素含里１９表２＾螺旋藻吸附和吸收的神含量及比例２０表３－－１不同ＰＡｓ（ｆｌ）处理组合２９３－２处理下巧旋巧Ａｓ形态表胞内的３３表３－３不同Ａｓｎｉ和Ｐ处理对爆旋藻吸附ｓ含量的双因素方差（）、吸收和宮集Ａ備３５图レｌ缺Ｐ和富Ｐ条件下徹藻细胞对Ａｓ的吸收和转化过程（Ｈｅｌｌｗｅｇｅｒ等，２００３）１０－图２１據旋藻光学显微镜Ａ）和（Ｂ）１４（扫描电镜图片－图２２不同巧浓度处理对爆旋藻神宫集的影响２１－图２３不同稱处理对爆旋藻神吸附、吸收的影响心２１￣４不同巧处理对爆旋藻胞内神形态的影响图２１２２－图３１不同浓度Ａｓｍ处理下螺旋藻的生物量３０（）－１图３－２３００ＬｒａＡｓ处理７ｄ内培养基中ＡｓＶ的比例３０惦（）（）－３培养液中氧化的ＡｓＶ图３比例３１（）￣４不同浓Ａｓｍ图３度（处理下该旋巧宮集的总神含呈３２）图３－５不ｓｒａ处理下摄旋藻吸收巧吸附的神含量同浓度Ａ（）３２＞图３６不同处理下螺旋藻富集的总巧含量３４－图３７不同处理下操旋藻吸收（Ａ）和吸附（Ｂ）的神含量３４－－图３８不同浓度ＰＡｓｉｎ处理组合下巧旋藻胞内各Ａｓ形态的含量３５（）化 摘要不同磯浓度对螺旋藻神吸附、吸收及转化的影响硏究摘要＂＂螺旋藻被誉为２１世纪最理想的食品。随着保健品的生产和开发螺旋藻的安全，品质越来越受到人们的关注。近年来，我国部分品牌的螺旋藻保健品中发生了坤（Ａｓ）含量超标事件，开展螺旋藻钟污染控制的研究已非常祭迫。Ｗ往这方面的研究大多集中在藻粉中总Ａｓ含量的检測和巧旋藻Ａｓ污染源的分析。有关蹲化）浓度如何影响螺旋藻吸附、效收和转化坤酸盐Ａｓ（Ｖ）、亚坤酸盐Ａｓ（ｍ）的研究仍鲜有报道。本试验ｋ乂化顶螺旋藻为研究对象首先用不同浓度ＡｓＶ、Ａｓｍ处理螺旋藻７ｄ研究藻，（）（），体对Ａｓ的吸附和吸收特性；然后降低培养液中Ｐ浓度，研究不同Ｐ浓度对螺旋藻生长的影响；在藻体生长不受影响的情况下，研究不同Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ＩＩＩ）吸附、吸收及胞内Ａｓ形态的影响。主要研究结果如下：１．不同Ｐ浓度对巧旋藻生衣的影响Ｐ浓２００Ｐ￣ＰＰ采用实验室内培养，设置系列度（ｌ／ｉ正，正为正常Ｐ供应时培养基－ｉ８８．中Ｐ的浓度．９ｍｇＬ）处理研究不同Ｐ浓度对螺旋藻生物量、藻胆蛋白、叶绿素，１０２５ｌ含量的影响。结果表明与Ｐｉ相比１／、１／、ＡＯＰｉ对螺旋藻的生长没有影响，，；当Ｐ浓度降低时１／１００Ｐｉｔ时，藻体藻胆蛋白显著降低，叶绿素含量增加：当Ｐ继续降低至１／２００Ｐ正时，螺旋藻的生物量、藻胆蛋白、叶绿素含量降低，生长受到显著影响。２．不同浓度Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｉｎ）对巧旋藻生衣、Ａｓ富集的巧响—１分别用不同浓度ＡｓＶ（５０、１００、１５０、２００、２５０、３００Ｌ）、Ａｎｉ（５０、（）邮＜）－Ｉ１００、２００、３００帖Ｌ）处理螺旋藻，比较不同Ａｓ处理对巧旋藻生长和Ａｓ哎附、吸收特性的影响。研究结果表明，与无Ａｓ处理的对照组相比，不同浓度Ａｓ（Ｖ）对螺旋藻的生物量几乎无影响，Ａｓ（ｎｉ）处理的藻体生物量有增加的趋势，但变化不显著。螺旋藻Ａｓ吸附量、吸收量和总钟含量均随着培养液中Ａｓ处理浓度的升高显著增加。在相同Ａｓ处理浓度下，Ａｓ（ｍ）处理的藻体Ａｓ巧收量和总坤含量均比Ａｓ（Ｖ）处理的藻体－Ｉ处理的巧旋藻几乎不吸收Ａ高，而Ａｓ硬附量相差不大。５０、１００鸭ＬＡｓ（Ｖ）ｓ，Ａｓ（ｍ）－ｉｓ，处理的藻体Ａ吸收量分别为０．２４２、０．３００ｍｋ。因此在相同Ａｓ浓度处理时ｇｇ，，－浓度达到Ｉ螺旋藻对Ａｓｉｎ的富集能力更强。此外，当培养液中ＡｓＶ１５０时（）（）帖Ｌ，－ｉ－１‘ｓ．ｓ藻体富集的Ａ．００６ｍｋ了我国保健品中Ａ的限量值ｌ．Ｏｍｋ含量为１ｇｇ，超过ｇｇ。－－－１ｉｉｉ．．Ａ．ｓｉｎ处理浓度为２００Ｌ、３００１／体总坤含量为１．４７１ｍｋ、２２８５ｍｋ．（）帖惦，藻ｇｇｇｇ，Ｉ 不同巧浓度巧？巧藻巧吸附、吸收及转化的形咱研巧严重超过标々限＊。但大部分的Ａｓ被吸附在细胞表面，因此可Ｗ通过ＰＢＳ洗脱明显处理时巧旋藻胞内只有Ａ—降低藻体的总坤含壬？此外ＡｓＶｓＶ，（）（）种Ａｓ形态，巧Ａｓ（ｎｉ）处理的藻体Ｊ吃内同时奋在Ａｓ（ｍ）和Ａｓ（Ｖ），但Ｗ后者为主要形态。３．不同Ｐ浓度对螺袭藻吸財、吸化和转化Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｉｎ）巧影々１设里在不影嘴巧旋藻正常生长的Ｐ浓度５０Ｐ￣Ｐ分别用ＡＶ００（１／ａ±）ｓ（（３１／）、，）惦Ａｍ１ｓ（（２００、３００１／）处理巧旋藻，研究比较不同Ｐ浓度对巧旋藻ＡｓＶ、Ａｓｒａ）牌（）（）－ｉ吸附３００．ＬＡＶ、吸收和化内Ａｓ形态的差异。研究结果表明，王常Ｐ条件下ｓ、，ｐｇ（）ｆｌ处理的藻体吸收Ａ’ｉＡｓ（）ｓ含壬分别为０．２的、０．８０２ｍｇｋｇ；当Ｐ浓度为１／２５Ｐ正时，－ｉ藻体Ａｓ吸化量分别显著增加至１．３６９、２．１８１ｍｇｋｇ；Ｐ降低至１／５０Ｐ正藻体吸收的－１Ａ含量绝续靖加至．ｓ１．４５７、２．６７２ｍｋ表明降低培养液中Ｐ的浓度会促进藻体对ｇｇ，Ａｓ的吸收，增加了巧旋藻Ａｓ污染超标的风险。此外，用Ａｓ（Ｖ）处理巧旋藻后，培养液中Ｐ浓度的降低还会促进巧旋莱胞内Ａｓ的还原、甲基化和外排过程。当用Ａｓ〇ｎ）处理时，巧旋藻对Ａｓ（ｍ）具有较强的氧化作用，降低培养液Ｐ浓度也促进了上述过程１的发生。在３００阳Ｉ／Ａｓ（Ｖ）处理下，仅当Ｐ浓度降低至１／５０Ｐ正时，巧旋藻胞内产生－二甲基ｉｍ对（ＤＭＡ）？而当用３００ｉＬＡｓ（处理时Ｐ浓度２５Ｐ旋藻ｊｇ），降低至１／正，巧化内开始产生ＤＭＡ，且ＤＭＡ的含壬随Ｐ浓度的降低（１／５０Ｐａ）而增加，但是，Ａｓ（Ｖ）处理的巧旋藻甲基Ａｓ比例较大（巧．３５％），而处理的藻细化内甲基Ａｓ仅占５．５８％。由此可Ｗ说明当培养液中Ｐ浓度降低时Ａｓｍ处理下藻体胞内更容是产，，（）生甲基对，但Ａｓ（Ｖ）处理下藻体甲基化能力更强。关键词：巧旋藻；鸿酸盐；种酸盐；亚钟酸盐；吸批；吸化；转化ｎ ＡＢＳＴＲＡＣＴＥＦＦＥＣＴＳＯＦＶＡＲＩＯＵＳＰＨＯＳＰＨＡＴＥＣＯＮＣＥＮＴＲＡＴＩＯＮＳＯＮＴＨＥＡＲＳＥＮＩＣ乂ＢＳＯＲＰＴＩＱＮ，ＵＰＴＡＫＥＡＮＤＴＲＡＮＳＦＯＲＭＡＴＩＯＮＩＮＳＰＩＲＵＬＩＮＡＰＬＡＴＥＮＳＩＳＡＢＳＴＲＡＣＴ＂，，如ａｉｓｋｎｏｗｎａｓｔｈｅｍｏｓｔｉｄｅａｌｆｏｏｄｉｎｔｈｅ２１ｓｔｃｅ凸ｔｕｒｂｅｃａｕｓｅｏｆｉｔｓｈｉｈｙｇ打ｕｔｒｉｅｎｔｃｏｎｔｅｎｔｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒｉｔｓｓａ佐ｔｙｈａｓｒｅｃｅｉｖｅｄｍｏｒｅａｔｔｅｎｔｉｏ打ｗｉｔｈｔｈｅｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆｐｈｅａｌｔｈｐｒｏｄｕｃｔｓｍａｄｅＳｐｉｒｕｌｉｎａ，Ｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓ，ａｒｓｅｎｉｃ（Ａｓ）ｃｏｎｔｅｎｔｉｎｓｏｍｅＳｐｉｒｕｌｉｎａｈｅａｌｔｈｒｏｄｕｃｔｓｅｘｃｅｅｄｅｄｆｏｏｄｑｕａｌｉｔｙｓｔａｎｄａｒｄｓ．Ｐｒｅｖｉｏｕｓｒｅｓｅａｒｃｈｏｎ乂ｓｐｏｌｌｕｔｉｏｎｉｎｐ？ＡＺｒｗ／内幻ｈａｓｂｅｅｎｍｏｓｔｌｆｏｃｕｓｅｄｏ打化ｅｄｅｌｅｔｉｏｎｏｆｔｏｔａｌｓｃｏｎｔｅｎｔｉｎａｌａｅｏｗｄｅｒａｓ坏ｚｙｇｐ，ｗｅｌｌａｓｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅ乂ｓｏｌｌｕｔｉｏｎｓｏｕｒｃｅｓ拓ｒｔｈｉｓａｌｇａｅ．Ｈｏｗｅｖｅｒｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｐ，ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（Ｐ）ＣＯ打ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎ站ｓｅｎａｔｅ（Ａｓ（Ｖ）），扣ｓｅｎｉｔｅ（Ａｓ（ｉｎ））ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ＾ａｂｓｏ巧ｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｉｎＳｗｒｗ／ｍａａｒｅｓｔｉｌｌｒａｒｅｌｙｒｅｏｒｔｅｄ．Ｐｍａｉｎｆｌｕｅｎｃｅｔｈｅｕｔａｋｅａｎｄ／ｐｙｐｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｏ凸ｏｆＡｓｔｈｕｓｓｏｓｓｂｌｅｔｏｒｅｄｕｃｅｔｈｅａｃｃｕｍｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｏｘｃｅｅｍｅｎｉｉｔｉｉｌｉｓｔｉｌｔ，ｐｂｙ皿ａｎｉｕｌａｔｉｎ呂ＰＣＯ打ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅ．Ｔｏｔ：ｅｓｔｔｈｉｓｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ，ｗｅｆｉｒｓｔｓｄ：ｕｐｐｄｉｆｅｒｅｎｔＡｓＶｏｒＡｓｉｎ仕ｅａｔｍｅ凸ｔｓｆｏｒ７ｄａｓｔｏａｎａｌｚｅｔｈｅＡｓａｄｓｏｒｔｉｏｎａｎｄａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ（）（）ｙｙｐ？ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓ垃ＯＳｏｆｉＳ７／ｒｗ／ｚ乃。？／幻姑／ｗｂ．ＴｈｅｎｔｈｅＰｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｗａｓｄｅｃｒｅｓｅｄ／／化ｓｔｕｄｙ化ｅｅｆｅｃｔｓｏｆｎｏｒｍａｌ过凸ｄｌｏｗＰｌｅｖｅｌｓｏ凸ｔｈｅｇｒｏｗｔｈ＾ｔｈｅ乂ｓ（Ｖ）ｏｒＡｓ（ｎｉ）ｕｐｔａｋｅ，ａｄｓｏｒｐｔｉｏ凸ａｎｄｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏ打ｏｆｔｈｉｓａｌｇａｅ．Ｔｈｅｍａｉｎｒｅｓｕｌｔｓａｒｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄａｓｆｏｌｌｏｗｓ：？１．ＥｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔＰｃｏｎｃｅｎ仕ａｔｉｏｎｓｏｎｔｈｅｒｏｗｔｈｏｆ／ｒｕ／ｉ舟ａ／ａｆｅｗｂｇ卸ｐｗｅｓｅ？ＩｎｌａｂｏｒａｔｏｒｙｃｕｌｔｕｒｅｓｔｕｖａｒｉｏｕｓＰｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ１／２００ＰＰｎｏｍａｌＰ，ｐ（，！－ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｓ８８．９ｍ１／ｔｏｉｎｖｅｓｔｉａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＰｏｎｔｈｅｂｉｏｍａｓｓｇ）ｇ，ｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆＳｐｉｒｕｌｉｎａｌａｔｅｎｓｉｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｐ１／１０１／２５１７５ＯＰｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｈａｖｅｌｉｔｔｌｅｉｍｐａｃｔｏｎｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｉＳｗ＞ｗ／加ａ如佑ｎｓｗ，，／，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌＰｌｅｖｅｌ．町ｅｐｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔｓｉｇｎｉＳｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｄ＾ｂｕｔｌｔｅｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｄａｔ１／１Ｐ．ＰｔｔｈｅｃｈｌｏｒｏｐｈｙｌｃｏｎＯＯｌｅｖｅｌＷｈｅｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｉｏｎｗａｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｏ１／２００，ｔｈｅｂｉｏｍａｓｓ，ｈｙｃｏｂｉｌｉｐｒｏｔｅｉｎｃｈｌｏｒｏｌｌｃｏｎｔｅｎｔｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｉｎｄｉｃａｔｉｎｔｈｅｐ，ｐｈｙｇ面 不同巧浓度对螺旋藻神吸附、吸收及转化的影响研巧ｇｒｏｗｔｈｏｆＳｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓｗａｓａｆｆｅｃｔｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ．２．ＥｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔＡｓＶＡｓＩＤｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｎ化ｅｒｏｗｔｈａｎｄＡｓｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ（），（）ｇｏｆｒｕｌｎａａｔｅｎｓｉｓＳｉｉｌｐｐＷｅｔｒｅａｔｅｄ々ｗｒｗ／ｚｒｔａ／？／幻化ｎｗｊｗｉ也ｄｉｆｅｒｅｎｔ乂ｓ（Ｖ）（５０，１００，１５０，２００，２５０，３００—－ｉｉｏｒ．ＬＡｓｉｎ）０１００２００３００ｘＬｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ化ｃｏｍａｒｅｔｈｅｄｉｆｅｒ畑ｃｅｏｆ惦）（口，，，ｊｇ）ｐｇｒｏｗｔｈ．Ａｓａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｔｈｉｓｍｉｃｒｏａｌｇａｅ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ，ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｃｏｎｔｒｏｌｄｉｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＡｓＶａｌｍｏｓｔｈａｄｎｏｅｆｅｃｔｏｎｔｈｅｂｉｏｍａｓｓｏｆ，（）ｚ＞ｍ／加幻／ａ化ｗ別Ａｎｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｂｉｏｍａｓｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄ汪ｆｔｅｒＡｓｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｂｕｔｔｈｅ坏ｐ（），ｃｈａｎｇｅｗａｓｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔＴｈｅＡｓａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｔｏｔａｌａｒｓｅｎｉｃｃｏｎｔｅｎｔｏｆｉＳ／ｗｎ／／如ａｐ／ａ化ｒｏｓｅｓｉｇｎｉ扫ｃａｎｔｌｙｂｙｉｎｃｒｅａｓｉｎｇＡｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍ．Ａｔｔｈｅｓａｍｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ＾也ｅｕｐｔａｋｅａｎｄｂ）ｔａｌＡｓｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｉｓａｌｇａｅｔｒｅａｔｅｄｂｙ＾ｓ（ｉｎ）ｗｅｒｅａｌｌｈｉｇｈｅｒｔｈａｎＡｓ（Ｖ）ｔｒｃａｔｏｅｎｔｔｈｅａｍｏｕｎｔｏｆａｄｓｏｒｂｅｄ乂８ｈａｄｌｉｔｔｌｅ＾？ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ．ＴｈｅｒｅｈａｄｎｏＡｓａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｉｎ却＞ｗ／ｚ打。知。化巧加ｅｘｐｏｓｅｄａｔ５０ａｎｄ１００＿－ｉｉＡＶ－＊Ｌｓｂｕｔ化ｅａｃｃｕｍｕｌａｔｅｄＡｓｒｅａｃｈｅｄ０ｐｇ．２４２ａｎｄ０．３００ｍｋｗｉｉｅ凸化ｅａｌａｅｗａｓ（），ｇｇｇｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＡｓＩＩＩ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｉｓａｌａｅｈａｄａｓｔｒｏｎｅｒａｂｉｌｉｔｔｏａｃｃｕｍｕｌａ化ＡｓＩＩＩａｔｔｈｅ（）ｇｇｙ（）ｏｎ１ｓａｍｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｓ．ＷｈｅｎｔｈｅＡｓＶＣＯ岛ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓ１５０１／化ｅＡｓａｃｃｕｒｎｕｌａｔｉｏｎ（）惦，－ｉｏｆ－／ｒｗ／切幻？／口ｆｅ／ｗｉｓｒｅａｃｈｅｄ１．００６ｍｋｅｘｃｅｅｄｉｎｔｈｅｌｉｍｉｔｖａｌｕｅｏｆＡｓｉｎｈｅａｌｔｈｃａｒｅ命／ｇｇ，ｇ＂＾ｒｏｄｕｃｔｓ１ｋ．Ｔｈｅｈｅｎｏｍｅｎｏｎｗａｓｍｏｒｅｓｅｒｉｏｕｓｉｎｔｈｅａｌａｅｔｒｅａｔｅｄｂ２００ａｎｄｐ．０ｍ（ｇｇ）ｐｇｙｉ３００Ｌ／ＡｓＩＩＩｗｈｉｃｈｉＭｃａｕｓｅ过ｒｉｓｋｔｏｈｕｍａｎｈｅａｌｔｈ．ＢｕｔｍｏｓｔｏｆｔｈｅＡｓｗａｓ蜡（），ｙａｄｓｏｒｂｅｄｏｎｔｈｅｃｅｌｌｓｕｒｆａｃｅａｎｄｔｈｅｒｅｆｏｒｅｕｓｉｎｏｓｈａｔｅｂｕｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏ打ＰＢＳｃａｎ，ｇｐｈｐ（）ｓｎｉ巧ｃａｎｔｌｙｒｅｄｕｃｅｔｈｅｔｏａｌａｒｓｅｎｉｃｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｈｉｓａｌａｅ．Ｉ打ａｄｄｉｔｉｏ凸ｏｎｌｓＶｏｃｃｕｒｒｅｄｉｇｔｇ，ｙＡ（）ｎ／ｗ化ｗｓｅｘｏｓｕｒｅａｎｄｓｅｒｅｆｏｕｎｄｅａａｅｉｒｊａ／幻ｉｔｈ乂Ｖ．乂ｓｎｉＡＶｗｉｎｔｈｌ娘只（）ｐ（）（）ｇｅｄｓｔ化ｅｌａｅｒｗａｓ化ｅｍａｎｆｏｒｍｔｒｅａｔＡｉｎｂｕｔｉ．（），３．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｖａｒｉｏｕｓＰｃｏｎｅ畑ｔｒａｔｉｏｎｓｏｎＡｓ（Ｖ）ｏｒＡｓ（ｎｉ）ａｄｓｏｒｐ材ｏｎ，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎｏｆＳｉｒｕｌｉｎａｌａｔｅｎｓｉｓｐｐｎｏｒｍａ？ｅｒｏｗｅｒ过ｎｄｌＰｃｏｎｃｅｎａｔｉｏｎｓＯＰＰｎｏｒｔｒｅｃｗａｓＵｎｄｌｔｒｌ＾ｏｗｈｄｕｔｉｏｎｆｏｕｎｄ（，ｇ＇＾Ｖ＊ｆｏｒＳｐｉｒｕｌｉｎａｗｅｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｔｈｉｓａｌａｅｗｉｔｈＡ￥３００ｉＬｏｒＡｓＩＩＩ２００３００），ｇ（）（｜ｇ）（）（，Ｕ＾ＶｉｔｏｃｏｍａｒｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＰｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｎｔｈｅＡｓｏｒＡｓＩＩＩａｄｓｏｒｔｉｏｎ［ｇ）ｐ（）（）ｐ，ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｉｎｔｒａｃｅｌｌ山扯Ａｓｓｐｅｃｉｅｓ．ＴｈｅａｂｓｏｒｂｅｄＡｓｃｏｎｔｅｎｔｗｅｒｅ０．２０２ａｎｄ０．８０２＂＇ＡＶｉｎＳｐｉｒｕｌｉｎａｌａｔｅｎｓｉｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈ３００，ＬｓｏｒＡｓＩＩＩｕｎｄｅｒｎｏｒｍａｌＰｐｐｇ（）（）ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｒｅｓｅｃｔｉｖｅｌ．ＷｈｅｎＰｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓ１／２５ＰｔｈｅＡｓｕｔａｋｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｌ，ｐｙ，ｐｇｙ＇ｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｏ１．３６９ａｎｄ２．１８１ｍｇｋＶＷｈａｆｓｍｏｒｅ，ｔｈｅａｂｓｏｒｂｅｄＡｓｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｏ１．４５７ａｎｄｇ＇＾－ｗａｓ２，６７２ｍｇｋｇｂｙａｌｇａｅｗｈｅｎＰｃｈａｎｇｅｄｔｏ１／５０Ｐ．ＴｈｅｆｉｎｄｉｎｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｒｅｄｕｃｉｎｇｇＩＶ 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第一章文献综述第一章文献综述微藻作为海洋和淡水生态系统中的初级生产者，将光、二氧化碳、无机盐和水通过光合作用转化成有机物和氧气，供其自养生长所需的养分，对维护水环境的生态平衡具有重要作用（Ｌｅｅ，２００８）。不少微藻含有丰富的营养物质，在保健品的开发与利一用上具有很高的经济价值。螺旋藻是种古老的原核生物，含有丰富的蛋白质、维生＂素、氨基酸、多糖不饱和脂肪酸等生理活性物质，被营养学家、医学家称为地球上＂一（２０１２的营养冠军张晓燕等，）。作为种营养价值极高的保健品，螺旋藻的重金属含量日益受到人们关注，２０１２年。例如国家食品药品监督管理局对Ｗ螺旋藻为原料的保健食品进行的重金属专项监督检查结果表明，部分品牌的神含量超过了国家限量标准。该事件发生后，云南、浙江、山东等各省食品药品监督管理局加强了螺旋藻保健品质量监管工作。巧一（Ａｓ）是种广泛分布于±壌、矿物、水体和生物体的类金属元素，在地壳中的丰度在所有元素中排列第２０位，由于其毒性被列为Ｉ类致癌物（Ｏｒｅｍｌａｎｄ＆Ｓｔｏｌｚ，－１１２００３‘）。淡水水体中Ａｓ含量从低于１帖Ｌ到１０帖心，在己报道的受污染的地下水－１中含量达５０００帖Ｌ（Ｌｅｖｙ等，２００５）。在自然水体中，Ａｓ主要Ｗ神酸盐（ＡｓＶ）（）和亚神酸盐（Ａｓ田Ｉ）的形态存在（李妍丽和柯林，２０口）。随着人类矿山开采、金）属冶炼、农药施用等不合理的开发与利用，造成了大量神化合物进入环境并随河流进入水体，Ａｓ污染事件屡见不鲜。例如，２００８年云南阳宗海Ａｓ污染；２００９年９月大沙河部分断面Ａｓ含量超标，挑河出省境断面超标２．６２倍；２０１４年湖南石口县受污染水体神含量超过国家地面水质标准的巧倍。‘一陆生植物中？Ｐ／ｃｒ／ｓｖｚ７ｆｆｌｆａＡｓ超级累植物，己有研究表明娱蚁草（）是种，其老－ｉ．ｋ叶部分积累的Ａｓ含量可高达１３８００ｍｇ（Ｔｕ等，２００２）ｓｇ，被广泛应用在止壌Ａ污染的生物修复上。大型水生植物也常被用于去餘水体中的Ａｓ，如Ｚｈａｎｇ等（２００８）－’ｉｍｏ’ｓｃａｒｏＫｍ用５０ｌＬＡＶ处理卡洲满江红（ｙｉｚｏ化７ａｎａ）１０ｄ后，乂ｃａｒｏ化的ｎ（）－ｉ一，Ａｓ富集量为２８４ｍｇｋｇ。微藻是类广泛分布在陆地和海洋的自养生物。近年来，微藻因其表面积大、吸附、吸收能力强、成本低等特点（Ｄ执皿ｅｚａｎｄＡｋｓｕ，２００２；？〇１３站等，２００９），能从水体环境中富集大量的神（１＾＾巧邮＾３等，２００８；、也等，２０１１；Ｙａｍａｏｋａ等，１９９９；Ｆｏｓｔｅｒ等，２００８）而日益受到关注。Ｙａｍａｏｋａ等（１９９９）发现，ｉ盐藻ＳＯ’（ＤｔｍｆｌＷｅ化Ｉ化ＪＯ）在ｌＯＯＯｍｇＩ／ＡｓＶ处理７ｄ后，藻体富集的总神含量为２７４０（）‘ｉ－ｍｇｋｇ。微藻对Ａｓ较强的富集作用使其在含神污水的生物治理方面有良好的应用前景。但当微藻作为保健食品时，神富集含量高则可能使水体中的神污染大量积累于藻１ 不同巧浓度对巧旋藻巧吸附、吸收及转化的影巧研巧：体，对保健产品的质量造成了严重威胁。憐（Ｐ）和Ａｓ属于同族元素，ＡｓＶ能通过微藻吸收磯酸盐的通道进入藻细胞（张（）兵等，２０１１；Ｑｉｎ等，２００６）。研巧表明，环境中的Ｐ会影响微藻Ａｓ的吸收，较高的Ｐ浓度减少了微藻Ａｓ（Ｖ）和Ａｓ（ｍ）的吸收量（Ｈａｓｅｇａｗａ等，２００１；Ｋａｒａｄｊｏｖａ等，２００８）。－ｉＡｓ，除此之外，微藻的代谢也受Ｐ的制约。当培养基中的稱酸盐浓度较高时１．３ｍｇＬ，（）—１，Ｖ１ｊｍｏｌＬＡｓ／ｉ／ｏｒｅＷｆｌｊａ化ｗｊｔ７２ｈ后，藻细８７％的Ａｓ为处理小球藻（Ｃ胞内，｜（））无机神甲基神只占９％，同样浓度的Ａｓ（ｍ）处理后，８１％的细胞内神为Ａｓｍ），甲基化神和（ＡｓＶ的比例很低（Ｋａｒａｄｊｏｖａ等，２００８）。然而Ｈｅｌｌｗｅｇｅｒ等（２００３）认为，环境中（）的Ｐ缺乏时，藻内Ａｓ代谢甲基化为主，外排的主要是甲基化神。目前有关Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ积累与代谢的影响还没有报道。因此，本研巧Ｗ纯顶螺旋藻（却化？ａ．如为研巧对象，设置不同浓度Ｐ、Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｎｉ）处理，探讨不同Ｐ浓度条件对螺旋藻Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）吸附、吸收和转化特性的影响。１．１螺旋藻的简介及其营养成分微藻由于表面积大、吸附和吸收能力强，营养物质丰富等特点，被广泛应用在食品、饲料、化工原料、废水净化等领域，尤其在保健品方面发挥着很大的优势。而螺＂＂旋藻在保健品中占重要地位，被誉为全球最理想的食品。１丄１螺旋藻的简介螺旋藻是一类低等生物，属蓝藻口、蓝藻纲、颤藻目、颤藻科、螺旋藻属（袁晓雄和杨淑培，１９９７），是地球上最早出现的光合生物，细胞结构简单，没有真正的细５０￣５００ｍ７￣胞核。藻丝主要靠简单的细胞分裂增加藻丝长度，藻体长Ｍ，螺距长１８０ｉｍ，Ｊ￣７０－螺旋宽２０＾１１１（徐建祥，１９９８；胡鸿钩，２００３）。螺旋藻细胞壁很薄，厚度大约４０６０ｉｍ１。［，主要由蛋白质构成，纤维素含量较低，极易被消化吸收（陈峰和姜悦，９９９）螺旋藻广泛分布在许多热带湖泊￣３０、池塘中，生长最适的光照强度为２５Ｋｌｘ，最适’温度为２５￣３５Ｃ￣９Ｈ范围为８１，１。，最适ｐ（李定梅，９％陈峰和姜悦９９９）；早在１６世纪，墨西哥城郊ＳｏｓａＴｅｘｃｏｃｏ湖沿岸的阿兹台克人将从Ｔｅｘｃｏｃｏ湖中采集的螺旋藻晒干，制成绿色饼干出售（Ｆａｒｒａｒ，１９６６）。１９４０年，法国药物学家Ｃｒｅａｃｈ到非洲探险时，发现乍得湖沿岸的±著人也食用螺旋藻（Ｃｉｆｅｒｒｉ，１９８３）。２５年后，正当学者们为世界人口剧増，粮食短缺问题担忧时，乍得湖及其邻近地区其他盐碱湖螺旋藻的再次发现，受到了营养学家、藻类学家、政府的高度重视。２０世纪７０年代２ 第一章文献综述初螺旋藻开始了大规模的工厂养殖。我国螺旋藻的研巧起步较晚，１９８３年从美国、法８９年我国国、德国、印度等国开始陆续引进藻种在实验室内进行研究，１９出现了工厂（３化养殖螺旋藻胡鸿钩，２００）。此后，螺旋藻的生产得到了飞快的发展。化’目前国内外螺旋藻工厂化生产的主要是纯顶螺旋藻（毎７０巧ｏｆｅ／ｗｓ）和极大、２００２螺旋藻（衝１＞？化（杨也宁，）。螺旋藻的应用非常广泛，可用于食品、饲料、精细化工及化妆品等。螺旋藻蛋白质含量丰富，氨基酸的种类齐全，且含有较多的碳水化合物，特别是在保健食品的开放利用上具有独特的功效，被世界卫生组织＂＂（ＷＨＯ）认定为人类２１世纪的最隹保健品。１丄２螺旋藻的营养成分及功能（１）蛋白质蛋白质是细胞的主要组成部分，，维持和调节机体正常的代谢活动是生命活动的￣％７物质基础。螺旋藻Ｗ高蛋白含量著称，约占细胞干重的６０％７０（周志刚等，１９９），相当于大豆的２倍，牛肉、鸡肉的３．５倍，蛋类的４．６倍，猪肉的７倍（Ｃｉｆｅｒｒｉ＆Ｔ化〇址１９８５）。藻蓝蛋白含量高达蛋白质总量的２０％，藻蓝蛋白能提高人体免疫力，改善机体的血红素血液循环。氨基酸是蛋白质的基本组成单位，螺旋藻含有天冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等１８种氨基酸，其中包括８种人类必须氨，１９９５２００３），且组成均衡ＦＡＯ推荐的基酸（黄圣基和万青；胡鸿钩，，接近联合国标准。（２）碳水化合物°螺旋藻中碳水化合物含量占细胞干重的１５／＾２０％（杨董董，２０１１），其中多糖是￣主要的存在形式（含量占千重的１４％１６％）。螺旋藻多糖主要是碟酸脂环醇、糖原、葡聚糖、唾液酸等动物淀粉性多糖。研巧表明，螺旋藻多糖具有调节和提高机体免疫、、力，抗镇射抗癌抗氧化和促进淋己细胞转化，提高伸进系统的反应速度等作用（张静，２０１１）。（３）脂类一螺旋藻脂肪含量约６％－９％３￣９，是种低脂食品。粗脂肪含量约为％％，脂肪酸°－４．９／＾５（陈峰和姜悦，１９９９）。脂肪酸Ｗ不饱和脂肪酸为主．７％，其中Ｙ亚麻酸由于其含量丰富－（每ｌＯＯｇ螺旋藻干重约９００ｍｇ）受到营养学者的瞩目。Ｙ亚麻酸具有调节血压、抗衰老、降低胆固醇、促进前列腺分泌、清除血脂、软化血管、加强机体免疫３ 不同巧浓度对授旋藻神吸附、吸收及转化的影咱研巧调节和代谢等功能（Ｔａｎｔｉｃｈａｒｏｅｎ，１９９４）。（４）矿物质及其他营养成分螺旋藻含有人体必需的巧、络、镑、铁、铜、钟、钢、巧等５０种Ｗ上的矿物质和微量元素，，其中Ｗ钟、巧、钥、铁、倭、磯含量居高这些矿物在藻内Ｗ馨合态存在，易被吸收利用，消化利用率高，能有效调节机体平衡且不会对细胞和组织器官产生毒害作用（刘惠芳，２００１）。此外，螺旋藻含有丰富的植物色素和维生素。类胡萝ｈ素含量为干粉的°０．２／＾．４％１０倍。藻蓝素是螺旋藻主要的光合色素，是胡萝ｈ的，这种纯天然的藍色素被广泛应用在化妆品和食品中，且具有提高机体免疫力和抗艾滋病的作用（杨宝莖，２Ｂ６、Ｂ１２、２０１１）。螺旋藻含有１３种维生素，例如维生素Ｅ、维生素Ｂ１、Ｂ、烟酸、－叶酸等。尤其Ｐ胡萝ｈ素是所有食物之冠，具有保护视力、治疗白内障、青光眼和抗癌的作用（张静，２０１１）。１．２淡水中的神与其在微藻中的代谢１．２．１水环境中Ａｓ的污染现状一神（Ａｓ）是地表环境中普遍存在的种有毒的类金属元素（Ｍａｎｄａｌ，２００２），在—＂ｉ＂，地壳中的平均含量为１．８ｍｋｇ（Ｌｉａｒｄ＆Ｂｅｒ１ａｕｇｐｐｇ，９９４），被称为毒药之王（Ｎｒｉｇ，—一１‘２００７Ａｓ含５￣２Ｌ）。海水中的量般为０．帖（，１９９６Ｎｅ拓１９９７）在天然孙赂等；；－—ｉ，Ａｓ的背’－ｉａｅｌｄ９８３淡水中，景浓度约０．１ｇＬ（Ｍｒｔｉｎ＆Ｗｈｉ祀，１），平均含量为０．５帖ＬＫ（李妍丽，２０１２）。除了火山爆发、富神矿物的风化等自然原因之外，人类金属冶炼，工厂废水的肆意排放、，农药除草剂、杀虫剂等不合理施用（Ｂｈｕｍｂｌａ等，１９９４），加剧了环境Ａｓ污染问题。全世界每年有１２．５万吨的神通过各种途径进入水体中（李妍丽，２０１２；Ｃｈｕａ，１９９９），大量Ａｓ进入到水环境中，因Ａｓ引起的水体污染现象及其带来的健康问题在世界范围内普遍存在。孟加拉国、印度、智利、阿根廷、秘鲁、匈牙利、墨西哥等２０余个国家均报道过饮用水Ａｓ中毒事件（Ｍａｎｄａｌ，２００２）。例如‘１乂￣七在智利北部的１＾）３３浓度为１９０２１８００１６（汪宁欣，２０１４）孟加拉湾河流中＾；在Ｈ角洲地区，约％００万人喝了Ａｓ污染的水导致Ａｓ中毒（李妍丽，２０１２）。据统计，２０１５１２）１０年我国仍有约．％的近岸区域中神含量超标（李宝洁，２０。在我国神污染在新疆、内蒙古、陕西、云南、贵州、湖南、广西、广东和台湾等省区较为严重（胡立刚和蔡勇，２００９；郭华明等，２００７），湖南省岳阳县、贵州省独山县、四川省安宁镇４ 第一章文献综述等地多次发生饮用水Ａｓ污染中毒事件。据报道，中国内蒙古地区饮用水Ａｓ含量高达－ｉ２４００’ｉｇＬ（Ｓｈａｒｍａ＆Ｓｏｈｎ，２００９），新疆奎屯地区部分居民饮用水神含量高达ｔ￣１９０８５０（Ｋｍ，２０００）。然而根据我国卫生部规定，生活饮用水Ａｓ含量限值（５７４９－２００６（Ｗ为１０ＧＢ）。世界卫生组织ＨＯ）己将生活饮用水中乂３标准值－－＇１５０一从原来的ｉ降为１０。由此看来，水体Ａｓ污染己被视为个全球性的公Ｍｇ峨Ｌ共卫生问题，严重威胁了人类的健康。１．２．２Ａｓ与人类健康的关系，２００７）微量的Ａｓ可Ｗ生血润肤，促进人体新陈代谢（郭华明，但近年来随着大量Ａｓ被排放到环境中，Ａｓ污染问题日益突出，己经严重威胁到人类的健康。Ａｓ被国际癌症研巧机构（ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＡｇｅｎｔｆｏｒＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＣａｎｃｅｒ，ＩＡＲＣ）和美国环保署一人类有害物质信息库（ＩｎｔｅｇｒａｔｅｄＲｉｓｋＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍ，ＩＲＩＳ）列为第类致癌物（金雪莲等，２０１２）。孟加拉盆地有超过２０刀人曰神中毒（Ｓｍｅ姐巧＆Ｋｉｎｎｉｂｕｉｇｈ，２００２）；我国有高达１５００万人口暴露在Ａｓ中毒危害病区，且己确诊的患者数万人之多（王颖等，２０１０）。レ、、Ａｓ可乂通过呼吸道食道皮肤进入人体，干扰机体的新陈代谢，抑制蛋白酶０１化Ｐａ－的活性并致癌（王萍等，２ｌ等，２００２）。人体Ａｓ中毒剂量为化０１０．０５２ｇ，０６￣０２Ａ．．（杨胜科等２００４）。目ｓ致死量是０ｇ，前污染对人体造成的健康风险主要来源于地下水Ａｓ的长期低剂量暴露，其次为空气和食品中的Ａｓ。长期摄入低剂量Ａｓ可引起慢性中毒，出现神经系统奈乱、眩晕、气短、全身乏力、食欲不振、恶也啦吐，还可引起神经性疼痛（杨胜科等等症状，严重者四肢末梢有多发性神经炎，２００４；—１２００，１）。长期商神（＞５０＾Ｌ）、肖唐付等，ｇ暴露会引起皮肤角质化结膜炎、也血管至可能患皮肤癌、肺癌、肾癌等（Ｍｅｌｉｋｅｒ等２００７。Ａｓ等疾病，甚，）急性中毒可导致中枢神经系统障碍致全身麻木、呼吸道和消化道病变甚至死亡。此外，Ａｓ暴露会阻碍儿童的智力发育，且成年后患肺癌的机率更大（罗婷和景传勇，２０１１）。１．２Ａｓ的形态及毒性．３Ａ４周期第Ｖ主族３３一ｓ位于元素周期表第，原子序数为，是种有非金属到金属－＋的过渡元素３、０、巧、５＾，［＾价态存在。在自然界中，八３主要１＾？硫化物的形式存在于主壤、岩石矿物中，例如雄黄（ＡｓＳ）、雌黄（ＡＳ２Ｓ３）、神黄铁矿（ＦｅＡ巧）等（吴佳等，２０１１）。水体中的Ａｓ主要ＷＡｓ（Ｖ）和Ａｓ（ｍ）两种无机Ａｓ形态存化在富氧化５ 不同踐浓度对巧旋藻神吸附、吸收及转化的影响研巧Ａ２’３—性水体中主要是神酸根（Ｈ２Ａｓ〇４＼Ｈｓ〇４），在还原性水体中亚神酸盐（Ａｓ〇３）占优势（ＣｕＵｅｎ＆Ｒｅｉｍｅｒ，１％９；Ｆｅｒｇｕｓｏｎ＆Ｇａｖｉｓ，１９７２）。除此之外，自然界中还一存在多种形态的有机Ａｓ，主要是甲基化的神化物，常见的有甲基神（ＭＭＡ）、二甲基神（ＤＭＡ）和Ｈ甲基肿的氧化物（ＴＭＡＯ）（杨搪和朱永官，２００９胡立刚和蔡；勇，２００９）。Ａ一ｓ的毒性不仅与其浓度有关，还由其存在形态决定。般认为无机Ａｓ毒性比有机Ａｓ大，Ａｓ（ｉｎ）的毒性是ＴＭＡＯ的１０００倍（Ｈｉｒａｎｏ，２００４）。而在两种无机Ａｓ中，Ａｓ（ｍ）是Ａｓ（Ｖ）毒性的６０倍Ｗ上（王颖等，２０１０）。Ａｓ各形态毒性顺序依次为：巧化Ｈ氨（ＡｓＨｓ）＞有机神化Ｈ氨衍生物＞亚神酸盐（ＩＩＩ）＞有机神化合物（阻）＞氧化神＂（Ａｓ２〇３）＞种酸盐（Ｖ）＞有机神化物（Ｖ）＞金属神（Ａｓ）（杨胜科等，２００４；王静，２０１２）。１．２．４微藻Ａｓ的代谢机制、我国藻类资源丰富，微藻因其个体小表面积大、代谢迅速、吸附能力强等将点被广泛应用到含Ａｓ废水净化的研究中。微藻对Ａｓ胞外的快速吸附和胞内的缓慢吸收一系列代谢机制Ｗ及之后的，使微藻能在含Ａｓ环境中存活。（１）微藻细胞表面对Ａｓ的吸附藻类细胞壁含有径基、氨基、琉基、幾基等许多功能基团，这些基团使细胞壁能通过离子交换或其它机制与重金属或类金属离子结合（Ｘｕｅ＆Ｓｉｇｇ，１９９０；Ｔｉｎｇ等，一１９９１）。例如，许文涛等（２００９）研究发现ｉ，纯顶螺旋藻能耐高浓度Ｃｒｎ）的种机（制，就是细胞表面分予能与Ｃｒ（ｎｉ）结合使其沉积下来，防止过度Ｃｒ（ＩＩＩ）进入细胞造成—１，Ａｓ伤害。杜氏盐藻（公《／２〇说仏化Ｗ）在５００ｆｉｍｏｌＬ（Ｖ处理１３ｄ后，藻体表面吸）１附的神含量为６８３．９ｘ（王亚等，２０３）。另外，蓝藻的胶质销或銷被在生长过程中（ｇ向胞外分泌的多糖阴离子聚合物，能与重金属结合，对藻细胞起到保护作用（Ｐａｒｋｅｒ等，１９９６；ＤｅＰｈｉｌｉｐｐｉｓ＆Ｖｉｎｃｅｎｚｉｎｉ，１９９８）。并且大量研究表明（Ｍｏｈａｍｅｄ，２００１；Ｐｉｒｓｚｅｌ等，１９９５；Ｄｏｓｈｉ等，２００９），死ｔ的藻体细胞同样具有较强的吸附能力。这可能是由于藻体死亡后细胞膜通透性改变，离子更容易进入藻体内，而藻体表面积増大，能（２００９结合较多的金属离子许文涛等，）。６ 第一章文献综述（２）微藻细胞对Ａｓ的吸收微藻为了满足自身对微量元素的需求从环境中吸收重金属一，另反面也导致了重金属在藻体内相对缓慢和长期的积累。环境中的Ａｓ通过水甘油通道蛋白（Ａｑｕａｇｌｙｃｅｒｏｌｐｏｒｉｎ，ＡＱＰ）、縣酸盐转运蛋白等途径进入藻类细胞，然后在细胞质内与琉基－（Ｐ（細）、还原型谷腕甘化（ＧＳＨ）、蛋白质、植物络合素Ｃｓ）、多磯酸体（ＰＰＢ）一ｍ－等形成稳定的化合物，从而降低其毒性。般认为在藻细胞内Ａｓ与ＳＨ、ＧＳＨ结（）一ａｋａｗａ等，２合（Ｈａ，２００５Ｎａｒａｍｎａｎｄｕｒａ等００６）。ＰＣ类广泛分布在藻类中ｙ；ｓ是的富含半脱氨酸的小分子多肤，还能，不仅能使重金属离子失活缓解重金属的毒性作为过氧化氨和超氧阴离子自由基的清除剂，减少重金属引起的氧化胁迫损伤（王宏０６Ｔ一叶，２０）。金属硫蛋白（Ｍ）是种低分子量、高琉基含量的金属结合蛋白，能与金属离子结合形成无毒或低毒的络合物，目前很少在藻类中发现ＭＴ的存在。Ａｓ在藻细胞内还通过氧化还原一、甲基化、外排等系列代谢活动降低Ａｓ对细胞的毒性效应。（３）微藻对Ａｓ（ｎｉ）的氧化作用Ａ一ｓｉｎ氧化成毒性较低的Ａｓｓ微藻将毒性较高的（）（Ｖ），是藻体Ａ代谢的个重要－１２刖３）２５０￣５００ｍ１机制。王亚等（用叫１〇化Ａｓ（）处理无菌盐藻３ｄ后，藻体内ＡｓＶ（）８４？／的比例为５？ｒ＾８．８％，盐藻细胞吸收Ａｓｍ后将其大部分氧化成了ＡｓＶ。集胞藻．（）（）—ｉ１０３－－（々Ｔｊｅｃ片〇呼加ｓｐ．ＰＣＣ６８）在２ｌｏｌＬ和１００１〇１１／Ａｓ（ｉｎ处理１４ｄ后，胞内叫叫）Ａｓ形态均ＷＡｓ（Ｖ）为主，说明Ａｓ（ｉｎ）进入集胞藻后，藻细胞启动了Ａｓ田Ｉ傅化机制（张２ｎ等？？兵等，０１１）。然而Ｑｉ（２００９）则认为红藻（ＣｙｗＨ況航ＷＣ妙ｚｏ？）受到Ａｓｆｌ胁迫时，在胞外将氧化，与藻体分泌的胞外碳酸巧酶、胞外碱性磯酸酶（）等酶类物质有关。但无论藻体是胞外还是胞内将Ａｓ（ｍ）氧化为Ａｓ（Ｖ），都降低了Ａｓ（ＩＩＩ）的毒性，达到了解毒的目的。（４）ＡｓＶ还原与外排（）研巧■表明陆生植物娱蛇草（巧ｅｒｂｖｉＴｔｏ／ａ）通过根系吸收Ａｓ后，在体内将Ａｓ（ｙ）转化为Ａｓ（ｍ）（Ｚｈａｎｇ等，２００２）。在微藻细胞中也呈现出相同机制，Ａｓ（Ｖ）进入藻体Ｉ后，在神酸盐还原酶的作用下经酶促反应首先被还原成Ａｓ（巧，然后排出胞外，或者通过与琉基物质络合后运输至液泡中储存，从而降低胞内Ａｓ的含量及其毒性（艮ｏｓｅｎ，－Ｉ．Ａ１９９９；Ｄｏｕｃｌｅｆ＆Ｔｅｒｒｙ，２００２）。Ｋａｒａｄｊｏｖａ等（２００８）用１叫ｉｏＩＬｓ（Ｖ）处理小球藻（ＣＷｏｒｅＷａ５０化？〇）７２山发现小球藻细胞吸收的神形态中３２％为Ａｓ（ＩＩＩ），说明藻体内ＡｓＶ向Ａｓｉｎ转化。不同藻类对ＡｓＶ的还原能力不同，温度、藻类分泌物、藻类（）（）（）７ 不同稱浓度对螺旋藻巧吸附、吸化及转化的影巧研巧生长状态等因素都会影响藻类对Ａｓ（Ｖ）的还原。肖虹滨等（１９９５ａ）研究发现，８７０１金藻在指数生长初期时Ａｓ（Ｖ）还原率最高，Ｈ角褐指藻Ａｓ（Ｖ）还原率比叉鞭金藻高约？２％￣１１％。藍绿藻类（如ｏ／ｖｍ航／Ｗｓｐ．）容易吸收Ａｓ（Ｖ）并在细胞内将其还原为Ａｓ（ｎｉ），随之分泌到胞外ａｒｔ，２００９）。（Ｍｏｒｉｙ等（５）微藻Ａｓ甲基化藻类将从水体中吸收的Ａｒａ一ｓ（Ｖ）还原为Ａｓ（）后，可进步通过甲基化作用形成毒性较小的甲基神（张楠等，２０１３）。Ａｓ（ｎｉ）在甲基转移酶（Ｍｅ也ｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ）的催化一作用下－ＭＡ，通过利用Ｓ腺昔甲硫氨酸作为甲基供体，甲基化生成甲基神化物（Ｍ）、二甲基神化物（ＤＭＡ），最终ＷＤＭＡ（Ｖ）的形式排出体外（陈保卫等，２００９）。例如，集胞藻在７．５Ａｓ（Ｖ）处理１４ｄ后，形成了可挥发的甲基神化合物（Ｙｉｎ等，２０１１）。扁藻（Ｔｆｅ／ｒａｓｅ／ｎｉｗｃ／ｉｗＹ）经Ａｓ（Ｖ）处理４ｄ后培养基中测到了ＤＭＡ，７ｄ后ＤＭＡ浓度上升，因此ｒｃＡｗｊ由于其产生ＤＭＡ的能力强被应用到高盐废水神的去除（李妍丽，２０１２）。微藻将毒性较高的无机Ａｓ转化为毒性较弱的有机Ａｓ并排放到胞外，可Ｗ有效的降低藻细胞内和培养基中无机Ａｓ的含量，减轻无机Ａｓ对藻体造成的损害。（６）微藻内神脂和神糖的合成藻类的Ａｓ代谢与脂类和糖类代谢密切相关。Ｉｒｇｏｌｉｃ等（１９７７）研究发现Ａｓ（Ｖ）进’入扁藻（ｒｅ／ｍｗ／ｍｗｃＡｗＯ细胞后，Ａｓ可Ｗ取代磯脂醜己醇胺和磯脂酷胆碱中的Ｐ－或Ｎ，从而进入磯脂的合成过程形成含Ａｓ的脂类。神糖是由Ｓ腺昔甲硫氨酸转化而－磯脂醜乙醇胺－ＰＥ－Ａ－ＰＣ来，在神（Ａｓ）合成神磯脂酷胆碱（ｓ）的甲基化过程中发生一＆了这转化（Ｅｄｍ畑ｄｓ＆Ｆｒａｎｃｅｓｃｏｎｉ，１９８３ＰｈｉｌｌｉｓＤ）ｌｅｄｅ，１９８５）。；ｐｑｇ但目前有’＇（２００８关微藻中产生神脂和神糖的报道较少，Ｆｏｓｔｅｒ等）发现盐藻（Ｄｗｍｚ＆ｅ化／化ｒ／ｚｏ／ｅｃｔｏ）￣和Ｈ角褐指藻（削〇６〇洗ＪＣ如ｕｍＷｃｏ／ＴｉＭ化ＯＴ）中脂溶态神占总神的比例分别为２９％３８％、￣２９％２０％。１．３Ｐ与Ａｓ的竞争作用１．３．１微藻的Ｐ营养需求憐（Ｐ）是微藻的必须营养盐，是生物体蛋白质和核酸的基本成分，主要存在于藻细胞的原生质和细胞核中，直接参与了包括光能吸收与同化、卡尔文循环、同化产（Ｂｅａｒｄａｌｌ等，２００１，１），调节微藻物的运输等光合作用的各个环节；潘晓婷等９９７８ 第一章文献综述细胞膜结构、能量传递、信号传导等代谢活动（薛敏，２０１２李宝洁，２０１２）。同时；，Ｐ还是叶绿素、核酸、蛋白质和磯脂的重要组成部分，参与叶绿素合成、碳水化合物的代谢Ｗ及脂肪的转化（金月梅，２００８）。微藻不能在细胞内直接合成磯酸盐，只能从周围的环境中摄取Ｐ来满足自身的生长需求－２－－－。环境中的Ｐ主要从有机憐酸盐（葡萄糖雜酸、２磯甘油酸、和无机稱酸盐（Ｋ２ＨＰＯ４、防电Ｐ〇４、Ｋ３ＰＯ４）形式存化无机磯酸盐则是微藻主要的Ｐ源（贾顺义，２００６；薛敏，２０１２）。在磯酸盐含量较高时，微藻可Ｗ吸收过量的稱酸盐并储存在体内，Ｗ便外界Ｐ耗尽时能继续维持自身的生长（李斌，２００９）。当环境中无机Ｐ缺芝时，藻类还可Ｗ利用有机形态的Ｐ（薛敏，２０１２）。如有研巧发现，许多蓝藻能＂Ｐ利用约７５％的溶解性有机（Ｄｉｓｓｏｌｖｅｄｏｒｇａｎｉｃｈｏｓｐｈｏｒｕｓ，ＤＯＰ）（李斌，２００９）。ｐ宋丽娜等（２０１０）研巧发现，在高Ｐ浓度下小球藻生长最快，低Ｐ浓度会抑制小球藻细胞的分裂，使其生长较慢。赵艳芳等（２００９）认为Ｐ是控制单细胞微藻中肋骨Ｖｏ’条藻（ＳＡｅ／ｅｔｏｎｅｍａｅｏＷａｒｗ）和东海原甲藻（ｉｒａｃｅ／７／ｎｗｉ況＞／７如ｗｅｎｓｅ）生长的最重要’的因素。莱茵衣藻（ＣＡ／ａｍｙｄｏＴＭｏｎｏｓｒｅｚｎ／ｉａ／Ｙ／衍）在Ｐ限制４ｄ后其光合放氧率降低７５％（Ｗｏｆ等１９９８。Ｐｙｋ，）上述研巧均表明了是微藻生长的主要限制因素。石親勇等（２０００）在研究纯顶螺旋藻对磯酸盐的吸收利用时也发现藻体对Ｐ消耗较大的现象，‘■５７ｍｍｏ，Ｌ当螺旋藻的培养基中磯酸盐浓度为１，．１ｌ时藻体对其利用率高达７４．４２％，且憐酸盐的含量不足时会抑制螺旋藻的正常生长。１．３Ｐ对微藻Ａｓ．２积累的影响Ｐ和Ａｓ属同族元素，由于两者化学结构相似，ＡｓＶ）可Ｗ通过憐酸盐转运通道被（浮游植物吸收（Ｈｅｌｌｗｅｇｅｒ＆Ｌａｌｌ，２００４；Ｎｉｅｓ，１９９９）。Ａｓ对微藻的毒性与培养液中Ｐ浓度密切相关。研巧表明，较高的Ｐ浓度会抑制微藻对Ａｓ的吸收，増加藻体Ａｓ的半数致死浓度（Ｈａｓｅｇａｗａ等，２００１；Ｋａｒａｄｊｏｖａ等，２００８）。Ｋｎａｕｅｒ等（１９９９）研－ｉ１００９．．乂５巧发孤当培养液？含量较低（０．１ｍｇＬ）时，１＾１０１〇１１／￥处理能刺激小球（）３３藻生长。这可能是由于在缺Ｐ条件下Ａｓ〇４巧ＴｉＵ代替Ｐ０４１乍为营养盐供细胞生长（Ｈｏｗａｒｄ等，１９９５）。然而肖化滨等（１９９５ｂ）研巧结果则相反，培养基中Ｐ浓度的降低抑制了Ｈ角褐指藻的生长。这可能是由于Ｐ浓度的降低促进了藻体对Ａｓ（Ｖ）的吸收，造成Ａｓ对藻细胞的毒性加强。大量研究表明，，培养液Ｐ浓度会影响微藻对Ａｓ的积累与代谢从而影响Ａｓ对’藻细胞的毒性。Ｋａｒａｄｊｏｖａ等（２００８）研巧了憐酸盐对小球藻（ＣＡ／ｏｒｅ化ａｒｓａ／ｚｎａ）吸收Ａｓ的影响，结果发现Ｐ的加入显著降低Ａｓｍ和ＡｓＶ对小球藻细胞的毒性，但对其（）（）９ 不同稱浓度对巧旋藻巧吸附、吸收及转化的彭响研充细胞内甲基神的含量却无影响。王振红等（２０１５）在不同Ｐ水平下（±Ｐ）研究铜绿微‘ｉ囊藻对神酸盐的吸收情况－，，在Ｐ环境下用１０叫ｎｏｌＬＡｓＶ处理藻体２４ｈ后（），藻内的—１神含量为６０’＋Ｐ－．３７ｍｋ，条件下藻体神含量的１５倍Ｐ促进ｓｇｇ约为，且了藻体内Ａ向Ａｓ（ｍ）和ＤＭＡ的转化。Ｈｅｌｌｗｅｇｅｒ等（２００３）认为当环境中Ｐ缺乏时，藻内Ａｓ代谢Ｗ甲基化为主，外排的主要是甲基化神ｓＶ还原为Ａｓ田Ｉ；憐丰富时，Ａ（）后大部分）－直接排出藻体（图１１）。由此看来，培养基中Ｐ的浓度对藻体Ａｓ的积累、代谢及其毒性效应起到了至关重要的作用。能否通过调节培养基Ｐ营养水平改变藻细胞内Ａｓ的含量，或调控藻类Ａｓ的代谢，促进胞内无机Ａｓ向有机Ａｓ转化ｓ，Ｗ降低Ａ的毒性，是微藻神污染研巧的热点。－ｏｔｍｉｍｉｔｃｄ（ｌｕｘｉｓｕｐｔａｋｅＰＨｍ似Ｎ（ａ）ｉｔｃｄｙ）ＤＭＡ…＂Ｄ户，、＇ＤＭＷＭＵＭ／ＤＭＡ＼／＾＼＂＂ｆＶｉ觀；餐＼Ｎ／／＼ｕ／／Ａｓ（吼－ｗ图１１巧Ｐ和畜Ｐ条件下微藻细跑对Ａｓ的吸收和转化过程（Ｈｅｌｌｅｇｅｒ等２０的），－巧＞ｌｌＴｈｅＡｓａｂｓｏｒｔｉｏｎｄｔｒｒｍａｔｉｆｍｃｒｏａｒｇｐａｎａｎｓｆｏｏｎｒｏｃｅｓｓｏｉｌａｅｕｎｄｅｐｇ－－ＰＰｌｉｍＵｅｄａｎｄＮｏｔｌｉｍＵｅｄｃｏｎ出ｔｉｏｎｓ１．４螺旋藻Ａｓ污染研究进展近年来，有关螺旋藻Ａｓ污染的研巧主要集中在藻粉中Ａｓ含量的检测和Ａｓ污染源的追溯。螺旋藻的Ａｓ含量大多采用原子吸收（Ｍｏｒａｌｓ等，２００９董顺玲８，１９９）；或原子英光光谱法（王亚等，２０１４；陈辉等，２０１３）进行检测。随着螺旋藻保健品的发展，人们更加注重其安全品质，藻粉中Ａｓ来源日益受到关注。王志忠等（２０１２）追踪了鄂尔多斯碱湖纯顶螺旋藻粉中Ａｓ的来源，发现养殖用水主要的Ａｓ污染源。此－ｉ外，ｓ，螺旋藻的对Ａｓ的富集作用得到验证。Ａｈｍａｄ等（２０１０）用化１５ｍｇＬＡ处理１０ 巧一韋文巧综巧‘１ｄ后Ａ‘１．８ｋ０１４爆旋藻２１，藻体ｓ宫集量为ｍｇｇ？王志忠等（２）发现，当Ａｓ浓度ｌｌｍ？？为０．３２ｇＩ／时，弓｜进的非洲乍得湖锦顶螺旋藻富集的Ａｓ含量大于２．５ｍｇｋ皆，而’ｉ，ｓ标准限量为１．０ｍｇｋ。但１＞上研ｓ我国保健品的Ａｇ１＾究仅对廣旋藻Ａ富集量进巧检测，有关巧旋藻Ａｓ吸附、吸收特性，Ｗ及培养基中Ｐ营养益对螺旋藻Ａｓ积累与代谢的影咱几乎没有涉及。１．５拟解决的问题一ｓ＾？往的研巧表明頗旋藻对Ａｓ具有定的富集作用的吸附、，然而关于爆旋藻对Ａ吸收及Ａｓ的代谢过程尚未进行解释。基于前述文献的分析，可知摄旋藻可Ｗ通过表面吸附和跑内吸收的作用宮集培养基中的Ａｓ，且培养基中Ｐ的浓度还会影响藻体对Ａｓ吸收巧转化。因此本文对螺旋藻吸附和吸收的Ａｓ进行区分，并研究Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ积累与代谢的影响，Ｗ期为螺旋藻生产养殖中Ａｓ汚染控制提供理论依据。１．６研究内容研巧内容包括Ｗ下两个方面；一（１）在实验室条件下，待塚旋藻生长至对数期，设置系列不同浓度的Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｆｌ）处理藻体，检测嫁旋藻Ａｓ吸附量、吸收虽及胞内Ａｓ的存在形态，研巧螺旋藻对Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）的吸附、吸收和转化特性。（２）首先设置不同Ｐ浓度处理爆旋藻，比较Ｐ浓度对爆旋藻生物里、藻胆蛋白、叶绿素ａ含量的影响。，确定不影响藻体生长的Ｐ浓度在螺旋藻生长未受影响的前提下，巧置Ａｓ（Ｖ）、处理，分析比较不同Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ（Ｖ、Ａｓ（ｍ））积累与代谢的影响。１．７研究目的和意义１．７．１研巧目的（１）明确不同Ｐ浓度对爆旋藻生物量、藻胆蛋白等生理指标的影响。（２）明确不同Ｐ浓度条件下螺旋藻Ａｓ（Ｖ）和Ａｓ（ｍ）吸附、吸收及胞內形态的变化。（３）为螺旋藻品质Ａｓ污染控制的Ｐ素营养提出建议。１１ 不同巧浓度对ｇ旋藻神吸附、吸收及转化的巧巧研充１．７．２研究患义螺旋藻营养价值髙，富含蛋白质、多糖、不饱和脂肪酸、维生素、矿物质等多种营养成分，且易于被人体消化吸收，近年来被广泛用于保健食品、医药和生物工程等领域。为应对爆旋藻神汚染，本研究对螺旋藻吸附和吸收的Ａｓ进行区分，并分析外源Ｐ营养的调节对嫁旋藻对神的富集和代谢的影咱，Ｗ期降低藻体积累Ａｓ含畳。这对于保障揉旋藻产品的品质安全、阻断有害巧形态在食物链中的传递、降低神对人体健康的威胁具有十分重要的意义。１．８技术路线预试验：不同Ｐ浓度对據旋藻生长的影巧（生物里、巧胆蛋白、叶绿巧含貴拥定），ｒ一ｒａ试验：不同Ａｓ（ｖｙＡｓ（）浓度试验二：不同Ｐ浓度对塚旋巧对揉旋藻生长、Ａｓ吸附、吸收Ａｓ（Ｖ）／Ａｓ（ｍ）积累、代谢的影响和转化ｎ的影响１ｒｙｒＩ［Ａ物量测ｇ藻体吸附、吸收的藻胞内、培养基Ａｓ含量测定中Ａｓ形态测定ＸＹ￡分析不同磯浓度对螺旋藻神吸附、吸收及转化的影响１２ 第二章不同ｐ浓度对螺旋藻生及吸附、吸收和转化神酸盐的影响第二章不同Ｐ浓度对螺旋藻生长《及吸附、吸收和转化神酸盐的影响一螺旋藻（的／化７０）是种光合自养型蓝藻，因其含有丰富的蛋白质却、多种维生素，２、碳水化合物、藻多糖、不饱和脂肪酸和微量元素等物质（胡海燕等０１２；许文－－一，），二（，２）涛等２００９被联合国粮农组织誉为Ｉ世纪最优秀的食品胡鸿钩００３。螺一一旋藻作为种高蛋白的绿色天然保健品，其品质近年来也成为国内外关注的热点之。例如，２０１２年国家食品药品监督管理局发现市场上某些品牌的螺旋藻保健品存在铅和神超标的情况。类似地，民ｉｃｈｍｏｎｄ（２０１３）报道了来源于墨西哥和乍得当地的两株螺－－ｌｌ２？？Ａ１ｍ，ＡＮＶ旋藻中神含量分别为．９ｍｇｋｇ、．８ｇｋｇ超过了己西圈家卫生监测机构（ＩＳ）和目前全世界最大的食用螺旋藻农场ＥａｒｔｈｒｉｓｅＦａｒｍｓ对螺旋藻中神的最大限量１．０－’－ｍｇｋｇ（Ｒｉｃｈｍｏｎｄ，２０１３；Ｍｏｒａｉｓ等，２００９）。神（Ａｓ）在地壳中的丰度在所有元素中排列第２０位，其毒性被列为Ｉ类致癌物（Ｏｒｅｍｌａｎｄ＆Ｓｔｏｌｚ，２００３），长期接触Ａｓ污染会导致细胞调亡，还能诱发肝癌、皮肤癌、肺癌等疾病（Ａｂｅｒｎａｔｈｙ等，１９９９）。在自然水体中，Ａｓ主要Ｗ神酸盐（Ａｓ（Ｖ））和亚神酸盐（ＡｓＩＩＩ）的形态存在（李妍丽和柯林，２０１２）。随着我国经济社会的快（），矿山开采，速发展、金属冶炼、农药施用等工农业活动的不合理排放造成了大量含神化合物进入环境并随河流进入水体。近年来，Ａｓ大范围扩散到地表、地下水及饮－ｉ，Ｌ，己有报道表明，受污染的地下水中Ａｓ含量高达５０００ｉ（Ｌｅｖ等，２００５）用水中＾ｇｙ。如果养殖水体遭受Ａｓ污染，将对螺旋藻保健品的品质安全产生严重威胁。例如王志忠等（２０１２）研究发现鄂尔多斯碱湖純顶螺旋藻粉中的Ａｓ主要来源于螺旋藻的养殖用水，，且在养殖过程中随着养殖用水和原料的添加藻体富集的Ａｓ越来越多。在原核生物中，Ａｓｎｉ通过水通道被吸收或细胞膜渗透进入细胞（张兵等，，２０１１）（）ＡｓＶ的吸收则是通过稱酸盐通道进入细胞，然后被神酸盐还原酶还原成Ａｓｎｉ外排（）（）或储存在液泡中，ＡｓＵ巧可在甲基转移酶的作用下转化成毒性较小的有机巧，从而达一Ａ（Ｐ），到神解毒的作用（Ｑ，２００６）。作为螺旋藻的必需元素之ｓｉｎ等磯与同族，一化学性质相似，两者会竞争与细胞结合的同位点，从而调控神酸盐对细胞的毒性效应（Ｋｎａｕｅｒ等１９９９）。研究表明，胞外的Ｐ浓度对微藻Ａｓ，的富集有着至关重要的作用，增加Ｐ的浓度会抑制藻类对Ａｓ的吸收和积累。李宝洁（２０１２）发现，小球藻ｉ（ＣＷｏｒｅ航ＴＶＭ哈加Ｓ）在１、１０、３０ｘｍｏＭ／Ａｓ处理下，其细胞的总Ａｓ含量随着Ｐ浓）度的降低呈现增加趋势Ｗａｎ等（２０１４）研究结果表明，莱茵衣藻（ＣＷｏＴｗ？ｗｏｎａｓ；ｇｙ沈１３ 不同礎浓度对螺旋藻神吸附、吸收及转化的影响研究ｒｅｍ＆ｗ加７）在缺Ｐ条件下细胞内积累的Ａｓ含量最高，在正常Ｐ营养时积累最少。因此，可，随着螺旋藻培养时间的延长，培养基中的憐酸盐含量降低能会促进螺旋藻对Ａｓ的吸收，增加螺旋藻Ａｓ污染风险。目前国内外对螺旋藻Ａｓ污染的研究主要集中在藻体、藻粉Ａｓ含量的检测，Ｗ及利用藻体去除水体中的Ａｓ等方面。例如王亚等（２０１４）、陈辉等（２０１３）和Ｍｏｒａｉｓ等（２００９）利用原子巧光光谱法、原子吸收光谱法等不同方法检测了螺旋藻中Ａｓ含量。但是，有关螺旋藻对Ａｓ的转化、Ｗ及培养基中Ｐ营养水平对螺旋藻Ａｓ代谢的，本试验Ｗ纯顶螺旋藻（毎化为研巧对象影响仍鲜有报道。因此，通过设置不同Ａｓ（Ｖ）和Ｐ浓度处理，测定螺旋藻吸附和吸收的Ａｓ，研究Ｐ浓度对螺旋藻ＡｓＶ积累和形态转化的影响，并分析磯酸盐缓冲液（ＰｈｏｓｈａｔｅＢｕｆｅｒｅｄＳａｌｉｎｅ，ＰＢＳ）（）ｐ降低藻体Ａｓ富集的效果，Ｗ期为螺旋藻工业化生产中神污染的控制提供理论依据和实践指导。２．１材料与方法２丄１试验材料及培养条件純顶螺旋藻（却如／蜘献）藻种购自中国科学院海洋研究所，本实验室保种、－－２－１培养，藻种形态如图１所示。采用Ｚａｒｒｏｕｋ培养基（表２和表２２，Ｈ调节至９．０，ｐ°１２１１：高压蒸汽灭菌３〇１１１１１１）（２３１］：〇化，１９６６），培养温度（３０±１）Ｃ，光照强度为￣４摇匀３次３５０００００ｌｕｘ，光照明暗比１２ｈ：１２ｈ，培养期间每天定时。［吗ＩＨｍｕ－图２１螺旋藻光学显微镜Ｂ）（Ａ）和扫描电镜（图片．＊－Ｆｉ．２１ｔｉｃａｉｃａｌｉｉｚｒｗ巧Ｗ口）／幻ｆｅ化ＳＯｌＭｃｒｏｓｃｏｅＡａｎｄＳｎｎｉｎｇＥｅｃｔｒｏ打ＭｃｒｏｓｃｏｅＢｃｔｕｒｅｓｏｆＷｇｐｐ（）成／ｐ（）ｐ１４ 第二巧不同ｐ巧度对ｇ巧藻生长抖及吸附、吸化巧巧化巧巧法的巧巧表２４Ｚａｎｏｕｋ培养基组分Ｔａｂ－ｌｅ２１Ｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆ２１ａｒｒｏｕｋｍｅｄｉｕｍ成分浓度成分浓度＇’，＾Ｃｏ－ｎｑｊｏｎｅｎｔＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇＬＣｏｍｐｏｎｅｎｔＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｃＭｉｍＬＬ（）（）ＮａＨＣＱｊ１６．８Ａｓ１ＮａＮ〇２．５１３成ＮａＣｌ１ＫＨＰＯ０．５２４Ｋ２ＳＯ４１Ｍ０－７Ｈ０〇三换４２ＣａＣＵ．７Ｈ〇０２．０４Ｆ〇－７Ｈ〇０ｅＳ．０１４２ＥＤＴＡ０＾表２－２Ａ巧Ｂ微《溶巧ｓｓ的成分与用量Ｔａｂ－ｔｓｉｉｉｌｅ２２Ｔｈｅａｍｏｕｎａｎｄｒｏｏｒｔｉｏｎｓｏｆａｂｓｏｒｂｅｄａｎｄａｄｓｃ＾ｂｅｄＡｓＳｒｕｌｎａｌａｔｅｎｓｓｐｐｐｐＡｓＢｅ成分浓度成分浓度＇Ｃ＾，ｏｍｐｏｎｅｎｔＣｏｎｃｅｎｔｒａｄｏｎ（ｇＬ）ＣｏｍｐｏｎｅｎｔＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（巧Ｉ／）Ｈ３ＢＯ３２．８６ＮＨ４ＶＯ３２２．９ＭｎＣｌｒ４战Ｏ１．８ＮｉＳＯｒＴＨＯ４７．８ｊＺｎＳ〇－７Ｈ〇０２２ＮａＷ〇１７９４２４．Ｍ０Ｏ３０．０１Ｔｉ（Ｓ〇４）２４０？ＣｕＳ〇？知〇０ＣｏＮ〇畑〇４４２（３）之２＾＾２丄２试验设计２丄２．１不同Ｐ巧度对螺旋藻生长的影响螺旋藻生长致機觀，过撤藻体，用无Ｆ培养液冲洗３遍，接种于无Ｆ培养基中，－ｉＯＤ约为〇三．初始ｓｅｔａｎ。之后分别取ｌＯＯｍＬ藻液于２５０血锥形瓶中，加入不同体积的５０ｇＬ－ｉＫＨＰＯＰ浓度Ｐ．Ｌ２４母液，使藻液最终分别为：Ｐ正（８８．９ｍｇ）、１／１犯正、１／２５Ｐ正、１／５０Ｐ正、１／１００Ｐ正、１／２００Ｐ正。每个处理设置３各平折处理４ｄ后用快速滤纸过滤收获藻体，５、１５ 不同巧浓度对巧旋藻神吸附、吸收及转化的影响研巧１５、５０ｍＬ藻液分别用ａ含量、藻胆蛋白含量和生物量于测定螺旋藻的叶绿素。２．１．２．２不同巧度Ａｓ（Ｖ）处理下曝旋藻对Ａｓ的富集将生长至对数期的螺旋藻接种于１Ｌ锥形瓶中，接种初始ＯＤｓｆｉＯｎｍ约为０．２。之后２００ｍＬ藻液Ｌ锥，０、４００５０００分别取于５００ｍ形瓶中加入１００、２００、３０、、６０阵的－ｉ００．Ｖ１ｍＬＡｓ母液（ＮａｓＡｓＣＶ１２，藻液最终ＡｓＶ浓度分别为５０、１００、ｇ（）战０配制）（）－１１５０、２００、２５０、３００峭七。每个处理设置６个平行，并不加ＡｓＶ的藻液作为空（）７３个１－８白对照。处理ｄ后用快速滤纸过滤收获藻体，在收获时平行直接用采用ＢｅｔａＬＤｐｌｕｓ冷冻干燥机进行干燥，Ｗ测定其富集的总Ａｓ含量和生物量；另外３个平行用－ｉ．＝０．１ｍｏｌＬｐＢＳ（ｐＨ７．０）清洗（每次５ｍＬ冲洗３次），去除藻细胞表面吸附的Ａｓ（王亚等，２０１３），再经冷冻干燥后测定藻内吸收的Ａｓ含量及其形态，富集的总Ａｓ含量减去胞内吸收的Ａｓ即为螺旋藻表面吸附的Ａｓ含量。本研究预实验结果表明，ＰＢＳ不会对藻细胞的完整性产生影响。２丄２．３不同Ｐ巧度对爆旋藻Ａｓ（Ｖ）吸附、吸收、转化的影响螺旋藻生长至对数期，过滤收集藻体，用无Ｐ培养液冲洗３遍，接种于无Ｐ培养基中饥饿处理Ｉｄ后，再接种于４种不同Ｐ供应水平（２丄２，本试验选用．１结果表明的４种Ｐ浓度不会对螺旋藻生长产生影响）的培养基中：Ｐｉ、１／１０Ｐｉ、１／２５ＰｊＥ、－－ｉｉｙ－－ＳＯＰ正（正常Ｚａｉｒｏｕｋ培养基中＆阻〇４含量为０．５ｇＬ，即８８．９ｍｇＰＬ）。之后从’一ｉ２００，ｍＬ５００ｍＬ同瓶藻液中分别取藻液于锥形瓶中，加入６０阵１０００ｍｇＬＡｓＶ（）－ｉ母液，使不同Ｐ浓度水平藻液的最终Ａｓ（Ｖ）浓度均为３００惦Ｌ，处理７ｄ后用快速滤纸过滤收获藻体．２。，剩余步骤同２丄２２．１．３测定项目与方法２丄３生物呈測定．１螺旋藻经Ｐ、Ａｓ（Ｖ）处理７ｄ后，用快速滤纸过滤收集藻体，并冷冻干燥２４ｈ。滤纸和藻体的质量与过滤前滤纸的质量之差即为螺旋藻的生物量。同时将未过滤藻液的滤纸同批次冷冻干燥，避免滤纸水分造成的误差。１６ 第二章不同ｐ浓度对孩旋藻生长ｗ及吸附、吸收和转化巧酸盐的影响２丄３．２藻胆蛋白的测定－ｉ，＝取１５ｍＬ藻液过滤收集藻体于离也管中５ｍ．１ｍｏ７ＰＢＳ，，加入１Ｌ００ｌＬ（ｐＨ．０）’－ｉ－８０００放入２０Ｃ冰箱反复冻融６次Ｗ上，然后ｒｍｉｎ离也１０ｍｉｎ，收集上清液定容到’￥－５０１１３１容量瓶中，４（：静置２０姑１１后，１＾？８８为空白，１；５３００紫外分光光度计测２、ｎｍ３－２０其在波长％ｍｎ６２０ｎｍ、６５２处的吸光值（ＳＮ／Ｔ１１１２００２；张静，１１），按下公式计算不同色素蛋白的爸量：－ｉ—Ｘ．＝ｘＡ０８９ｘ藻篮蛋白（皿ｇｍＬ）０．１８７＾Ｏｒｕｎ．０Ａ＾５２ｎｍ－ｉ＝—Ｙ．９６ｘ别藻藍蛋白ｍｍＬ０．１ｘＡ＾５２ｎｍ０．０４１Ａ＾２〇ｍ？（ｇ）－ｉ＝——．０．１０４ｘＡ０藻红蛋白Ｚ（ｍｇｍＬ）５６２ｎｍ．２５３Ｘ０．０８８Ｙ藻胆蛋白＝Ｘ＋Ｙ＋Ｚ２丄３．３叶绿素的測定一叶绿素含量的测定参考了鲍亦瑶（２０１２）的方法，定的修改并进行，具体步骤’为－２０Ｃ冰箱反复练融６次：取５ｍＬ藻液过滤收集藻体，用纯水清洗两遍后，放入Ｗ上入等体积的９０％丙丽浸泡过夜提取、，加，离屯后收集上清液，Ｗ９０％丙丽为空白，－５３００３０ＵＶ紫外分光光度计测其在波长６ｎｉｎ、６４７ｍｎ、６６４ｎｍ、７５０ｎｍ处的吸光值，—１，按，ｍ；（＾下公式计算叶绿素浓度（ＱｈａＬ）ｉｇ———＿＿—１１ＡｘＣ１－５Ａ〇－〇８ｘＡｃｈ．８＾Ａ４ＡＡｉａ（＾６４ｎｍｖｓｏｎｍ）＾４７ｎｎｉｙｓｏｎｍ）＾３〇ｎｉｎｙｓｏｎｍ（（）－ｉ，样品叶绿素浓度与生物量的比值即为叶绿素含量（Ｃｈｌａ，ｍｇ）。［］ｇ２丄３４藻体Ａｓ的测定．总化〇５２５ｍＬ将冷冻干燥后的螺旋藻样磨碎，称量约ｇ样品于玻璃消煮管中，加入２ｍＬ体积比为４：１的ＨＮ０３：ＨＣ１０４混合酸，静置过夜（王亚等，２０１４）。采用ＬａｂＴｅｃｈＥＤ５４型智能样品消解仪（莱伯泰科有限公司）电热消解至溶液澄清透明，打开消煮０。管塞进行赶酸至消煮管内剩下．２ｍＬ左右液体时，取出满煮管静置冷却用去离子水润洗移至１０ｍＬ容量瓶中，加０．５ｍＬ浓盐酸（优级纯）和２ｍＬ５％硫脈＋５％抗坏－血酸混合溶液后定容（－ＡＦＳ。采用氨化物发生双道原子英光光度计ＨＧ，北京吉天仪器有限公司）测定其总Ａｓ含量，Ｗ同批次藻样加标和米粉标准物质（ＳＲＭ１５６８ｂ）°－３ｒ１．２相同步骤消解进行加标回收．２４／ｔ０７７％ＳＲＭ１５６８ｂ回收，藻样加标回收率为９，率为９５．０９％。１７ 不同稱浓度对操旋藻巧吸附、吸收及转化的影咱研巧２丄３．５Ａｓ形态提取及测定准确称取０．０５ｇ干样于１０血离也管中，加入３ｍＬ０．２８ＨＮ０３进行提取，‘Ｃ超９０声１０ｍｉｎ后１４０００ｇ离屯１０ｍｉｎ，重复提取３次（Ｓｈｉ等，２０１３），上清液合并后定容至１０ｍＬ。定容后的样品及收集的培养液用０．２２叫ｎ滤膜过滤，滤液过阴－－Ｘ－离子交换柱（ＨａｍｉｌｔｏｎＰＲＰ１００），采用高效液相氨化物发生原子巧光ＬＣ－ＨＧ－ＡＦＳ）Ａｓｓ（ＨＰ，北京吉天仪器有限公司测定螺旋藻中的形态。同时设置Ａｍ、（）一甲基神（ＭＭＡ）、二甲基神（ＤＭＡ）、Ａｓ（Ｖ）的加标回收实验，神形态提取率为￣３４３％９４．７３％１．２。检测条件如下（王亚等，２０１４）：流动相为稱酸氨二Ｈ＝锭（６进样体积１００阵；５．１），等度洗脱载流％盐酸；还原剂：１．５％棚氨化钟ｐ：；＋１０．５％氨氧化钟；屏蔽气；７００；载气：Ａｔ，６００光电倍增管电２７０Ｖ：灯电流：１００ｍＡ。压；２丄４数据处理所有数据均采用３次重复的平均值±标准偏差来表示。运用Ｅｘｃｅｌ２０１０和ＳＰＳＳ２０统计分析软件进行数据处理与分析，用ＳｉｇｍａＰｌｏｔｌ２．５作图。采用单因素方差分析（ｅ－ｗａＡＮＯＶＡＴｕｋ巧检验进行差异显著性分析（＜Ｏｎｙ）和ｐ０．０５）。２．２结果与分析２１Ｐ浓度对．２．不同螺旋藻生长的影响－正常Ｐ营养比乾１／１０由表２３可知，与、１／２５、１／５０Ｐ正处理对螺旋藻的生物量、＞０ｌ．０５）１／ＯＯＰ理时藻胆蛋白、叶绿素含量没有显著影响（护；ｓ处，生物量稍有下降但变化不显著，其藻胆蛋白含量显著（／７＜０．０５）下降，而叶绿素含量显著上升；当Ｐ浓度为１／２００ＰＳ时，螺旋藻的生物量和藻胆蛋白含量均显著降低，叶绿素含量也比对照。＾？）＾时高因此，可１＾１看出当？浓度降低至１／１００Ｐｓ、１／２００？１时螺旋藻的生长受到显著彭响。１８ 第二章不同ｐ浓度对爆旋藻生长抖及吸附、吸收和转化神敌盐的影响表２－３不同Ｐ巧度下爆旋藻生物量、藻胆蛋白、计绿素含量Ｔａｂｅ－２３ＴｅａｍｏｕｎｔｓａｎｄｒｏｏｉｏｎｓｏｆａｂｓｏｒｂｅｄａｎｄａｄｓｏｒｂｅｄＡｓｂＳｐｉｒｕｌｉｎａｐｌａｔｅｎｓｉｓｌｈｒｔｐｐｙ－ｉ—ｉ－Ｐ处理５０ｍ－ＪＬ藻液生物量（ｍｇ）藻胆蛋白含量（ｍｇｇ）叶绿素含量（ｍｇｇ）ＰｒｅａｔｍｅｎｔｓＢｉｏｍａｓｓＰｈｃｏｂｉｌｉｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔＣｈｌａｔｙｐ［］Ｐ５±１．０６ａ６２８．２１４±ｉＥ巧．０．狂７３２ａ．０．０５ｃ１／１ＯＰＩ巧．２０±ｌ．％ａ６１．２壯０．４５ａ２．０４±０．１２ｃ７３．３０ｔ０６２．２．３３２．０＆ｔ０．０１１／２评正．７０ａ６±９ａｃ：ｔｌ４７±４２１１巧ＯＰ７３．ｎ．５３ａ６２．．０５ａ．狂０．１６ｃＩＥ１±１／１Ｐ７１．７社．２０ａ４３．３８７．４３ｂ３．４虹０．２２ａＯＯＩＥ１／２００Ｐ正６６．９７±２．８１ｂ３７虹１２８ｆｃ〇．７３．０ｂ．ｆｃ．５０ｂ注：不同字母表示不同处理间差异显著（ｐ＜０．０５）。下同ｎ＜０．０．Ｎｏｈ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔｌｅｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗｇ（ｐ巧，ｔ２．２．２ＡｓＶ对螺旋藻生物量的影响（）￣ＬＡ２３７４．２ｍ由螺旋藻干重的结果可知（表２），２００ｍｓ处理时生物量为藻液在无ｇ，加入不同浓度ＡｓＶ处理后，与对照相比螺旋藻的生物量均有所下降。但单因素方差（）分析结果表明，在本实验设置的ＡｓＶ处理范围内，螺旋藻生物量之间的差异均不显（）—１Ｖ？著。由此可说明培养基中Ａｓ浓度在０３００帖Ｌ时，螺旋藻的生长趋势未受到影（）响。２．２．３螺旋藻对Ａｓ的富集２．２．３．１不同Ａｓ（Ｖ）巧度处理下曝旋藻对Ａｓ的富集螺旋藻在不同浓度Ａｓ（Ｖ）处理７ｄ后，藻体对Ａｓ的富集量随着Ａｓ（Ｖ）处理浓度的－Ｉ？＾￣３００Ｌ升高呈増加趋势（表２）。与无Ａｓ处理的螺旋藻空白对照相比，５０蜡Ａｓ（Ｖ）Ａ－１ｓ的富集ＡｓＶ１５０七，处理能显著提高螺旋藻对。当（）处理浓度为惦时螺旋藻富集－ｉＡ，Ａ的总ｓ含量为１．００６皿ｇｋｇ，且ｓ形态全部为Ａｓ（Ｖ），超过我国保健（功能）食品－－１１‘（１０ｍｋｇ）４０－１ｓ神的限量．ｇ（ＧＢ１６７９９７）。当培养基中Ａ（Ｖ）浓度为３００帖Ｌ时，—１Ａｓ含量最高，藻体富集的总（ｌ．：５６９ｍｇｋｇ），Ａｓ形态也均为Ａｓ（Ｖ）。１９ 不同巧浓度对巧旋藻神吸附、吸收及转化的影巧研巧—ｉ２＾￣’ＡＶ从螺旋藻吸收的Ａｓ含量可Ｗ看出（表）５０１００Ｌｓ处理时，，在帖（）藻１ＡＶ５０‘细胞几乎不吸收Ａｓ（Ｖ）；当ｓ（）浓度増加到１雌１／时，藻细胞内检测到少量的－１１Ａｓ‘，含量为０．００９ｍｋＡｓＶ３００１／ｇｇ；当（）处理浓度达到帖时，藻体吸收的Ａｓ含量－ｉ，ｋ显著増加至０，Ａｓ存在形态经检测均为ＡｓＶ。随着Ａｓ处理水平的提．０７６ｍｇｇＶ）（）（－－ｉｉ’’ｋｋ￣高，螺旋藻细胞表面吸附的Ａｓ由０．２３５ｍｇｇ显著増加至１．４９３ｍｇｇ（表２４），吸附的Ａｓ所占比例均在９５％Ｗ上。该结果表明，在本研究条件下，螺旋藻对Ａｓ的富集可能Ｗ吸附为主，只有少量的Ａｓ被藻体吸收（＜４．８４％）。表２￣４巧旋藻吸附和吸收的神含Ｓ及比例Ｔｂ－併Ｍｉｓａｌｅ２４ＴｈｅａｍｏｕｎｔｓａｎｄｒｏｏｒｔｉｏｎｓｏｆａｂｓｏｒｂｅｄａｎｄａｄｓｏｒｂｅｄＡｓｂｚｒｗ化。。／细ｐｐｙ却少Ａｓ（Ｖ）处理浓度生物量富集的神吸收的神（比例／％）吸附的神（比例／％）＇＇ｍ－＊ｍ－＊ＡｓＶｔｒｅａｔｍｅｎｔＢｉｏｍａｓｓＡｃｃｕｍｕｌａｔｅｄＡｓＡｂｓｏｒｂｅｄＡｓｍｋＡｄｓｏｉｂｅｄＡｓｋｇ（）（ｇ）（ｇｇ）（ｇ）＿＇ｉ＊ｃｏｎｃｅｎ－ｍ－ｔｒａｔｉｏｎｓｉＬｋＰｒｏｏｒｔｉｏｎＰｒｏｏｒｔｉｏｎ（（）（）（ｆｇ）ｇｇｐｐ）０２３７－．２±６．８２ａＮＤＮＤ±５０２２８．４６．７０ａ０Ｊ３５±０．００６ｅＮＤ．（Ｕ３５±０００６ｅ００＂）±０１００２３５．沿王８０ａ０．５３９．０６８ｄＮＤ０．５３肚０．０６８ｄ（１００）１５０２３１．５±８．４３ａ１．００６ｉ０．０２８ｃ０．００９ｔ０．００３ｃ０．８９化９９７±０．０２２ｃ９９．１１（）（）±２ｔ０±０２００２３５．５．３０ａ１．０４扯０．０１６ｃ０．０１〇．００５ｃ．９．０３３．０１６ｃ９．０４（０句１＾）２５０２３４．６±７．６５ａ１．３６７±０．０３沉０．０２５±０．００２ｂ１．拍１．３４２±０．０３２ｂ９８．１７（（））３００２３３．狂５．１１ａ１．５６９ｉ〇．１２２ａ０．０７虹０．００７ａ４乂４１．４９３±０．０８７ａ５．１６（）＾）￣注：ＮＤ表示未检出或低于方法检出限。Ｎｏｔ：ｅ：ＮＤｍｅａｎｓｎｏｔｄｅｔｅｃｔｅｄｏｒｂｅｌｏｗ化ｅｍｅｔｈｏｄｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔ．２２３２Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ富集的影响．．不同－ｉ，２－２可知３０〇ＬＡｓＶ处理条件下Ｐ从图，在ｎｇ（），随着培养基中浓度的降低，螺－ｉ，旋藻富集的Ａｓ含量逐渐増加。在正常Ｐ，螺旋藻富集的Ａｓ１．７６６ｍｋ条件下含量为ｇｇ；当Ｐ浓度降低至１／２５、１巧０Ｐｉｅ时，螺旋藻积累的总Ａｓ含量分别显著増加至２．６２４、－２ｉ．８２２ｍｇ＊ｇ，表明培养基中Ｐ的浓度对螺旋藻Ａｓ富集有重要影响。这主要是由于Ｐ浓度为２５ＯＰ－在培养基１／、ｌ＾条件下，藻体吸收的Ａｓ含量増加所致（图２３）。螺ｉＥ旋藻胞内总Ａｓ含量随培养基中Ｐ浓度的降低而増加，当Ｐ浓度降低至１／ｌＯＰｉ时，藻－ｉＡｓ４３３，体吸收的含量显著増加到０．ｍｇｋｇ，约为ＰＩ条件下藻体吸收Ａｓ含量的２倍；’乂〇１当？处理浓度为１／２５、１伯０？＾￡时，胞内３含量分别显著増加至６９、１．４５７１１１６韦６。该结果表明，降低培养基Ｐ浓度会促进藻体对Ａｓ的吸收。藻体表面吸附的Ａｓ含量随着培养基中Ｐ浓度的増加整体呈増加趋势，但在兰个低Ｐ７Ｘ平下（１／１０、１／２５、１／５０Ｐ正）藻细胞表－ｉＡＰＡ’面吸附的ｓ之间差异不显蓄在正常供应条件下吸附的ｓ含量显著増至１．６８４ｍｇｋ。ｇ２０ 第二章不同ｐ巧度对巧旋藻生长ｗ及吸附、吸收和转化巧酸盐的巧响３０？１■ｂＩ香ｆＩ．内金１．５徊潭巧－１．０－－５＇－１＊￣￣Ｉ１￣￣￣￣Ｉ１￣￣￣Ｉ￣￣０ＩＩＩＩ．０Ｐ１／１０Ｐ１／２５１巧ＯＰ正ｊＥ正Ｐ处理團２－２不同巧巧度处理对巧旋藻神富集的影响＇－ＷＦｉｇ？２２ＥｆｅｃｔｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔＰｔｒｅａｔｍｅ打ｔｏｎ化Ｊａｉｓｅｎｉｃｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ勾注：图中不同小写字母表示各化理间差异显著Ｋ０．０５）。（／＜０ｏｔｅ：ｅｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅ巧ｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆＴｅｒｅｎｃｅ７．０ａｍｏｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．ＮＤｉｆｆｒｇ任巧ｇｗ１＾吸收的巧今ＣＺＩ］吸附的巧＊ｍ？Ｂｎｉｉｒ１：：ｌｉｌｌｉｌｌＩＩＩＩＩＰ１／１０ＰＩＣＳＰ１巧ＯＰＥｊＥｅｊｊｐ化理２－３不同巧处理对巧旋藻神吸前图、吸收的影响－ＥｆａｒｎｃｓｏｒａｎｓｏｒｏｎｏｆＦｉｇ．２３ｅｃｔｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔＰｔ忙ａｔｍｅｎｔｓｏｎｓｅｉａｄｐｔｉｏｎｄａｂｐｔｉｚｒｗ／ｍａ坏．注：不同小写字母表示不同巧处理间每旋藻吸收巧的差异显著００５）不同大写字母表示各处理间揉旋藻吸附（／Ｋ，７＜０．０５）巧的差异显著（／。Ｎｏｔｅ．ｉｒｉａｉ：Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈｅｓｉｎｉｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ００５）ｏｆａｂｓｏｒｂｅｄＡｓｉｎＳｐｕｌｎａｌｔｅｎｓｓａｎｄｇ＾（＾ｐ’ｈａＫ０．ｉｎ＞ｕ如ｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆＴｃｒｅｎｔｃｌｌｅｔｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈｅ化ｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄ近ｅｒｅｎｃｅ／０５ｏｆａｄｓｏｒｂｅｄＡｓ＆２／ｉｎａ＾（）ｐｖａｒｔ．ｉｏｕｓＰｔｒｅａｔｍｅｎｓ２１ 不同巧浓度对巧旋藻巧吸附、吸收及转化的影咱研巧２．２．４Ｐ营养条件对螺旋藻胞内Ａｓ形态的影响在四种不同Ｐ供应水平下，螺旋藻胞内Ａｓ形态均ＷＡｓＶ为主（图２＾），所占（）＂一比例为５６．１２／？＾４００％。在培养基？浓度为？正和１／１０？正时，藻细胞内只有八５〇〇种’ｉＰ的４５ｍ’ｋｓ１／２５时ｍ．０，且形态，胞内Ａｓ含量仅０在Ａ；当Ｐ浓度降低为正常（）ｇｇ培养基中未检测到Ａｓ（ｍ）形态；然而当Ｐ浓度降低至１／５０ＰＩ时，螺旋藻吸收的Ａｓ增ｊ＇ｉ’’加．１３５ｍｇｋｇＡｓｍ和０．５４４ｍｋＤＭＡ，同时在培养液中检测，且部分转化成０（）ｇｇｍ－１的存在．６Ｌ。到Ａｓ（，含量为１９该实验结果表明，培养基中Ｐ浓度的降低会促）階进螺旋藻对Ａｓ（Ｖ）的吸收、还原、甲基化和Ａｓ（ｍ）的外排。Ｌ６１－１４Ａｓｉｏｉ）Ｉ１ＴｚｒｘＶＳｉＡＫ－ＩＩＩ＿２Ａｓ（Ｖ）暑－ｉＩ１＊：。ｎＩ＾——０＊Ｉ＾．０ＴＮＮＰ１／１０Ｐ１任ＳＰ１巧ＯＰｊＥｊＥｊＥｊＥＰ处理图２￣４不同游处理对摄旋藻胞内神形态的影响－ｉＳｉｆｎＦｉ２４ＡｒｓｅｎｉｃｓｅｃｅｓｃｏｎｔｅｎｔｉｎｉｒｕｌｉｎａｕｎｄｅｒｄｆｅｒｅｎｔＰｔｒｅａｔｍｅｔｓｇ．ｐｐ２．３讨论Ｐ一／１、１／２５、是螺旋藻必须的营养元素之，试验结果表明，当Ｐ浓度降低至１０１／５０时对螺旋藻的生长没有显著影响，其生物量及营养成分藻胆蛋白和叶绿素的含量＾变化不大。送可能主要由于藻细胞具有储存稱酸盐的功能，藻细胞可（＾＞吸收过量的磯酸盐ｙＪｌ多聚磯酸盐的形成储存在体内，当培养液中Ｐ充足时，藻体利用培养液中的Ｐ，藻细胞可维持细胞的正常生长，不消耗体内储存的Ｐ；当培养液中Ｐ缺乏时！＾利用ｅｎｔａｌ等８８）。１／１００、１／２００Ｐ正时，储存的Ｐ来维持自身的生长需要（Ｂ，１９当Ｐ降低至螺旋藻的藻胆蛋白含量显著减少，送可能是由于藻体生长和繁殖不断的消耗培养液和２２ 第二章不同ｐ浓度对爆旋藻生长ｗ及吸附、吸收和转化巧度盐的巧巧体内贬存的礎酸盐又得不到外界？的补充，１＾＾１至于体内核巧酸、Ａ＾ｐ及核算等含ｐ有机物合成受到影响，从而抑制了蛋白质的合成（施永宁和陈善坤，１９８９）。而与Ｐ正相比，１／１００、１／２００ＰＩ时藻体的叶绿素含量升髙，可能由于死ｔ：的藻体将体内的Ｐ释，但培养基中Ｐ与螺旋藻叶绿素含放到培养基中，供给活藻细胞生长所需合成叶绿素一量变化之间的关系仍需进步研巧。Ａ一水生生物在适应ｓ污染水体的过程中，形成了定的Ａｓ代谢机制。ＡｓＶ可Ｗ（）通过磯酸盐转运通道进入浮游植物细胞，被神酸盐还原酶还原成Ａｓｍ）（王静，２０１２），（Ａｓｆｌ）与胞内的谷脱甘肤（ＧＳＨ）或植物络合素（ＰＣ）整合储存在液泡中，或者直接（通过膜蛋白排出（张思宇等，２０１３），也可Ｗ甲基化形成毒性较小的非挥发性甲基神化物再排出胞外（李宝洁，２０１２）。Ｐ和Ａｓ为同族元素，由于两者的化学性质相似，一通道进入生物体内。因此Ｐ对藻类Ａｓｓ通过同，环境中的（Ｖ的积累Ｗ及胞内Ａ形）态的转化有着至关重要的作用。本试验结果表明，不同浓度Ａｓ（Ｖ）对螺旋藻千重没有产生显著影响。王志忠等＇，２０－（１４）研究结果也发现，螺旋藻培养液中Ａｓ浓度在００．３２ｍｇＩ／，随着Ａｓ浓度的増加，螺旋藻的生长没有显著变化。原因可能是憐和Ａｓ（Ｖ）均通过磯酸盐通道进入ｉ一细胞，ＡｓＡＶ，而培养基中Ｐ浓度较高（８８．９ｍｇＩ／），与ＣＶ）竞争同通道，导致ｓ较（）难进入藻体造成胁迫，绝大部分的Ａｓ都吸附在藻体表面。王静等（２０１２）研究发现，－－－Ｉｉｉ’ＰＬ．ＬＬＡ２０ｄ在缺条件下，１００、Ｉｍ、ｌＯｍｓＶ惦ｇｇ（）处理铜绿微囊藻，未对其生长趋势产生影响，，多碟酸体是重金属结合位点主要是由于胞内存在多稱酸体，能富集多种重金属；２０ｄ后胞内踞酸体消耗殆尽，释放憐酸盐的同时释放其结合的重金属离子，表现出ＡｓＶ的毒性。但在本研究中，螺旋藻体内是否也存在相似作用机理（）仍需要进一步探索。￣７４％的藻类螺旋藻细胞壁表面积较大，，含有２４％多糖能提供许多与金属离子结合的活性基团，如幾基、氨基、径基、酵基、酷胺基等（田丹等，２０１１；黄宏霞，￣ｉ，２００６ｓ￣）。有研究表明，螺旋藻培养基中Ａ浓度越高（００．３２ｍｇＬ），藻粉Ａｓ含量越－高Ｖ１（王志忠等，２０１４）。本试验结果显示，当培养基中Ａｓ（）处理浓度从５０帖七増加至３００时，藻体富集的总Ａｓ含量増加了约６惊且当培养基中Ａｓ（Ｖ）浓度为－１１５０胆Ｌ时，藻体富集的Ａｓ含量己超过国家标准限量值。因此，在螺旋藻的生产养殖过程中，应及时监测水体中的Ａｓ浓度。螺旋藻对ＡｓＶ的吸收和累积与培养基中的縣酸盐密切相关（Ｄｕｎｃａｎ等，２０１３）。（）有研巧发现，増加Ｐ浓度可Ｗ抑制小球藻对Ａｓ的吸收和积累（李宝洁，２０１２）。而在－ｉａｒｒｏ’址培养基中Ｐ浓度为８８，本实验中，螺旋藻的Ｚ．９ｍｇＬ导致螺旋藻在Ａｓ（Ｖ）浓度低于１００时吸收Ａｓ较少。随着Ａｓ处理浓度提高，藻体吸收的Ａｓ随之增加，２３ 不同稱浓度对場旋藻神吸附、吸收及转化的影咱研巧但含量均远远低于国家标准，藻体仍将大部分的Ａｓ吸附在细胞表面。通过ＰＢＳ洗脱可Ｗ去除螺旋藻９５％Ｗ上的Ａｓ，清洗效率是王志忠等（２０１２）利用蒸馈水清洗减少藻粉Ａｓ含量方法的２倍。此外，降低培养基中Ｐ浓度有利于藻类对Ａｓ的吸收。Ｚｈａｎｇ’ｉｅｃＡＰ５’等（２０１４）研巧发现，集胞藻（勾ｗｆｗｙｓｆｔａＯ在低（叫ｎｏｌＩ／）条件下培养６ｄ，—１－ｉＡ，Ｐ（２３０藻细胞内总ｓ浓度迅速増至７．９ｍｍｏＩＬ，约为正常ｊｍ〇ｒＬ）营养时藻内｜－－ｉｉ，，Ａｓ浓０７￣０１００ｍＶ．．９ｍｍｏｌＬＬＡｓ处理下度（）的倍。铜绿微裹藻在１ｇ（），在不含憐１－１Ａ７５’酸盐培养基中积累的ｓ含量达到最大值１９．帖古，当磯酸盐含量为１０ｍｇＬ时藻细胞对Ａｓ（Ｖ）的吸收量最小（王静，２０１２）。本研巧中，在正常Ｐ培养基中，螺旋藻１Ａｓ２０２ｍ’ｋＰ浓度降低为吸收的总为０．ｇｇ；当１／２５、１／５０ＰＩ时，藻体吸化的Ａｓ均Ａ－ｉ显著増加到１．３６９、１．４５７ｍｇｇ，证明了胞外Ｐ浓度的降低会促进螺旋藻藻体吸收Ａｓ。且在１／２５低Ｐ供应水平下，螺旋藻胞内的Ａｓ全为无机Ａｓ，其含量己超过国家保健（功能）食品中神的限量标准，该部分Ａｓ被藻细胞吸收进入体内较难去除。因此，，，在螺旋藻养殖生产的过程中，应当注意培养基中Ｐ含量的监测及时添加磯酸盐防止培养液中Ｐ浓度过低导致的螺旋藻Ａｓ含量超标。研巧表明低Ｐ不仅能显著影响藻体对Ａｓ的吸收，还能影响其细胞内Ａｓ的代谢。’－ｌｉ‘５０Ｌ’当ＡｓＶ处理浓度为帖，杜氏盐藻（￡＞？／７〇沁化７ｆｅｒｒｉｏ／ｅｃｔｏ）在３ｍＬ高磯条（）ｇ件下体内９９．７％的神为ＡｓＶ，Ｐ浓度降低到化后，促进体内ＡｓＶ的还原，（）（）ＡｓＩＩＩ）比例升高至％％，未检测到体内Ａｓ向ＤＭＡ、ＭＭＡ等其他Ａｓ形态的转化（１Ｖ（Ｄｕｎｃａｎ等，２０１３）。然而本研究的结果与前人报道有些不同，３００帖１／Ａｓ处理（）螺旋藻７ｄ后，正常Ｐ条件下螺旋藻胞内全为Ａｓ（Ｖ）；１／２５Ｐ正条件下胞内仅３．２８％的ＡｓＡｓＩＩＩ１＾０Ｐ，细胞内９．２４％ｓ转化为）；而正条件下的Ａ转化为Ａｓ（ｍ饼外排到培（－１’Ｌ养基中（１，３７３５％ｅｌｗｅｅｒ（２．６９帖）．的Ａｓ转化为ＤＭＡ储存在体内。Ｈｌｇ等００３）提出，当环境中的Ｐ缺乏时，藻内Ａｓ代谢Ｗ甲基化为主。Ｑ虹等（２００９）研究也表’ＶＡ明，红藻Ｃｙａｎｚ讯炒ｚｏｎｓｐ．５５０８在Ａｓ（）吸收增加后，迅速还原成ｓ田１），随后转化为Ｈ甲基神化物（ＴＭＡＯ）和二甲基神（ＤＭＡｓ（Ｖ））。因此，推测培养基Ｐ浓度的－ｉＡｓＶＰ７８ｍ－降低促进了螺旋藻细胞对吸收、还原和外排，且当浓度降低至１．７Ｌ（）ｇ（Ｕ５０Ｐｉ）时，胞内ＡｓＶ的代谢主要是转化为毒性较弱的ＤＭＡ，从而降低神酸盐（）的毒性。２．４小结Ｐ￣（１）与ｉ营养条件相比Ｐ浓度降低至ｌ／ｌ〇ｙ５〇Ｐ、，ｉＥ时螺旋藻生物量藻胆蛋白和叶绿素含量变化不大；但当Ｐ浓度降低至１／１００、１／２００时，螺旋藻的生长受到显著影响。２４ 第二韋不同Ｐ浓度对《旋藻生长及吸附、吸化和巧化巧度盐的Ｒ巧’ｌＶ￣３００Ｌ０）在本试验Ａｓ处理浓度范围内（０），螺旋藻的生长几乎不受影响，（）雌生物量差异不显著（ｐ＞０．０５）。此外，正常Ｐ条件下，螺旋藻富集的总Ａｓ含量随着ＡｓＶ处理浓度的増加显著増加，且Ａｓ形态均为Ａｓ（Ｖ）。当培养基中Ａｓ（Ｖ）浓度为１５０（）１一帖心处理７ｄ后，螺旋藻宮集的总Ａｓ含量超过了国家碌准限量值，在定程度上造成了爆旋藻保健品的Ａｓ污染。Ｇ）培养环境中Ｐ浓度的降低有助于揉旋藻对Ａｓ的吸收、还原、甲基化和外排。正常Ｐ营养条件下，通过ＰＢＳ清洗可Ｗ明显降低螺旋藻胞外对Ａｓ的吸附，从而减少巧旋藻的Ａｓ污染。２５ 第Ｓ章不同Ｐ浓度对巧旋藻吸附、吸收和转化亚神酸盐的影巧第Ｈ章不同Ｐ巧度对螺旋藻吸附、吸收和转化亚神酸盐的影响自然水体中，Ａｓ主要ＷＡｓ（Ｖ）和Ａｓ（ｍ）无机形态存在，而Ａｓ〇ＩＩ）的毒性约为Ａｓ（Ｖ）的６０倍。研究表明ＡｓＶ还原为Ａｓｍ后外排，Ａｓｉｎ产，生物体能将（）（）对水环境中（）一Ｗａｎ２０４２０生定贡献（，１Ｄｏｕｃｌｅ任＆Ｔｅｒｒ２００２，１１）。ｇ等；ｙ，；张兵等不同藻体能从水体中富集Ａｓ（ｉｎ），对其生长产生不同影响。李妍丽和柯林（２０１２）的研究结果表明，随着Ａｓ（ｍ）处理浓度的増加，小球藻ＣＷｏｒｅ化ｉｓｐ．的生长受抑制作用加强，且ＣＷｏｒｅ／／ａｓｐ．对Ａｓ（ｉｎ）的敏感度大于Ａｓ（Ｖ）。他们认为在微观上Ａｓ可Ｗ通过阻碍生物大分子的重要功能，取代生物大分子的必须金属，改变其活性部位的构象等途径干扰藻体的正常代谢：在宏观上则通过阻碍细胞分离，破坏ＤＮＡ结构；降低叶绿素含量，抑制其光合作用；改变核酸的组成等方式产生毒性效应（李妍丽和柯林，２０１２）。该－’’一１结果与Ｗａｎｇ等（２０１３）研究致，５０＾１１１１〇１七乂５（１１１）抑制了铜绿微囊藻（Ｍｒｃｒｏｃｙｊ／ｚｓａｅｒｗＫＷｆｌ）的生长Ｍａｅｎ／奶ＩＯＭ也表现出对ＡｓＨＩＫａｏｖａ２００８抑，（）巧为敏感。而ｒａｄｊ等（）ｉ，则发现１０ｎｍ〇ｌＩ／Ａｓｒｎ会刺激海水小球藻（ＣＷｏｒｅＷａｓｏ／ｆｎａ）细胞的増长。（）Ｐ作为微藻的主要营养盐之一ＡＶ，参与藻体生长发育的各个代谢过程。由于ｓ（）ＰＡｉ－能和竞争磯酸盐通道进入藻体细胞，而ｓｎ则通过水甘油转运蛋白通道进入微（）－＆Ｒ藻细胞内ＳＨ基团结合在酶蛋白中（Ｂｈａｔｔａｃｈａｉｅｅｏｓｅｎ２００７）。，与ｊ，因此，目前学者们大多关注的是培养基中的Ｐ浓度对微藻Ａｓ（Ｖ）积累与代谢的影响。例如Ｚｈａｎｇ－－ｉｉ？ｕｎｏ．等（２０１４）发现，与正常？营养（２３０ｉｍｏｌＬ）条件相比，低浓度（５ｌＬ）ｆ＾处理能促进集胞藻（砂ｎｅｃ＆ｏｃｙ加Ｓ）对Ａｓ（Ｖ）的吸收。Ａｓ（ＩＩＩ）不通过磯酸盐通道进入藻—内，所Ｗ般认为培养基中Ｐ的浓度不会影响微藻对ＡｓＩＩＩ的积累与代谢。但近来（）’Ｗａｎｇ等（２０１４）研究了Ｐ浓度对莱茵衣藻（Ｃ７舶沈ｊ／ｗｏ／ｗｗｒｅｚｎＡａｒ加７）亚神酸盐的积累、氧化和毒性的影响，发现在相同Ａｓ（ｒａ）处理浓度下，胞外Ｐ的浓度缺乏时藻体内的神含量最高。说明Ｐ浓度的降低也能够促进藻体对Ａｓ（ｉｎ）的吸收。ｓ。螺旋藻细胞生长速度快螺旋藻具有表面积大的特点，能富集水体里的Ａ，随着藻体的正常生长，，培养基中的Ｐ含量日益减少。如果水体遭受Ａｓ田Ｉ）污染并且培养液Ｐ的消耗可能会导致藻体积累的Ａｓ含量増加，藻体富集的Ａｓ可通过食物链进。入人体，威胁人类的健康但是目前有关Ｐ浓度对螺旋藻积累与代谢的影响仍鲜有报道。为了验证上述假设，本试验Ｗ纯顶螺旋藻（衝ｆｎ／献ａ如ｆｌｔｅｗｂ）为研究对象，首先用不同浓度Ａｓ（ｎｉ）处理螺旋藻，分析藻体对Ａｓ（ｍ）的吸附和吸收特化再通２７ 不同巧浓度对巧旋藻神吸附、吸收及转化的影咱研巧过培养基中不同浓度Ｐ和Ａｓ（ｍ）组合处理，检测藻体吸附和吸收的Ａｓ含量及其形态，研巧不同Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ（ｎｉ）积累与代谢的影响。Ｗ期为有关螺旋藻Ｐ与Ａｓ（ＩＩＩ）相互作用的研究奠定基础，同时能为螺旋藻大规模养殖生产中神含量控制提供理论依据。３．１材料与方法３丄１试验材料及培养条件二章２１同第．．１３．１．２试验设计３丄２．１不同巧度Ａｓｍ对螺旋藻生长和Ａｓ富集的影响（）将生长至对数期的螺旋藻接种于１Ｌ锥形瓶中，接种初始ＯＤ５６０ｎｍ约为化２。之后－１分别取２００’ｍＬ藻液于５００址锥形瓶中加入１００、２００、４００、６００咕的１００ｍＬ，ｇＡ—ｉ（ｉｎ５０２００Ａｓ（ｎｉ）母液ＷＮａＡｓ〇２配制），藻液最终ｓ（）浓度分别为、１００、、３００帖Ｌ，并Ｗ不加Ａｓ（ｉｎ）的藻液作为空白对照，处理７ｄ后收集藻体。检测指标化及具体操作ｉ二２丄２２３０〇，Ｉ／Ａｍ步骤同第章．。同时Ｗ不加藻，含ｎｇｓ（）的无菌培养基为试剂空白。－ｉ３００，每天取ｉＬＡｓｍ处理下，有藻和无藻培养基测定Ａｓ形态，科分析培养基中ｊｇ（）Ａｓｍ的氧化情况。（）３．１．２．２不同Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ（ｎｉ）吸附、吸收和转化的影响，过滤收集藻体螺旋藻生长至对数期，用无Ｐ培养基冲洗３遍，接种于无Ｐ培养基中饥饿处理Ｉｄ后，再接种于３种不同Ｐ浓度的培养基中：Ｐｅ、１／２５ＰｊＥ、ｌ＾ＯＰ正－ｉ－ｉ一ＺａＫＨＰＯ－Ｌ－（正常ｒｒｏｕｋ培养基中２４含量为０．５ｇ，即Ｐ正８８．９ｍｇＰＬ）。之后从同－Ｌｉ瓶藻液中分别取２００ｍ藻液于５００ｍＬ锥形瓶中，分别加入４０、６０阵１０００ｍｇＬ１Ａｓｉｎ母液Ａｓｍ３００心－（），使不同Ｐ浓度水平藻液的最终（）浓度分别为２００、帖，即ＰＡｓｍ处理组合如表３－１所示），Ｐｉ处理组为实验对照组。处理７ｄ后用快速滤纸过滤（收获藻体，剩余步骤同２丄２．２。２８ 第己章不同ｐ浓度对巧旋巧吸附、吸收和转化亚种酸盛的巧巧表３－－１不同ＰＡｓ仰嫂ｂＳ组合’Ｔ－－？ａｂｌｅ３１Ｔｈｅ出ｆｅｒｅｎｔＰＡｓｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ虹ｒｕ／ｉｎａ７虹似姑；＆／￣＇Ｐ处理水平Ｐ正１／２５Ｐ正１／５０Ｐ正Ａｓ（ｍ）浓度（惦石２００２００■—－？正２００１／２５？正２００１店０？正３００－Ｐ－－正３００１／２５Ｐ正３００１／５０Ｐ正＾２２３丄３測定项目与方法３丄３．１生物量痴定３．１．３．２藻体总Ａｓ的測定３丄３．３Ａｓ形态提取及測定二１＾＾上部分同第章３丄４数据分析所有数据均采用３次重复的平均值±标准偏差来表示。运用Ｅｘｃｅｌ２０１０和ＳＰＳＳ２０ａｌｔｌ。ｎｅ－ｗａ统计分析软件进行数据处理与分析，用ＳｉｇｍＰｏ２．５作图采用单因素（Ｏｙ－＜＞。ＡＮＯＶＡ）或双因素（ＴｗｏｗａｙＡＮＯＶＡ）方差分析检验差异显著性（／〇．０５）１３．２结果与分析３．２．１不同戒度Ａｓｍ对螺旋藻生物量的影响（）由螺旋藻干重数据（图３－１）ｓｍ处理时可知，在无Ａ（），螺旋藻的生物量最小为１ｍ２．ｍ，５、２１／处理螺旋藻７ｄ后．、１８１ｇ０、１００００、３００雌Ａｓ（），其干重分别増加至１８２７－ｉ￣Ａ１８３．８、１９０．４、１９３．０ｍ０３０〇Ｌｎｉｇ，说明在ｎｇｓ（）处理范围内，随着培养基中Ａｓ（ｍ）。处理的升髙，螺旋藻的生物量呈増加趋势但单因素方差分析结果表明，各浓度Ａｓ（ｆｌ）处理之间螺旋藻的生物量无显著差异（，＞〇．〇５）。巧 不同巧浓度对度旋藻巧吸附、吸化及转化的巧巧研巧２２０．．＊ＩＩ１扣宮％＞？／Ｉ’Ｉ，田１４０．０５０１Ｇ０２００３００Ａｒａ｜＞１／（）ｊｊｙａ？！？（味）３－困１不同巧度Ａｓ仰的ｂ理下螺旋藻的生巧量Ｆ－ｉｒｉｎａａｉｇ．３１ＴｈｅｂｉｏｍａｓｓｏｆＳｐｕｌｐｌｔｅｎｓｉｓｕｎｄｅｒｄｉｆｅｒｅｎｔＡｓＩＩＩｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ（）３．２．２螺旋藻对Ａｓｎｉ（）的氧化’ｌ图３－２３００ＬＡｍ处理３ｄ内培养基中Ａｓ为燥旋藻在ｓ（）（Ｖ的比例。在Ａｓ帖）〇ｎ）ｓｍ．６５％处理１ｄ后，Ａ被氧化了３４；处理２ｄ后，培养基中大部分Ａｓ〇ｎ被氧化（））．。直到试验结束时（７ｄ）（８３７２％）；处理３ｄ后，培养基中全为ＡｓＶ，培养基中均（）—只检测到Ａｓ（Ｖ种Ａｓ形态。从揉旋藻体和无藻试剂空白对Ａｓ（ｎｉ的氧化比例可Ｕｉ））－）看出（图３３，Ａｓｉｎ的氧化仅有８．０２％来源于试剂空白（无菌培养基）的非生物因（）素氧化。综上可Ｗ说明螺旋藻对Ａｓ〇ｎ）有较强的氧化作用。－１２０－￣￣￣￣１００ＩＩＩＩＩ１ＩＩＩＩＡ于Ｔ交８０．巧％４０－＜ｆ口．２０１２３４５６７ＡｓＯＤｗｙｉ＾Ｏｉ）１３－２３００１／乂８图惦（１１１）５１理７（１内培养基中＾＼５（＼〇的化例＇＾＇ｉ－ｔｉｄｉＦ．３２ＴｈｅｅｒｃｅｎａｅｏｆｏｘｚｅｄＡｓＶｉｎｍｅｄｉｕｍｕｎｄｅｒ３００ＬＡｓＩＩＩｔｒｅａｔｍｅｎｔｆｏｒ７ｄｓｇｐｇ（）＾ｇ（）＾３０ 第ｓ章不同ｐ浓度对巧巧藻吸巧、吸枚和转化亚巧度盐的巧巧－１０ＤＩ１工８０－巧６０－ＩＩ山巧２０－Ｊ—１Ｉ１—￣Ｉ０Ｉ１Ａ巧藻巧捆空白困３－３培养巧中巧化的ＡｓＶ比钢（）－３Ｔｈｅｅｒｃｅｎｔａ佩ｔａ巧ｇＪｅｏｆｏｘｉｄｉｚｅｄＡｓＶＺｎ？／血饥曲扭ｄｍｅｄｉｕｍｐｇ（）切毎／３．２．３不同巧度Ａｓｍ对螺旋藻富集Ａｓ的影响（）－ｉ由图３４可１＾＾看出炼旋藻对Ａｓ宫集随＞＾８（１１１）浓度的増大而増加。５０ｉＬＡｓｍｆｇ（）’ｉ，ｋｍ处理螺旋藻７ｄ后，藻体官集的Ａｓ含量为０．５２５ｍｇｇ；当Ａｓ（）处理浓度提高至＇－１１００、２００、３００惦Ｌ，藻体的总Ａｓ含量分剔显著（／Ｋ０．０５）升窩至０．８２９、１．４７１、’ｉ２．２８５ｍＡｇ，单因素方差分析结果表明培养基中Ａｓｍ浓度的増大能著提高藻体ｇ（）＾心１对Ａｓ的宮集。且当Ａｓ（ｍ）处理浓度为２００、３００雌时，藻体富集的Ａｓ含量均严－１‘－。重超过了我国保健（功能）食晶神的限量（ｌ．Ｏｍｇｋｇ）（ＧＢ１６７４０１９９７）不同浓度Ａｓ〇ｎ）处理下，螺旋藻吸附的Ａｓ含里均比藻体吸收的Ａｓ含里高（图３－５Ａ）。从摄旋藻吸附的ｓ含量可抖看出Ａｓｎｉ处理浓度的増加，藻体吸附的，随着（）－ｉＡｓ含量呈増加趋势。当乂與巧处理浓度为５０ｉＬ时，藻细跑表面吸附的Ａｓ含量为ｔｇ－１．０．２８３ｍｇｋＡｓｍ，Ａｓ０．５２８、ｇ；随着（膊度的増加藻体吸附的含呈分别显著増加至０．８化、１．４做ｍｇｋｇ人－５）藻体吸收的Ａｓ含量也呈现出相同趋势（图３，但当Ａｓｆｌ处理浓度为５０和（）１１１００惦心时，藻体吸收的Ａｓ含Ｓ差异不显氧当Ａｓ（ｍ）浓度为２００、３００帖１／时，藻体吸收的巧含量显著増多ｓ－２。从操旋藻胞内的Ａ形态数据（表３）可得，在不同Ａｓ〇ｎ处理条件下，藻体内的Ａｓ形态全为无机Ａｓ，且ＷＡｓ（Ｖ）为主要存在形态。胞）浓度的升离而増加‘ｉ内的Ａｓｍ和Ａｓ（Ｖ含量均随培养基中Ａｓｆｌ，在２００、３００Ｌ（））（）腿３１ 不同巧浓度对煩旋藻神吸附、吸收及转化的影咱研究Ａｓｍ）处理时差异显著。（玉０－Ｚ５？５＾么〇－—逆費ｂ一－１．ＳＩ—Ｉ巧如１－養．０Ｃ－．５門ＩｊＩ—■庄０１５０１００２００３００－｜Ａｓｉｎｉｉ理浓度）（）（峽图３＊４不同巧度Ａｓｍ处理下塚旋藻富集的总神含呈（）３－化ｕｎ巧＆４ＴｈｅｉＡｓａｃｃｕｍｕｌａｔｏｎｏｆ化Ｉ口／；／幻ｄｅｒ出ｆｅｒｅｎｔＡｓｉｎｔｒｅ泊ｍｅｎｔｓ（）注：图中不同小写字母表示各处理间差异显著（Ｐ＜０．０５）。Ｎｏｔｅ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅ７＜０．０５ａｍｏｎｄｉｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．〇）ｇ－１．６１Ａ＾吸收的巧田■ｍｉ１ｌ吸附的巧．２Ｖ：ＪｉｍＩ■Ｌｉｏ．．－ｉ．．．．ＩｌｌＩＬ５０，００２００３００－ｒａＩＡｓ（）４！ｉ理浓度Ｌ（化）－图３５不同巧度ＡｓＩＩＩ处理下螺旋藻吸收和吸附的巧含量（）－Ｆｉ．３５ＴｈｅＡｓａｂｓｏｒｔｉｏｎａｍｅｎｇｎｄａｄｓｏｒｔｉｏｎｏｆＳｉｒｕｌｉｎａｌａｔｅｎｓｉｓｌｕｉｄｅｒｉｆｆｅｒｅｎＡｓＩＩＩｒｅａｓｐｐｐｐｄｔ（ｔｔｔ）：不同小写字母表示不同巧化理间挂旋藻吸收巧的差异显吾（ＫＯ．的）不同大写字母表示各处理间毋旋巧吸附注／，巧的差异显吾〇７＜〇．〇５）。ｉｔｌｔｔｉｔ化ｅｓ＜０．０５Ｎｏｔｅ：Ｄｆｆｅｒｅｎｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｅ巧ｉｎｄｃａｅｄｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ於ｏｆａｂｓｏｒｂｅｄＡｓｉｎ＞１／化化２／ｏＴｃ旭ａｎｄ）如ｐ成ｄｉｆＴｅｒｅｎｔｃ＾ｈａｌｌｅｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈｅ化ｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ＜０．０ｏｆａｄｓｏｒｂｅｄＡｓｉｎｉＶｕ化ｒａａ虹／巧２５１＞ｂｅｔｗｅｅｎ（ｐ巧成ｖａｒ．ｉｏｕｓＰｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ３２ 第兰章不同ｐ浓度对巧旋藻吸附、吸收和转化亚巧酸盐的巧响３－２ＡｓＩＩ表（Ｉ）处理下摄旋藻胞内的Ａｓ形态－如。庐Ｔａｂｌｅ３２ＴｈｅＡｓｓｐｅｃｉｅｓｃｏｎｔｅｎｔｏｆ！＞７／／／如ｅ／ｗｂｕｎｄｅｒ出ｆｅｒｅｎｔＡｓｎｉｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ成（）各Ａｓ形态含＊Ａｓ（ｒａ側理＇ｓ＊＊Ａｓｐｅｃｉｅｓｃｏｎｔｅｎｔｍｋ（ｇｇ）＇Ｔ＊ｒｅａｍｅｎｔｓＱｉｇＬ）ＡｓＩＩＩＤＭＡＭＭＡＡｓＶ（）（）５０ＮＤＮＤＮＤ０．２４２±０．０２４ｃ１００ＮＤＮＤＮＤ０３００±〇．０２０ｃ２０００．０５４±０．０肥ｂＮＤＮＤ０．５５４±〇．１巧ｂ０．０８妇方．００６ａ０．７９４±０．０７７ａ＾＾２２３．２．４不同巧度Ｐ和Ａｓ〇ＩＩ）处理对螺旋藻富集Ａｓ的影响３￣６可知ｉｎ从图，在２００Ａｓ处理的条件下，螺旋藻富集的总Ａｓ含量随Ｐ（）－ｉ供应水平降低显著増加３００？ＬＡｓｍ，帖（）处理时，不同Ｐ处理对螺旋藻富集的Ａｓ含（３－３）可＾？量呈现出相同规律。从双因素方差分析结果表１＾１看出，在相同条件下，不同Ａｓ（ｉｎ）处理浓度显著影响了藻体对Ａｓ的富集；Ｐ和Ａｓ（ｍ）交互作用对螺旋藻Ａｓ的富集量没有显著影响。ＰＡｓＡｓ吸收量的数据（图３－７Ａ从不同和（ｍ）处理对螺旋藻可知），在相同浓度Ａｓ（ｍ）处理的条件下，培养基中Ｐ浓度越低，藻体吸收的Ａｓ含量显著增加，表明降一ＰＡｓｎｉ的吸收３－３Ｐ浓低培养基的浓度能促进藻体对（）。从表可知，在同度处理水平下，藻体吸收的Ａｓ含量随培养基中Ａｓ（ｎｉ）的升高显著增加：但Ｐ和Ａｓ（ｍ）交互作用对螺旋藻Ａｓ的吸收没有显著影响。从螺旋藻对Ａ３－７ＢＡｓＱＩＰ浓度ｓ吸附的情况来看（图），在巧同Ｃ）处理时，不同对螺旋藻的Ａｓ吸附量没有显著影响。但Ａｓ（ｍ）处理浓度的提高能显著増加藻体吸附—ｓ（－Ａ表３３），该结果与３．２．３致。Ｐ和Ａｓ（ｍ交互作用对螺旋藻Ａｓ的吸附量没有显）著影响３－。综合不同处理下螺旋藻吸附和吸收Ａｓ含量的数据（图７Ａ和Ｂ）可知，在Ｐ正条件下，螺旋藻吸附Ａｓ为主；当Ｐ浓度降低至１／２５ＰＩ和１／５０Ｐ时，藻体吸收ＪＥ的Ａｓ占主要部分。３３ 不同稱浓度对巧旋藻巧吸附、吸收及转化的影响研巧５■■■Ｐ正１／２５Ｐ正５ＧＰ■ＺＺＺ１／４１正王ａｊ，％＞３－ｉ內Ｉ－為Ｉ。Ｉ巧２－ＩｉＩＬｉｌＩＩＩ２００３００－ｆｌ化理汲度ＩＡｓ（（）Ｈ＆Ｌ）图３－６不同处理下爆旋藻富集的总神含量－Ｆｌｇ＿３６ＴｈｅａｌＡｓｃｏｎｔｅｎｔｒｅａｍｅｎｔｏｔｏｆｕｎｄｅｒｄｉｆｅｒｅｎｔｔｔｔｓ却：＜不同字母表示相同巧度Ａｓ（ｍ）处理不同Ｐ巧度处理么间爆旋藻査集的神爸童存在显著性差异（．下同注ｐ〇〇５）．，Ｎｏｔｅ：ＴｈｅｄｉｆｅｒｅｎｔｌｅｔｅｒｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｅｒｅｎｃｅｏｆＡｓａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎＣ０打ｔｅｎｔｏｆ丘ｎａｐ虹Ｚｅ／ｗ／ｓａｍｏｎｔｈｅｇｒｅａｅｒｅｎｓａｍｅＡｓ（ｎｉｔｔｍｅｎｔｓａｎｄｄｉｆｔＰｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ＜０．）．０，也ｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ（ｐ巧３－３－５．５］圓Ｐ圓Ｐ：ＡｉＢ．￣￣■３－０＇＊１。开．１３０ｔ１Ｉ／２５Ｐｊ罕？１巧０１ｒ７Ｔ７？１化Ｗ正Ｉ＇－一Ｚ５．ＴＫｒ２．５１＞音ＭＩ／２－ｂ／ｉ＾／言誦…ａａｉ。＾誦互Ｉ円度．，ｉＭ＾ｍｈ〇？？Ｊｍｍｉ＼＼＾化０Ｊ■ＩＩＭ■ＩＩＭ，，，２００３００２００３００－＊ＡＬ＊ｓｍｍｍｆＬＣ）ｗ１／（化）图３－７不同处理下强旋藻吸收（Ａ）和吸附（Ｂ）的巧含童－巧？３７Ｔｈｅ浊ｓｏｒｔＡｉｏｎａｎｄａｄｓｏｒｏｎＡｓＢｃｏｎｔｅｎｔｇｐ（）ｐｔｉｏｆｆｒｗ／ｆｗａ？／幻／ｅ／ＭＷ（）卸／ｕｎｄｅｒｄｉｆｅ托ｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ３４ 第ｓ章不同ｐ浓度对場旋藻吸附、吸收和转化亚神酸盐的巧响３－３ｓ表不同Ａ（ｉｎ）和Ｐ处理对爆旋藻吸附、吸收和富集Ａｓ含里的双因素方差分析－Ｔｗ－ｏｆ孤ｄｍｅｎＴａｂｌｅ３３ｏｗａｙＮＯＶＡｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＡｓｎｉＰｔｒｅａｔｔｓｏｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＡｓａｄｓｏｒｔｉｏｎＡ（）ｐ＊ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｉｎ州／扣。／？／。似ｗｂ成ｍＴＯｉｌＴｒｅａｔｍｅｎｔｓＡｄｓｏｒｐｔｉｏｎＡｂｓｏｒｐｔｉｏｎＡｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ＊？ＰｎｓＡ＊＊＊ｓＩＩＩ（）ＰｘＡｓ（ＩＩＩ）ｎｓｎｓｎｓ？＜０注：表示．０５ｎｓｐ，表示差异不显著。＊Ｎｏｔｅ：ｍｅａｎｓｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆＴｅｒｅｎｃｅａｔ０．０５ｌｅｖｅｌ＜０．０５ｎｓｍｅａｎｓｎｏｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｕｎｄｅｒｄｉｆｉｆｅｒｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．ｇ（ｐ），ｇ３．２．５不同巧度Ｐ和Ａｓ（ｎｉ）对螺旋藻胞内Ａｓ形态的影响－８可Ｗ看出Ｐｓｍ从图３，不同浓度的和Ａ，藻体内均（）处理螺旋藻（＾Ａｓ（Ｖ）为主要形态。在正常Ｐ条件下，胞内只有ＡｓＵＩ和ＡｓＶ两种无机神，培养基中只有ＡｓＶ（）（）（）－ｉ一种形态３００，＼ｉ。当Ｐ浓度降低至１／２５时，２００、ｎｇＬ处理的藻细胞内ｉｓ（ｎ）含量增－－－１１－ｋｂＭＡ３００．加．〇４６、０．０７２ｍ处理的培养基中检测到０．，同时产生〇ｇｇ，腿七４５５帖Ｌ－１Ａｓｉｎ５０Ｐ２００－ＡＭＡ（）。当Ｐ浓度继续降至Ｕ正时，、３００帖Ｌ处理的藻内ｓ（ｍ）和Ｄ含’－ｉｉ０９８’’量分别增加到０．１２０、０．ｍｇｋｇ和０．０８８、０．１４９ｍｇｋｇ，培养基中Ａｓ（ｎｉ）分别为１．０９６、１．１７３表明Ｐ浓度的降低促进了藻体内Ａｓ的还原、甲基化和Ａｓｍ（）的外排过程，且在相同Ｐ（ｌ／２５Ｐｉ和ｙＳＯＰｓ）条件下，Ａｓｍ处理浓度増加，藻体内（）ＤＭＡ含量越多。Ａｓ仰ＤＭＡＩ２－＞＊．５奇么０■ＩＩ：ＩＳ．ｎ巧．養１．０袋拂＾＾．．５Ｉ１ｉ＇—ａｊＬＵＬＪＵＩｄｂｆｆｆｆｆｆ义《《《《《、於／與於Ｉ－Ａｓｐ処ａ（ｒａ）？１）？度（｜江３－－Ｉ图８不同浓度ＰＡｓ（ＩＩ）处理组合下搔旋藻胞内各Ａｓ形态的含量Ｆｉ－８ＩＩｇ？３ＴｈｅＡｓｓｐｅｃｉｅｓｃｏｎｔｅｎｔｏｆ化Ｗ。？／口ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄｕｎｄｅｒｄｉｆｅｒｅｎｔＰａｎｄＡｓＩｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ成／（）３５ 不同巧浓度对爆旋藻巧吸附、吸收及转化的影响研巧３．３讨论与无Ａｓ处理组相比，不同浓度Ａｓ（ｍ）处理后，螺旋藻的生物量有升高的趋势，—ｉ？９９９￣但是变化不明显ｅｎｄｒａｙａｔｍ等（１）２０ｍＬＡｓＩＩＩ，。Ｓｕｈ用１０帖（）处理下小球藻￣（ＣＡ／ｏｒｅ化ｉｖＭ／ｇｗｂ）的生长速率比无Ａｓｎｉ）对照组高１０％５０％。同样地，Ｚｈａｎｇ等（－ｌ？（２０１３）发现１０和３０ｍｌｏｌＬ乂８阻处理刺激海洋真核微藻（Ｏｊ／ｒｅｏｃｏｃｃｕｊ／ａｗＯ细＾（）＞＜５７ｓｉｎｅｓ胞增长巧旅％，他们认为这主要是由于Ａ（）的毒物兴奋效应（Ｈｏｒｍｉｓ）。在本－１试验中０、３００，１９０．４、１９３．０，当Ａｓｍ处理浓度为２０腿Ｌ螺旋藻生物量分别升商至（）ｍｇ，比无神处理组（１８２．１ｍｇ）分别增长了４．６％和６％。－？ｉＡＺｈａｎｇ等（２０１４）研巧表明，集胞藻（妙《ｅｃＡｏ加■？）在２叫ｎｏｌＬｓｍ）处理４化巧（Ｉ后．７ｓｍ３．６％，能将４９％的Ａ氧化成Ａｓ（Ｖ），无藻对照姐Ａｓ（ＩＩ）的氧化仅，他们认为（）！Ａ３００？！／ｓＩＩＩ的氧化主要是由于蓝藻细胞表面及其分泌物的影响。在本实验中，雌（）Ａｓ（ｉｎ）处理螺旋藻Ｉｄ后，３４．６５％Ａｓ（ｍ）被氧化成Ａｓ（Ｖ）；处理２ｄ后，Ａｓ（ｍ）氧化比例升至８３．７２％；处理３ｄ后，培养基中Ａｓ（ｍ）全被氧化为Ａｓ（Ｖ），而试剂空白对照组中Ａｓ（ｍ的化学氧化比例仅占８．０２％。由此看来，藻液中Ａｓ（ｉｎ）的氧化作用主要来源）２０１４。Ｗａｎ（）于螺旋藻藻体，且其氧化能力较强本试验的结果与ｇ等研究莱茵衣藻＇＇？ｉ？ｎｉ１’（ｙ／ｅｗＡａ／ｖ化Ｉ．ＩＣＷａｍｙ況ｗｊｏｎｏ）对Ａｓ氧化作用相似，ＣｗｎＡｗ航Ｚ在３ｘｍｏｌ／（）ｉＡｓ（ｉｎ）处理１ｄ、２ｄ后，Ａｓ（ｉｎ）的氧化率分别为２７％、７９％，处理４ｄ后培养基中无Ａｓｉｎ〇（）螺旋藻细胞表面具有如幾基、经基、氨基等许多活性集团，能结合重金属离子（黄宏霞，２００６）。大量研巧表明（Ｙｉｎ等，２０１１Ｓｕｈｅｎｄｒａａｔｎａ等，１９９９王志忠等，；ｙ；２０１４），微藻富集的Ａｓ含量随培养基中Ａｓ（ｍ）或Ａｓ（Ｖ）处理浓度的増加而増加。徐建ｉ，８０２￣２ｍＩ／Ａｓｒｎ祥（１９９）用．．０ｇ处理螺旋藻，Ａｓｉｎ浓度越高，螺旋藻富集的Ａｓ（）（）－ｉＡｓ，ｋ含量越高，０．２Ａｓ（ｍ）处理时藻体的含量为２．０４ｍｇｇ。本试验结果与前人１一－致，５０３００１／Ａｓｍ处理螺旋藻７ｄＩＩＩ浓度的研究鸭，藻体富集的Ａｓ含量随Ａｓ）（）（－－－１ｉ１‘’且在２００升高从０．５２５ｍｇｋｇ显著升高至２．２８５ｍｇｋｇ，、３００雌Ｌ时藻体积累的－ｉＡｓ含’Ａｓ含量限值量为１．４７１、２．２８５ｍｇｋｇ，严重超过了我国保健品中。藻体总Ａｓ含量増加是由于Ａｓｍ浓度的升高可显著増加藻体对Ａｓ的吸收和吸附。与第二章（）中Ａｓ（Ｖ）浓度对螺旋藻Ａｓ富集影响研巧相比较，Ａｓ（ｒａ）处理的螺旋藻对Ａｓ的吸收量和富集量均比相同浓度Ａｓ（Ｖ）处理时高，而Ａｓ田Ｉ）和Ａｓ（Ｖ）处理对藻体吸附的Ａｓ含量几乎没有影响。由此说明相同浓度Ａｓ（ｍ）和Ａｓ（Ｖ）条件下，螺旋藻对Ａｓ（ｎｉ）的积累作用可能更强。这可能是由于部分Ａｓ（ｍ）直接通过水通道进入藻体，氧化的Ａｓ（Ｖ）通过３６ 第Ｈ章不同Ｐ浓度对爆旋藻吸附、吸收和转化亚押酸盐的影响磯酸盐通道进入藻细胞并积累下来。此外，本试验与之前研巧呈现出相同规律，即乂５仰卿Ａｓ（Ｖ）处理下，螺旋藻体内都乂５（＼〇形态为主，且吸附的Ａｓ含量占较大比＞９例（Ａｓ（ｍ）处理时５３．９％＾３．６９％，Ａｓ（Ｖ）处理时５％）。因此，在螺旋藻的生产养殖—１，中，可通过ＰＢＳ洗脱减少藻体积累的Ａｓ含量，使其低于国家标准限量１．０ｍｇｋｇ。－ｉ２，研究表明，蓝藻（砂在ｎｍｏｌＬＡｓＩＩＩ处理前提下，培养基中无Ｐ（）时，藻体吸收的Ａｓ含量约为正常Ｐ条件时的７．７倍（Ｚｈａｎｇ等，２０１４）。与Ｗａｎｇ等’一（２０１４）研究结果致，培养基的Ｐ浓度降低促进ＣｒｕｎＡｗ讯／７对Ａｓ的吸收。在本实验中，相同Ａｓ（ｍ）处理时，培养基中Ｐ浓度越低，藻体富集的总Ａｓ含量越高，这主要是由于培养基中Ｐ浓度的降低促进了藻体对Ａｓ的吸收，而对藻体吸附的Ａｓ含。Ａｓｍ迅速氧化成ＡｓＶＰ量几乎无影响螺旋藻能够将培养基中，浓度的降低促进（）（）Ｖｍ一ｓ的吸收，的个重要原因了藻体对Ａ这可能是造成低Ｐ促进螺旋藻吸收Ａｓ，（）（）一同时也是藻体降低周围环境Ａｓ田Ｉ的浓度和毒性的个重要机制。）—Ａ１不同Ｐ和ｓｍ处理下，藻体内均ＷＡｓＶ为主要存在形态。２００雌ＬＡｓＩＩＩ（）（）（）处理时，正常Ｐ条件下胞内只存在无机神，Ａｓ（ｍ）占总神比例７．２７％；当Ｐ浓度降低至ｌ／２５Ｐ正时，藻细胞内Ａｓ（ｍ）比例降低至３．９４％，但藻内产生ＤＭＡａ．８１％）；当Ｐ浓度为１／５０Ｐ正时，藻内Ａｓ（ｉｎ）和ＤＭＡ比例分别増加至５．０１％和３．６７％。培养基中ｉＡ，ｓ（ｎｉ）的浓度随Ｐ浓度的降低而增加，未检测到有机神。当Ａｓ（ｎｉ）为３００［ｉｇＩ／时，胞内队及培养基中Ａｓ形态的转化呈现出相似规律。上结果表明，在相同Ａｓ（ｍ）处理时，Ｐ浓度的降低会刺激藻体内Ａｓ还原、甲基化和Ａｓ（ＨＩ）外排作用。这与Ｈｅｌｈｖ巧ｅｒ２００３一ＰＡＶ迅速转化为Ａｍ等（）观点致，在含量丰富时，藻体将吸收的ｓ（）ｓ（）排出；而在Ｐ缺乏时，刺激藻体Ａｓ（Ｖ）还原成Ａｓ（ｍ）后甲基化生成ＭＭＡ和ＤＩＶＴＡ。－ｉ－ＤＭＡ第二章中３００ｉＬ乂３＼〇处理的螺旋藻在１／５０Ｐ１条件。，ｆｇ（下才产生而本章中相同浓度ＡｓＩＩＩ处理的螺旋藻ｌ／２５ＰＤＭＡ，且），当Ｐ浓度降低至ｉ时体内开始产生（ＤＭＡ的含量随Ｐ浓度降低而升高。由此可Ｗ推测，当Ｐ浓度降低时，暴露在ＡｓＩＩＩ（）一中的螺旋藻胞内更容易产生甲基神ｓｍ处理时，部分ＡｓＩＩＩ通过。这可能是由于Ａ（）（）水甘油通道直接进入藻体，在甲基转移酶的作用下最终形成ＤＭＡ（Ｚｈａｎｇ等，２０１３；Ｎａｒａｎｍａｎｄｕｒａ等，２００６）。而用ＡｓＶ处理时’ＡｓＶ进入藻内需要先还原为Ａｓ阻，（）（）（）Ａ一ｓｍ经甲基化作用形成ＭＭＡ，再通过系列代谢再次甲基化形成ＤＭＡＣＫａｒａｄｏｖａ（）ｊ－ｉＡ等２００８；Ｙｉｎ等，２０１１）。此外，相同Ｐ浓度（１／５０Ｐ正）下，３００ＬｓＶ处理的帖（）－１Ａ００ＬＩ５８％螺旋藻ＤＭＡ比例较大（３７．％％），３峭ｓ田）处理的藻细胞内ＤＭＡ仅占５．。由此可Ｗ推测，当培养液中Ｐ浓度降低时ｓＶ，Ａ（）处理的藻体甲基化能力较强。张兵１ＶＤＭＡ等（２０１１）研究表明，１００Ａｓ（）处理集胞藻１２ｄ和１４ｄ后，藻体内３１ＤＭＡ１３３分别占总神的．６０％和４．５％，比相同浓度Ａｓ（ｉｎ）处理的集胞藻胞内高．％３７ 不同巧浓度对巧巧藻巧吸附、吸收及转化的影巧研巧Ａ一和１．０９％。但造成ｓＶ）处理的藻内ＤＭＡ含量较髙的机制尚不清楚，需要进步的（研究。综上可Ｗ推测低Ｐ条件下爆旋藻对Ａｓ〇ｎ的代谢过程为：首先在细胞表面将毒性）较强的Ａｓ（ｍ）氧化为毒性较弱的Ａｓ（Ｖ）；其次低Ｐ环境促进藻体对Ａｓ（Ｖ）的吸收；Ａｓ（Ｖ）进入藻细胞后还原成Ａｓ（ｉｎ）并甲基化形成ＤＭＡ储存在胞内，同时还可Ｗ将Ａｓ（ｎｉ）外排。３．４小结－１ｍ－１ｒａ（１）５０和１００雌ＬＡｓ（处理对塚旋藻生长没有影巧，２００、３００ＬＡｓ）雌（）一处理可Ｗ在定程度上増加强旋藻生物量。（２）螺旋藻对Ａｓ（ｍ具有巧强的氧化作用；藻体对Ａｓ的宮集随着培养基中Ａｓ（ｍ））浓度的提高显著増加，且对Ａｓ的吸附占主要部分，通过ＰＢＳ洗脱可＾１．９％１降低藻体巧Ｗ上的Ａｓ含量。（３）在相同Ａｓ（ｎｉ）处理时，降低培养基的Ｐ浓度会促进藻体对Ａｓ的吸收和胞内Ａｓ（Ｖ）的还原、甲基化及Ａｓ（ｒａ）的外排：在相同低ＰＯ／２５、１／５０Ｐｅ）条件下，Ａｓ〇ｎ）处理浓度的升高也会刺澈上述过程的发生？说 第四章全文总结与展望第四章全文总结与展望４．１全文总结４．１．１不同巧度Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｎｉ）对螺旋藻吸附、吸收和转化Ａｓ的影响在实验室条件下，分别用不同浓度的Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）处理螺旋藻，藻体富集的总神含量均随培养液中Ａｓ处理浓度的升高而增加，这主要是由于藻体吸附和吸收的Ａｓ含量均增加所致。与Ａｓ（Ｖ）处理螺旋藻时相比较，相同浓度Ａｓ（ｉｎ）处理的螺旋藻对Ａｓ—１乂３？的吸收量和富集量较高，而对藻体吸附的含量几乎没有影响。５０、１００ｉＬＡｓＶ＾ｇ（）－ｉＡｓ，，ｍ３００ｍ处理的螺旋藻几乎不吸收Ａｓ）处理的藻体Ａｓ吸收量分别为０．２４２、０．ｋ。（ｇｇ由此看来，相同浓度Ａｓ（ＩＩＩ）和Ａｓ（Ｖ）条件下，螺旋藻对Ａｓ（ｍ）的富集量更大。—ｉ当培养液中Ａｓ浓度超过１５０帖Ｘ时，可能会造成螺旋藻Ａｓ含量超标，威胁人类健康。Ａｓ（ｍ）、Ａｓ（Ｖ）处理下，螺旋藻体内都ＷＡｓ（Ｖ）形态为主，但吸附的Ａｓ含量￣Ａｍ处理时Ａｓ吸附比例为巧．９６３．的，ＡＶ处理时Ａｓ吸附比例占较大比例，ｓ％％ｓ（）（）均大于９５％。因此，在螺旋藻的生产养殖中，可通过ＰＢＳ洗脱减少藻体富集的Ａｓ，－ｉ．使其低于国家标准限量（１ｋ。．０ｍｇｇ）４．１．２不同Ｐ舰宴对螺旋藻积累和代谢Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）的影响在Ｐ不影响螺旋藻生长的前提下，研巧培养基Ｐ浓度的降低对螺旋藻积累和代谢Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｎｉ）的影响。用Ａｓ（Ｖ）处理螺旋藻后，降低培养基中Ｐ的浓度，藻体吸收的Ａｓ含量显著増加，且胞内Ａｓｉｎ和ＤＭＡ含量増加，胞外培养液检测到Ａｓｉｎ，说明（）（）降低Ｐ浓度可促进螺旋藻对Ａｓ（Ｖ）的吸收、还原、甲基化及Ａｓ（ｍ）外排过程。当用Ａｓ（ｍ）处理时，螺旋藻对Ａｓ田Ｉ）具有较强的氧化作化能在３ｄ内将培养基中Ａｓ（ｉｎ）几乎氧化成Ａｓ（Ｖ），降低培养基中Ｐ浓度，藻体吸收的Ａｓ含量也显著増加，从而导致藻体富集的总Ａｓ含量増加，且胞内Ａｓ还原、甲基化和Ａｓ（ｉｎ）外排作用増加。此外，无论是Ａｓ（ｉｎ）还是Ａｓ（Ｖ）处理，当Ｐ浓度降低至１／２５、Ｕ５０Ｐｓ时，藻体内吸收的Ａｓ含量均超过了国家保健品中Ａｓ的限量值，且该部分Ａｓ被藻体吸收不易被去除。因此，在螺旋藻的生产环节中应当注意培养基中Ｐ浓度的监测和Ｐ营养物质的添加。不同Ｐ浓度和Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）处理下，螺旋藻胞内均ＷＡｓ（Ｖ）形态为主，Ｐ浓度的降低促进了藻体内Ａｓ（Ｖ）向Ａｓ（ｎｉ）和ＤＭＡ的转化。在Ａｓ（Ｖ）处理下，仅当Ｐ浓度降３９ 不同巧浓度对螺旋藻神吸附、吸收及转化的影咱研巧低至ｌ＾ＯＰｉＥ时，螺旋藻胞内产生甲基神。而当用Ａｓ（ｍ）处理时，Ｐ浓度降低至１／２５Ｐｊｅ，螺旋藻胞内开始产生ＤＭＡ，且ＤＭＡ的含量随Ｐ浓度的降低（ｙＳＯＰ），Ｉ而増加。但是１Ａ当Ｐ（ｌ／５０Ｐ）、Ａｓ（３００心）浓度相同时ｓＶｉＥ帖，（）处理的螺旋藻甲基Ａｓ比例较大（巧．３５％），而Ａｓ（ｎｉ）处理的藻细胞内甲基Ａｓ仅占５．５８％。上述结果可说明，当培养液中Ｐ浓度降低时，Ａｓ（ｍ）处理的藻体胞内更容易产生甲基神，但Ａｓ（Ｖ）处理的藻体甲基化能力较强。４．２创新么处本文明确了在正常Ｐ条件下，Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）处理的螺旋藻Ｗ吸附的Ａｓ占主要部分，因此可Ｗ通过ＰＢＳ洗脱的方法，明显减少藻体的Ａｓ含量，为螺旋藻生产养殖环节中Ａｓ污染控制提供有效办法。本文较全面地研究和比较了不同Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）积累与代谢的影响，发现降低Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ吸收和代谢产生影响，且对藻体Ａｓｍ吸收的影响较大（）。４．３研究展望（１）本论文只通过螺旋藻的Ａｓ吸附、吸收含量及胞内各Ａｓ形态含量等生理数据，研究了一Ｐ浓度对螺旋藻Ａｓ吸附、吸收及转化的影响，在定程度上说明了螺旋藻对Ａｓ的积累和代谢的过程。但还需从相关基因的表达、酶的活性等方面开展研巧，明确在不同Ｐ和Ａｓ浓度处理时，螺旋藻对Ａｓ的响应机制。（２）本文从螺旋藻保健品Ａｓ污染控制的角度进行研巧，设置的Ａｓ（Ｖ）、Ａｓ（ｍ）浓一些受ＡＶＡｍ度不高。据报道ｓ污染的地下水Ａｓ浓度很高至于在较高浓度的Ａｓ、ｓ，（）（），螺旋藻对乂５的富集与代谢条件下［＾＾及？浓度的影响，是否呈现出相同规律需要进－步研巧。（３）本论文的试验是在实验室内培养的条件下进行的，且处理时间较短，试验结果可能会与室外螺旋藻大规模生产养殖的结果产生一定的差异。因此，本试验结果是否适用于螺旋藻的室外养殖仍需进一步验证研究。４０ 参考文献参考文献ＡｂｅｒｎａｔｈｙＣ０，ＬｉｕＹＰ，ＬｏｎｇｆｅｌｌｏｗＤ，ｅｔａｌ．Ａｒｓｅｎｉｃ；ｈｅａｌｔｈｅｆｆｅｃｔｓ，ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆａｃｔｉｏｎｓ，ａｎｄ－ｒｅ化ａｒｃｈｉｓｓｕｅｓＪ－ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＨｅａｋｈＰｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ１９９９１０７７：５９３５９７．，，（［］）ＡｈｍａｄＡＧｈｕｆｒａｎＲ．ＣｄＡｓＣａａｎｄ之ｎｔｒａｎｓｆｅｒｔｈｒｏｕｄｒｔｏｒｅｈｄｒａｔｅｄｂｓｏＷａｈｉｄＺＡｉｏｍａｓｆ，，，，ｇｈｙｙ却ｚＶｔ／／柄幻幻化Ｗ５Ｗｆｒｏｍｗａｓｔｅｗａｔｅｒ［Ｊ］．ＰｏｌｉｓｈＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｔｕｄｉｅｓ，２０１０，１９（５）：８８７－８９３．良ｅａｒｄａｌｌＪＹｏｕｎＲｏｂｅｒｔｓＳ．Ａｒｏａｃｈｅｓｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｈｔｏｌａｎｋｔｏｎｎｕｔｒｉｅｎｔｉｏｎ．ｌｉｍｉｔａｔ，ｇＥ，ｐｐ呂ｐｙｐ＾］－ＡｕａｔｉｃＳｃｉｅｎｃｅｓ２００１６３１：４４６９ｑ．，，（）＂Ｍ－Ａｖ－ＢｅｎｔａｌＯｒｅｎＳｈａｍｉｒＭｒｏｎＭｅｔａｌ．ａｎｄＣＮＭＲｓｔｕｄｉｅｓｏｆｔｈｅｏｓｏｒｕｓａｎｄｃａｒｂｏｎ，，，ｐｈｐｈｍｅ－ｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｔｈｅｈａｌｏｔｏｌｅｒａｎｔａｌｇａ内加ｅ化ｚｓ幻化ＰｌａｎｔＰｈｓｉｏｌｏ１９８８８７：３２０３２４．＾ｙｇｙ，，口）ＢｈａｔａｃｈａｉｅｅＨ，民ｏｓｅ打ＢＰ．Ａ巧ｅｎｉｃｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｒｏｋａｒｏｔｉｃａｎｄｅｕｋａｒｏｔｉｃｍｉｃｒｏｂｅｓＭ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｊｐｙｙ［］ｍｃｒｏｂｏｆｅａｖｍｅａｓ－ｉｉｏ．ＳｒｎｅｒＢｅｒｎＨｅｅｅｒ２００７３７１４０６ｌｏｈｙｔｌｐｉｌｉｉｄｌｂｇ：．ｇｙｇ，ＢｈｕｍｂｌａＤＫｅｅ化ｒ民Ｆ．Ａｒｓｅｎｉｃｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏ打ａｎｄｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙｉｎｓｏｉｌｓ［Ｍ］．Ｉｎ：ＮｒｉａｇｕＪＯ（ｅｄ）Ａｒｅｅｎｉｃｈ－ｉ打ｔｈｅｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｒｔ１：ｃｃｌｉｎａｎｄｃａｒａｃｔｅｒｉｚ址ｏｎ．ＷｉｌｅＮｅｗＹｏｒｋ１９９４５１８２．，ｐｙｇｙ，ｊ，ｐｐＣｈｕａＹｕＰＨＦＳｉｎＳＮｅｔａｌ－．Ｓｕｂｌｅｔｈａｌｅｆｅｃｔｈｔａｌｓｃｔｉｖａｔｅｄｓｌｕｄｅ，，ｓｏｆｅａｖｙｍｅｏ打ａｇｍｉｃｒｏｏｒａｎｉｓｍｓＪｅｍｏ２６－ｇ．Ｃｈｓｈｅｒｅ１９９９３９１５：８１２６９２．［］ｐ，，（）ＣｅｍｍＭ－Ｏ．ｆｒｗ幻ｅｅｄｅｍｃｒｏｏｒａｎＪｃｒｏｂｃａＲｅｖｅｗ１１：５５５７８．ｉｆ诚ｔｈｉｂｌｉｉｓ．ｉｉｏｌｏｉｌｉｓ９８３１却，ｇ［］ｇ，，（巧ＣｒＴｎ．Ｔｈｅｃｈｅｍｓｔｒａｎｄｎｄｕｓａｌｏｅｎｚｒｕａｅｖｅｗｎｉ拓ｒｉ０ｉｂｏｉＱｂｉｏｉｉｔｒｉｔｔｉａｌｏｆ巧ＡｎｎｕｌＲｉｓｉ，ｙｐ却１％５３９１－Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏ：５０３５２６ｇｙ．，，（）ＣｕｌｌｅｎＷ民ｅｉｉｍｅｒＫＪ．Ａｒｓｅｎｃｓｅｄ姐ｏ打ｉｎｔｈｅｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔＪ．ＣｈｅｍｉｃａｌＲｅｖｉｅｗｓ１９８８％４：氏ｐ［］，乂）７１３－７６４．ＤｅＰｈｉｓＲＶｉｎｃｅｎｚｎＭ．Ｅｘｏｃｅｕａｒｏｓａｃｃｅｍｃａｎｏｂａｃｅｓｓｅｌｉｐｐｉｉｉｌｌｌｌｈａｒｉｄｓｆｒｏｔｒｉａａｎｄｔｈｅｉｒｏｉｂｌ，ｐｙｙｐ－ａｌｉｃａｔｏｎｓＪ．ＦＥＭＳＭｃｒｏｂｏＲｅｖｉｅｗｓ１２２３１５１１７５．ｐｐｉｉｉｌｏｇｙ９９８：［］，，（）ＤｏｓｈｉＲａｙＡ，ＫｏｔｈａｒｉＩＬ．Ｌｉｖｅａｎｄｄｅａｄ助ｒｗ化７。ｓｐ．ｔｏｒｅｍｏｖｅａｒｓｅｎｉｃ（Ｖ）ｆｒｏｍｗａｔｅｒ口］．ｉｌｆ－ＩｎｔｅｒｎａｔｏｎａｌＪｏｕｒｎａｏＰｈｔｏｒｅｍｅｄｉ地ｏ打２００９１１１：５３６４．ｙ，，（）ＤｏｕｃｌｅｆＭＮａ－ＴｅｒｒｙｕｍｉｎｕｔｅｒｓｅｍｃｕｒｅＢｅｃｈｎｏ２００２．Ｎ．ＰｔｈａＪ．ｔｉｏｔｌｏ２０１１：１０９４１０％，ｐｇｏｇｙ，，（［］）ＤＯｎｍｅｚＧ，ＡｋｓｕＺ？民ｅｍｏｖａｌｏｆｃｈｒｏｍｉｕｍ（ＶＩ）ｆｒｏｍｓａｌｉｎｅｗａｓｔｅｗａｔｅｒｓｂｙＤｗｎ幻巧ｅ／／幻ｓｐｅｃｉｅｓ．ＰｒｏｃｅｓｓＢｉ２００２－：１ｉｏｃｈｅｍｉｓｔ３８７５７６２．ｙ，，ＤｕｎｃａｎＥＧ，ＭａｈｅｒＷＡ，ＦｏｓｔｅｒＳＤ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆａｒｓｅｎａｔｅａｎｄｐｈｏｓｐｈａｔｅｅｘｐｏｓｕｒｅｏｎａｒｅｅｎｉｃ’ｍｅｏｎＤｍｗ幻＊ｔａｋｅａｂｏｌｉａｎｄｅｃｉｅｓｆｏｒｍａｉｏｎｉａｒｉｎｅｈｏａｎｋ／ｚｅ／幻ｏｅｃ化ｕｔｓｍｓｔ打ｔｈｅｍｔｌｔ／化／打／口？ｐ，ｐｐｙｐ］２０１３１５７－ＭａｒｉｎｅＣｈｅｍｉｓｔｒ：７８８５．ｙ，，４１ 不同稱浓度对據旋藻神吸附、吸收及转化的影响研究■ｍｏ打ｄＦｒａｎｃｅｓ－ｆｏｒＥｄｓＪＳｃｏｎｉＫＡ．Ａｒｓｅｎｉｃｃｏｎｔａｉｎｉｎｒｉｂｏａｎｏｓｉｄｅｓ：ｉｓｏｌａｔｉｏｎｆｒｏｍｂｒｏｗｎｋｅｌ抗赵０／Ｗ幻，ｇｐｒｏ（友如。ａｎｄｎｕｃｌｅａｒｍａｎｅｔｉｃ巧ｓｏｎａｎｃｅｓｅｃｔｒａＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔＰｅｒｋｉｎｇｐ［］ｙ，Ｔｎｎ１１－ｒａｓａｃｔ：２３８２．ｉｏｓ９８３２３７５，－Ｆａｒｒａｒ．：Ａ化ｃｈｎｏｌｏ１９２１４１３４２ＷＶＴｅｃｕｉｔｌａｔｇｌｉｍ化ｏｆＡｚｔｅｃ化ｏｄｇｙ口］？Ｎａｔｕｒｅ６６１：３．ｐ，，ＦｅｒｇｕｓｏｎＪＦ，ＧａｖｉｓＪ．Ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅａｒｓｅｎｉｃｃｙｃｌｅｉｎｎａｔｕｒａｌｗａｔｅｒｓ［Ｊ］．ＷａｔｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ，１９７２，６（１１）：２５９－１１２７４．ＦｏａｒｒｅｓＥＰｅｒｅｚ－ｍａＭｅｔａｌ．口化ｅＷ幻ｓａ／ｆｗ幻犯ｒｉｎｉｌｈｉｔｌｂｌｒＳＴｏ民ａｍａｅｍｃｒｏａａｏｅｒａｎｔｔｏｕｔａｇ，，，ｇ挪ｙｏｏｒ￣仿ｍｏｖｅｒｏｆｃａｄｉｎｍｏｕｒｎａｏｆＨ犯ａｒｔｌ２００９４９ｐｉｕＪ．ＪｌｄｏｕｓＭａｅｒｉａｓ１６５：４８６３．［］，，Ｆｏｓｔｅｒ８，Ｔｈｏｍｓｏ打Ｄ，ＭａｈｅｒＷ．ＵｐｔａｋｅａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｏｆａｒｓｅｎａｔｅｂｙａｎｅｘｉｃｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆｔｈｅｍｉｃｒｏａｌｇａｅＤｕｎａｌｉｅｌｌａｔｅｒｔｉｏｌｅｃｔａａｎｄＰｈａｅｏｄａｃｔｙｌｕｍｔｒｉｃｏｍｕｔｕｍ［Ｊ］，ＭａｒｉｎｅＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，－１０８３：１７２１８３．（）ＨａｓｅａｗａＨＳｏｈｒｉｎＹ，ＳｅｋｉＫｅｔａｌ．Ｂｉｏｓｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｒｅｌｅａｓｅｏｆｍｅｔｈｌａｒｓｅｎｉｃｃｏｍｏｕｎｄｓｄｕｒｉｎｔｈｅｇ，ｙｙｐｇｏｆａｅｒ％５－ｒｏｗｔｈａａｅｈｅｍｏｓｈｅｒｅ２００４３２ｆｒｅｓｈｗｔｌ．Ｃｐ１：巧．ｇ，，）ｇ口］口ＨａａＫｏｂａａｓｈｕｉ巧ａｌＡｎｅｗｍｅｔａｂｏ－ｋａｗａＴｉＶＣＸｌｉｃａｔｈｗａｏｆａｒｓｅｎｋｅ：ａｒｓｅｎｉｏａｏｎｅ．ｌｕｔｔｈｉｙ，ｙ，，ｐｙｇｃｏｘｅｓａｒｅｓｕｂｓｅｓｆｏｒｈｕｍａｎａｒｓｅｎｉｃｍｅｔｈｌｔｒａｎ拓ｒａｓｅＣｔｌ？Ａｒｃｈｉｖｅｓｏｍｌｅｔｒａｔｙｓｙ９口］ｆＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙｐ，２００５７９４－１１：１８３９．，（）ＨｅｌｌｗｅｇｅｒＦＬ，ＦａｒｌｅｙＫＪ，ＬａｌｌＵ，ｅｔａｌ．Ｇｒｅｅｄｙａｌｇａｅｒｅｄｕｃｅａｒｓｅｎａｔｅ［Ｊ］．ＬｉｍｎｏｌｏｇｙａｎｄＯｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ，２００３４８６２－２２８：巧５义，（）ＨｅｌｌｗｅｇｅｒＦＬ，ＬａｌｌＵ．Ｍｏｄｅｌｉｎｇｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆａｌｇａｌｄｙｎａｍｉｃｓｏｎａｒｓｅｎｉｃｓｐｅｄ姐ｏｎｉｎＬａｋｅＢｉｗａ［Ｊ］．ｒ皮Ｔｅｃｈｎｌ２００４３８２４１６－６７２３Ｅｎｖ．ｉｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅｏｏ：６７ｇｙ，，（）ＨｉｒａｎｏＳ，ＫｏｂａｙａｓｈｉＹ，ＣｕｉＸ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎａｎｄｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｍｅｔｈｙｌａｔｅｄａｒｓｅｎｉｃａｌｓｉｎｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｓｏｆｔｈｉｏｌｃｏｍｐｏｕｎｄｓ［Ｊ．ＴｏｘｉｃｏｌｏａｎｄＡｌｉｅｄＰｈａｒｍａｃｏｌｏ，］ｇｙｐｐｇｙ２００４１３－９８：４５８４６７．，（）ＨｏｗａｒｄＡＧ，ＣｏｍｂｅｒＳＤＷ，ＫｉｆｌｅＤ．Ａｒｓｅｎｉｃｓｐｅｃｉａｔｉｏｎａｎｄｓｅａｓｏｎａｌｃｈａｎｇｅｓｉｎｎｕｔｒｉｅｎｔａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙａｎｄｍｃｒｏ－ａｎａｂｕｎｄａｎｃｅｎＳｏｕｔｈａｍｔｔｅｒｓｔａｎｄｉｌｋｔｏｎｉｐｏｎＷａＵ．Ｋ？口］？ＥｕａｒｉｎｅＣｏａｓｔａｌＳｈｅｌｆｐ，Ｓｃｅｎｃｅ－１４０４４：５４５０．ｉ９９５：Ｊ，，（）ＩｒｏｌｉｃＫＪＷｏｏｌｓｏｎＥＡＳｔｏｃｋｔｏ打Ｒｔａｌ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｎｒｍｅｉｏｏｆａｒｓｅｎｉｃｃｏｍｏｕｎｄｓｆｏｄｂｙｇ，，人ｅｐＤａｐｈｎｉａｍａｇｎａａｎｄＴｅｔｒａｓｅｌｍｉｓｃｈｕｉｉｆｒｏｍｉｎｏｒａｎｉｃａｒｓｅｎａｔｅ．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＨｅａｌｔｈｇ口］Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ，１９７７，１９：６１ＫａｒａｄｏｖａＩＢＳｌａｖｅｖａＶＩＴｓａ．ｅｏｕｒｓｅｅｃｎｅｒｅｅｎｌｅｖＤＬＴｈｂｉｔａｋｅａｎｄｔｏｘｉｃｉｔｏｆａｎｉｃｓｉｅｓｏ也ｊ，ｙｋｏ，ｐｙｐｇｍｉｃｒｏａｌａＣ片／ｏｒｅ／／幻的／加幻２００８２６４￣２７１ｉｎ化ａｗａｔｅｒＪ．ＡｕａｔｉｃＴｏｘｉｃｏｌｏ８７．ｇ［］ｑｇｙ，，：ＫｉｍＭＪ，ＮｒｉａｇｕＪ．Ｏｘｉｄａｔｉｏｎｏｆａｒｓｅｎｋｅｉｎｇｒｏｕｎｄｗａｔｅｒｕｓｉｎｇｏｚｏｎｅａｎｄｏｘｙｇｅｎ［Ｊ］．ＳｃｉｅｎｃｅｏｆｔｈｅＴｏｔａｌＥｎｖｉｒｏｎｍ２０００２４７１７１－７９ｅｎ．ｔ，（）：４２ 參考文献ＫｎａｕｅｒＫ，ＢｅｈｒａＲ，ＨｅｍｏｎｄＨ．ＴｏｘｉｃｉｔｙｏｆｉｎｏｒｇａｎｉｃａｎｄｍｅｔｈｙｌａｔｅｄａｒｓｅｎｉｃｔｏａｌｇａｌｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓｆｒｏｍａｋｅｓａｎｎａＡｕａ－ａｒｅｎｃｎａｍｏｎｒａＪＴｏｘｉｃｏ１４６３２２１２３０ｌｌｏｇａｎｓｉｃｏｔｉｔｉｇｄｉｅｎｔ［］，ｑｔｉｃｌｏｇｙ，９９９，（）；．ＬｅｅＲＥＰｈｃｏｏ．ａｒｓＰｒ２００．ｌｇｙＭＣｍｂｒｉｄｅＵｎｉｖｅｉｔｙｅｓｓ８．ｙ，ｊ］ｇＬｅｖｙＪＬ，ＳｔａｕｂｅｒＪＬ，ＡｄａｍｓＭＳ，ｅｔａｌ．Ｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎａｎｄｍｏｄｅｏｆａｃｔｉｏｎｏｆａｒｓｅｎｉｃｉｎｉｌ／／／ｄｈｄｉＪｉｔｗｏｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｍｃｒｏａｇａｅＣ／２ｏｒｅａｓ．ａｎＭｏｎｏｒａｉｕｍａｒｃｕｔｕｍ）［］．Ｅｎｖｒｏｎｍｅｎｔａｌ（ｐｐ￣ＴｏｘｉｃｏｌｏａｎｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００５２４１０％．：３０２６３９ｇｙｙ，，（）＂ＶａＬＢｆｏｎｏｒａｎｃｃｈｅｍｉＪ．Ｍｅ１．ｉａｒｄＳＪｅｉＪＭ．Ｐｒｉｎｃｉｌｅｏｂｉｉｉｉｓｔｉｌｌｌｌ９９４ｐｐ，ｇｐｇｙｙ，［］Ｍａｎ－ｄａｌＢＫＳｕｚｕｋｉＴｒｓｅｎｃｒｏｕｎｄｅｗｏｒａ忙ｖｅｗＪ．Ｔａａｎａ２００２５８１：２０１２％，Ｋ．Ａｉｔｈｌ出ｉｌｔ．［］＾，（）ｌｉｆｉｆｉｉＭａｒｔｉｎＪＭＷｈｉｔｆｉｅｄＭ．Ｔｈｅｓｉｎｃａｎｃｅｏｔｈｅｒｉｖｅｒｎｔｏｆｃｈｅｍｃａｌｅｌｅｍｅｎｔｓ化化ｅｏｃｅａｎＭ］．，ｇｐｕ［－ＴｒＭｅｔａｌｓｉｎＳｅａｒｉ１．ａｃｅＷａｔｅｒＳｎｅｒＵＳ９８３２６５２９６，：，ｐｇＭｅａｈｌＲＬＣａｍｅｒｏｎＬＬｅｔａｌ．Ａｒｓｅｎｉｃｉｎｄｒｉｎｋｉｎｗａｔｅｒａｎｄｃｅｒｅｂｒｏｖａｓｃｕｌａｒ出ｓｅａｓｅｌｉｋｅｒＪＷ，，呂，ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓａｎｄｋｉｄｎｅｉｓｅａｓｅｉｎＭｉｃｈｉａｎ：ａｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄｍｏｒｔａｌｉｔｒａｔｉｏａｎａｌｓｉｓＪ．，ｙｄｇｙｙ［］ＥｎｖｒｏｎＨｅａ２００７４－：１１．ｉｌ６１化，（）ＭｏｈａｍｅｄＺＡＲｅｍｏｖａｌｏｆｃａｄｍｉｕｍａｎｄｍａｎａｎｅｓｅｂａｎｏｎ－ｔｏｘｉｃｓｔｒａｉｎｏｆｔｈｅｆｒｅｓｈｔｅｒ．ｇｙ．ｗａ－ｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ口Ｊ．ＷａｔｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ２００１３５１８４４０５．ｗａ：４４０９ｙｇ［］＾，（）ＭｏｒａＭＧＲａｒａＭｅＰｏｃａｅｓｅｍｃｏｎｎｕｏｕｓｒｏｏ扣ｉｓｄｍａｎｎＥＭＡｎｄｄｅｔａｌ．ｉｌｔｓｌｉｔｉｄｕｃｔｉｏｎｆｚｎ／／幻，，ｐ成－ｂｉｏｍａｓｓｉｎｓｏｕｔｈｅｒｎＢｒａｚｉｌＪ．Ａｕａｃｕｌｔｕｒｅ２００９２９４１；６０６４．［］ｑ，，（）ＭｏｒｉａｒｔｙＭＭ，ＫｏｃｈＩ，ＧｏｒｄｏｎＲＡ，ｅｔａｌ．Ａｒｓｅｎｉｃｓｐｅｃｉａｔｉｏｎｏｆ化ｒｒｅｓｔｒｉａｌｉｎｖｅｒｔｅｂｒａｔｅｓ［Ｊ］．ＥｎｖｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｉｅｎ＆Ｔｅｃｈｎ￣ｉｃｃｅｏｌｏ２００９４３１３：４８１８４８２３．ｇｙ，，（）ＮａｒａｎｍａｎｄｕｒａＨ，ＳｕｚｕｋｉＮ，ＳｕｚｕｋｉＫＴ．Ｔｒｉｖａｌｅｎｔａｒｓｅｎｉｃａｌｓａｒｅｂｏｕｎｄｔｏｐｒｏｔｅｉｎｓｄｕｒｉｎｇｒｅｄｕｃｔｉｖｅ－ｍｅｔｈｌａｔｎＪ．ＣＲｅｓｅａｒｃｈｎＴｏｘｃｏｏ２００６１８１０１１ｉｏｈｅｍｉｃａｌｉｉｌｇｙ：１００８．ｙ［］，，％）ＮｅｆｆＪＭＥｃｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙｏｆａｒｓｅｎｉｃｉｎｔｈｅｍａｒｉｎｅｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔＪ．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙａｎｄ［］Ｃｈｅｍｉｓｒ９７１６５－ｔｙ：９１７９２７．，巧，（）ＮｉｅＤＭｃｒｏｂｅａｖ－ｍｅｅｓａｎｃｅＡｅｄＭｃｒｏｂｏｏａｎｄＢｏｔｅｃｈｎｏｓ吐ｌｏ１５１：ｉｉａｌｈｙｔａｌｒｉｓｔ．ｐｐｌｉｉｉｌｇｙｉｇｙ９９口］，乂７３０￣７５０．ＮｒｉａＪＯＢｈａｔｔａｃｈａｉａＰＭｕｋｈｅｉｅｅＡＢｅｔａｌ．ＡｒｓｅｎｉｃｕｎｄｗａｅｎａｎｏｖｅＪ．ｉｎｓｏｉｌａｎｄｒｏｔｒｖｉｅｗｇｕ，ｙ，ｊ，ｇ［］＊ＴｒａｃｅＭｅｔａｌｓａｅｒａｍａｎｎｅｎｖｒｏｎｍｅｎ２００７９：３．ｎｄＯｔｈＣｏ打ｔｉｎｔｓｉｔｈＥｉｔ６０，，Ｏｒ－ｅｍｌａｎｄ民ＳＳｔｏｌｚＪＦ．ＴｈｅｅｃｏｌｏｏｆｒｓｅＪＳ２００３３００５６２１９３９９４４．ａｍｃ．ｃｉｅｎｃｅ：，ｇｙ［］，，（）ｆ－ＰａｌＴＭｕｋｈｅｉｅｅＰＫＳｅｎｕｔａＳａｉｌＢｌｉ．ＮａｔｕｒｅｏｒｓｅｎｃｏｌｕｔａｎｔｓｉｎｒｏｕｎｄｗａｔｅｒｏｆｅｎａｂａｓｎＡｃａｓｅ，ｊ，ｇｐｐｇｇｓｔｕｄｆｒＢａｍｉｒｒｅａｅｓｔｕｒｒｅｎｔＳｃｉｅｎｃｅ－ｏｍｕＢｅｎａｌＩｎ出ａ２００２８２（５５５４％ｌ．ｙａＷ．Ｃ）：ｐ＾ｇ，口］，，ｕｄｅＪ－ＰａｒｋｅｒＤＬＳｃｈｒａｍＢＰｌＬｅｔａｌ．Ｅｆｅｃｔｏｆｍｅｔａｌｃａｔｉｏｎｓｏｎｔｈｅｖｉｓｃｏｓｉｔｏｆａｅｃｔｉ打ｌｉｋｅ，，ｙｐ－ｓｕａｎｏｂａｃｅｒｍＣ３Ｊ．Ａｉｃｌａｒｏｌｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍ化ｅｃｙｔｉｕＭ心加ｓ幻ｗ幻ｅ４０ｌｅｄａｎｄ坪ｐｙ加ｇ［］ｐｐＥｎｖＭ９９６４１２０８－ｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１，６２（）：口１３．４３ 不同稱浓度对授旋藻巧吸附、吸收及转化的影响研巧ＰｈｉｌｌｉｐｓＤＪＨ，ＤｅｐｌｅｄｇｅＭ￥ＬＭｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｓｉｎｖｏｌｖｉｎｇａｒｓｅｎｉｃｉｎｍａｒｉｎｅｏｒｇａｎｉｓｍｓ：ａｕｎｉｆｙｉｎｇＲｅｓｅａｒｃ１ｎ－ｈＭ：２ｏｔｈｅｓｉｓＪ．ａｒｉｎｅＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｈ＾９８５，１１．ｙｐ［］ｙ）ｒｓＰａｗｒｏｎｓｋ－ＰｉｚｅｌＪｌｉｋＢＳｋｏｗｉＴ．Ｃａｔｉｏｎｅｘｃｈａｎｅｃａａｃｉｔｆａｌａｅａｎｄｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ；ａａｒａｍｅｔｅｒｏｆ，，ｇｐｙｏｇｙｐｎ－－ｔｈｅｉｒｍｅｔａｌｓｏｒｐｔｉｏａｂｉｌｉｔｉｅｓＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ１９９５１４３４：３１９３２２．［］，，（）ｎＪＺｈａｎＹ巧ｌＡｉｓｅｎｉｃｄｅｔｏｘｉ巧ｃａｔｉｏｎａｎｄｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｔｒｉｍｅｔｈｌａｒｉａＱｉ民ｏｓｅｎＢ？ａ．ｓｎｅａｓｂ，，ｇ，ｙｇｙｍｃｒｏｂａａｒｓｅｎｅＳ－ａｄｅｎｏＰｉｉｌｉｔｓｌｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅｍｅｔｈｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅＪ．ｒｏｃｅｅｄｉｎｓｏｆｔｈｅＮａｄｏｔｉａｌｙｙ［］ｇ２００６－ＡｃａｄｅｍｏｆＳｄｅｎｃｅｓｏｆｔｈｅＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓｏｆＡｍｅｒｉｃａ１０３７２０７５２０８０．ｙ５，（）：ＱｎＪＬｅｈｒＣＲＹｕａｎＣＧｅｔａｌ．ＢｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆａｒｓｅｎｉｃｂａＹｅｌｌｏｗｓｔｏｎｅｔｈｅｒｍｏａｃｉｄｏｈｉｌｉｃｉ，，，ｙｐｅｕｋａｒｙｏｔｉｃａｌｇａ口］．Ｐｒｏｃｅｅ出ｎｇｓｏｆｔｈｅＮ姐ｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓｏｆｔｈｅＵｎｈｅｄＳｔａｔｅｓｏｆＡｍｅｒｉｃａ２００９１０６３２１－１１：５３５２７．，，（）ＲｃｈｍｏｎｄＨａｎｄｂｏｏｋｏｆａｎｄｏｅｃｈｎｏＭ．ｉＡＨｕ．ｍｉｃｒｏａｌａｌｃｕｌｔｕｒｅ：ａｌｉｅｄｈｙｃｏｌｏｇｙｂｉｔｌｏＪｏｈｎ，Ｑｇｐｐｐｇｙ［］４９５ＷｉｋａｎｄＳｏｎｓ２０１３．ｙ，，ｐｐＲｏｓｅａｒｓｅｎ－打ＢＰ．ＦａｍｉｌｉｅｓｏｆｉｃｔｒａｎｓｏｒｔｅｒｓＪ］．ＴｒｅｎｄｓｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏ１９９９７５：２０７２１２．ｐ［ｇｙ，，（）ＳｈａｒｍａＶＫ，ＳｏｈｎＭ．Ａｑｕａｔｉｃａｒｓｅｎｉｃ：ｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ＾ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ａｎｄｒｅｍｅ出ａｔｉｏｎＪ．［］Ｅｎｖ－ｉｒｏｎｍｅｎｔＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ２００９３５４：７４３７５乂，，（）ＳｈＺｈａＳｅｔａｌ．ＡｒｎｉｃｅｒａｎｄｚｉｎｃｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎｉｎｓｏｉｌａｎｄｗｈｅａｔｄｕｒｉｎｃｏａｌｉＧＬＬｏｕＬｎｇｓｅ，ｏ，，Ｑ，，ｃｐｐｇｍｉｎｉｎｉｔｈａｓｓｅ巧虹ｅｎｔｏｆｈｅａｌｔｈｒｉｓｋｓｆｏｒｔｈｅｉｎｈａｂｉｔａｎｔｓｏｆＨｕａｉｂｅｉＣｈｉｎａＪ．Ｅｉｎｍｅｎｔａｌｇ，ｎｖｒｏ，ｗ［］－ＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｏｌｌｕｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ２０１３２０１：８４３５８４４５．，，（巧ＳｍｅｄｌｅｙＰＬ，ＫｉｎｎｉｂｕｒｇｈＤＧ．Ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｓｏｕｒｃｅ，ｂｅｈａｖｉｏｕｒａｎｄ出ｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆａｒｓｅｎｉｃｉｎｎａｔｕｒａｌ－ｗａｔｅ巧．ＡｌｉｅｄＧｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ２００２１７５：５１７５６８．口］ｐｐ，，（）ＯｈｋｉＴ．ＡＳｕｈｅｎｄｒａｙａｔｎａｉ人Ｋｕｒｏｗａｔａｌｒｓｅｎｉｃｃｏｍｏｕｎｄｓｉｎｔｈｅｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｒｅｅ打ｍｉｃｒｏａｌ＾，ｅｐｇｇａ．ＣＡ／ｏｒｅ／／幻ｖｗ幻口５ａｆｔｅｒｅｘｏｓｕｒｅ化ａｉｓｅｎｉｔｅ口．ＡｌｉｅｄＯｒａｎｏｍｅｔａｌＨｃＣｈｅｍｉｓｔｒ１９９９１３：接ｐ］ｐｐｇｙ，，口）１２７－１３３．Ｔａｎｃｈａｒｏｅｎｎｉｔｃｈａ－ｔｉＭＲｅｕｃｈａｗａｌｉＭＢｏｏ打ａｇＢｅｔａｌ．Ｏｔｉｍｉｚａｔｉｏ打ｏｆｌｉｎｏｌｅｎｉｃａｃｉｄ，ｇ，，ｐｙ（ＧＬＡ）ＡＰｈ－３００ｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ幻＜３ｗ！ｓＪ．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆｌｉｅｄｃｏｌｏ１９９４６３２９５．ｐ如似［］ｙｇｙ，，（）：却ｐｐＴｉｎｇＹＰ，ＰｒｉｎｃｅＩＧ，ＬａｗｓｏｎＦ．ＵｐｔａｋｅｏｆｃａｄｍｉｕｍａｎｄｚｉｎｃｂｙｔｈｅａｌｇａＣｈｌｏｒｅｌｌａｖｕｌｇａｒｉｓ：ＩＩ．－Ｂ１１３７５４５－５５Ｍｕｌｔｉ．ｉｏｎｓｉｔｕａｔｉｏｎＪ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏａｎｄｉｏｅｎｉｎｅｅｒｉｎ９９：４４，，［］ｇｙｇｇ（）ＴｕＣ，ＭａＬＱ，ＢｏｎｄａｄａＢ．ＡｒｓｅｎｉｃａｃｃｕｎｍｌａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｈｙｐｅｒａｃｃｕｍｕｌａｔｏｒＣｈｉｎ的ｅｂｒａｋｅａｎｄｉｔｓ．ｌｉｚｏｔｅｎｔｉａｌｆｏｒｈｔｏｒｅｍｅｄｉ址ｏｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＱｕａｌｉｔ２００２加地ｏｎ口］ｙ，３１：ｐｐｙ，（巧－１６７１１６７５．ＷａｎｇＮＸ，ＨｕａｎｇＢ，ＸｕＳ，ｅｔａｌ．ＥｆｉＦｅｃｔｓｏｆｎｉｔｒｏｇｅｎａｎｄｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓｏｎａｒｓｅｎｉｔｅａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ，ｎｘ－ｏｘｎｉＣｈｌａｍｏｍｏｎａｓｒｅｉｎｈａｒｄｔｉｉＳ．Ａｔｉｃｉｃｏｌｏ２０１４１１１ｉｄａｔｉｏａｎｄｔｏｘｉｃｉｔｙｙｄ＼＼ｑｕａＴｏ５７：６７７４，ｇｙ，，ＷａｎｇＺＨ，ＬｕｏＺＸ，ＶａｎＣＺ．Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ＾ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ＾ａｎｄｒｅｌｅａｓｅｏｆｉｎｏｒｇａｎｉｃａｒｓｅｍｃｂｙｔｈｅ４４ 参考文献ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒｃｙａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍＭｃｒｏｑｙｓｄｓａｅｒｕｇｉ打ｏｓ幻町ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｏｌｌｕｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ２０１３２０１０－：７２８６７：２９５．＾，（）ＷｙｋｏｆＤＤ，口ａｖｉｅｓＪＰ，Ｍｅｌｉｓｅｔａｌ．Ｔｈｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｅｌｅｃｔｒｏｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｄｕｒｉｎｇｎｕｏ－ｔｒｉｅｎｔｄｅｒｉｖａｔｉｏｎｉ／ｎ成ｚｓｒｅｚｎ／ｉｏｒｃＪ．ＰｌａｎｔＰｈｓｉｏ１１１７１１ｎＣＷｏｙ加姑ｚｌｇｙ９９８：口９３乂ｐ［］ｙ，，（）ＸｕｅＨＢ，ＳｉｇｇＬ．Ｂｉｎ出ｎｇｏｆＣｕ口１）化ａｌｇａｅｉｎａｍｅｔａｌｂｕｆｅｒ口］．ＷａｔｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ，１９９０，２４（９）：－１１２９１１３６．ＹａｍａｏｋａＹ，ＴａｋｉｍｕｒａＯ，Ｆｕｓｅ＆巧ａｌ．Ｅｆｅｃｔｏｆｇｊｕｔａｔｈｉｏｎｅｏｎａｒｓｅ打ｉｃａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｂｙ幻扣ｅ仏Ｉ－ｓ口／ｚ＞ｗＪ．ＡｉｅｄＯｒａｎｏｎｌｉｉｉｓｒ１９９９１３８９９４ａｌｇｉｅｔａｌｃＣｈｅｎｔｙ：．｛］ｐｐ，，ＹｉｎＸＸ，Ｃｈｅｎ？！，ＱｉｎＪ，ｅｔａｌ．技ｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏ打ａｎｄｖｏｌａｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｒｓｅｎｉｃｂｙｔｈｒｅｅｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃｏ－ｃ：ａｎｏｂａｃｔｅｒｉａ．ＰｌａｎｔＰｈｓｉｏ２０１１５：１．ｙｙｌｇｙ１６１树１６３８口］，，ＺａｒｒｏｕｋＣ．ＩｎｆｌｕｅｎｃｅｄｅｄｉｖｅｒｓｆａｃｔｅｕｒｓｐｈｙｓｉｑｕｅｓｅｔｃｈｉｍｉｑｕｅｓｓｕｒｌａｃｒｏｉｓｓａｎｃｅｅｔｌａｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｓｅｄｅＪ．Ｕｎｉｖｃ広ｆＰａ１．乃幻／ｗａｘｚ＞ｗａｉｔｒｉｓＦｒａｎｃｅ９Ｇ６：，［］ｙｏ－ＺｈａｎＳＹＲｅｎｓｈｕ．ｉｍｅｄｉｄｉｄｉｉｌｂｉｎＣＺＹＧＣａｎｏｂａｃ化ｒａａｔｅａｒｓｅｎｃｒｅｄｏｘｎａｍｃｓｓｒｅｇ，ｇ，ｙｙｇｕａｔｅｄｙｐｈｏｓｐｈａｔｅｉｎａｑｕａｔｉｃｅｍｄｒｏｎｍｅｎｔｓ口］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１４，４８（２）：￣１０００９９４．ＺｈａｎｇＳＹ，ＳｕｎＧＸ，ＹｉｎＸＸ，ｅｔａｌ．Ｂｉｏｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎａｎｄｖｏｌａｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆａｒｓｅｎｉｃｂｙｔｈｅｍａｒｉｎｅ？－巧ｍｉｃｒｏａｌｇａｅＱｓ化ｅｏｃｏｃｃＭｓｔｏｗｒｚ．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ２０１３９３：４７．的，，ｙ）ＺｈａｎｇＸ，ＬｉｎＡＪ，ＺｈａｏＦＪ，巧ａｌ．Ａｒｓｅｎｉｃａｃｃｕｍ山ａｔｉｏｎｂｙｔｈｅａｑｕａｔｉｃ拓ｍ■＾之〇／／幻：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｉＡＡａｒｓｅｎａｔｅｕｔａｋｅｅｃｉａｔ．ｃａｒｏｌｉｎｉａｎａａｎｄ．ｌｉｃｕｌｏｉｄｅｓＪ，Ｅｎｖｉｒｔｌｐ，ｓｐｏｎａｎｄｅｆｆｌｕｘｂｙｆｉ［＼ｏｎｍｅｎａＰｏｌｕｔｉｏｎ２００８１５３－：１１４１１ｌ６９５５．，，（）ＺｈａｎｇＷ，ＣａｉＹ，ＴｕＣ，ｅｔａｌ．Ａｒｓｅｎｉｃｓｐｅｄ姐ｏｎａｎｄｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏ打ｉｎａｎａｒｓｅｎｉｃｈｙｐｅｒａｃｃｕｍｕｌａｔｉｎｇｐｌａｎｔ［Ｊ］．ａＥｎｖ－ＳｃｉｅｎｃｅｏｆｔｈｅＴｏｔｌｉｒｏｎｍｅｎｔ２００２３００１：１６７１７７．，（）鲍巧瑶．微藻培养过程的营养优化与控制研巧Ｄ工大学２０１２［］．华南理．，．２００９２１２／３：陈保卫．，那仁满都拉，吕美玲，等神的代谢机制、毒性和生物监测阴化学进展，，（）４７４－４８２Ｍ．１９陈峰．北京：中国轻工业出版社９９．，姜悦微藻生物技术［］，－Ｊ陈辉．干．，闻捷，李春野，等法消化原子巧光光谱法同时测定螺旋藻粉中神和泌［］中国卫生检２０２１２２－２５８５１３３：５８３．验杂志，，（）Ｊ．１９９８２９：董顺玲．中国药科大学学报流动注射氨化物原子吸收法测定螺旋藻片中神的含量［］，，（巧４７－７４３４．－郭华明．２００７２２１１：１１０９Ｕ１７．，杨素珍，沈照理富神地下水研究进展化地球科学进展，，（）－国家技术蓝督局．ＧＢ１６７４０１９９７保健（功能）食品通用标准问．１９９７胡海燕，张静，徐晶，等．螺旋藻培养液中碳，氮，憐的优化及其效应评价［叮食品科技，２０１２，４５ 不同巧浓度对螺旋藻神吸附、吸收及转化的影巧研巧３７２９－１：３３（）．北京：科学出版社２０的胡鸿钩．螺旋藻生物学及生物技术原理［Ｍ］．，２００９２＊１２胡立刚．Ｊ．化：４５８４６６，，蔡勇神的生物地球化学［］学进展，，（）２＋２＋ｕＣｄ２００６．黄宏霞．和．华中农业大学纯顶螺旋藻对Ｃ吸附特性的研究［Ｄ］，．Ｊ．１９９５１６４４３＾７黄圣基：．，万青螺旋藻的营养成分［］食品研究与开发，，（）．．２００６贾顺义不同盐度及氮憐浓度对紫球藻生长代谢的影响［Ｄ］大连理工大学．，２０口３１５２６－．：３１．金雪莲，任猜，夏峰我国河流湖泊神污染研巧进展［可环境科学导刊，，（）金月梅．氮碟限制对８株微藻叶绿素巧光特性及生长的影响［Ｄ］．中国海洋大学，２００８．李宝祐不同稱浓度下神对小球藻ＣＡ／ｏｒｅ化ＩＶＵ如ｚｒｉｓ的生物效应阿．中国海洋大学，２０１２．．Ｄ２００９氮．暨．李斌、磯等环境因子对有害赤潮生物海洋卡盾藻的生理生态效应［］南大学，－．北京５李定梅．螺旋藻：中国农业科技出版社１９９．全球人类最理想的食品［Ｍ］，李妍丽ＡｓＩＩＩ和ＡｓＶ网小球藻ＣＷｏｒｅ化ｚｓ．的生长影响研究町环境科学与技术２０１２，柯化（）（（ｐ），，－７０３５１２：６１．（）２０口．．微型绿藻对巧污染水体的生物修复研巧Ｐ］．华南理工大学李妍丽，－Ｊ．２００１１８２２刘惠芳．螺旋藻在饲料工业中的应用［动物科学与动物医学：６６５．］，，（）－．地下水神污染形成机制研巧进展Ｊ２０３０１：７７８３．罗婷．环境化１１，景传勇［］学，，（）潘晓华．Ｊ．，石庆华，郭进耀，等无机磯对植物叶片光合作用的影响及其机理的研究进展［］植物营１９９７３３２０．养与肥料学报：１，，（）石晓勇．Ｊ．．，沙珍霞纯顶螺旋藻营养生理的研究ｍ纯顶螺旋藻对稱酸盐的吸收利用［］海洋水产研２０００２１３２３－巧：巧．，，（）施永宁，陈善坤．不同憐酸氯二钟用量培养螺旋藻的试验研巧［Ｊ］．江西农业大学学报，１９８９，－１：２５２９．－孙賤范晓．９９６５２４２７．：．，海藻中神的含量分布特征ｍ海洋科学，１，宋丽娜．．环，郑晓宇，顾詠洁，等稱浓度对海详小球藻叶绿素巧光及生长的影响ｍ境污染与防治，２０２０－２４１０３２８：．，（）田丹，赵文，魏杰，等．蛋白核小球藻对铅、箱和隶吸附速率及其影响因素的研巧ｍ．农业环境科２０１１３０２２－２５５３学学报，，（１）：５４８．汪宁欣．无机神在淡水浮游植物和动物中的富集与毒性效应研巧［Ｄ］．南京大学２０１４．，ｄＣｄ２００６．．螺旋藻对Ｃ的生理应答及活体藻细胞摄能力研巧Ｐ］．畳南大学王宏叶，王静．铜绿微葵藻中神的代谢与生物效应［Ｄ］．天津大学，２０１２．王世亮刘少卿等．２０１王萍．巧的发生、形态、污染源及地球化学循环Ｊ环境科学与技术，，，［］，化－９７３３７９０．（）：张春华王淑等．环境科学２０１３３４１１：王亚．带茜盐藻对不同形态神的富集和转化研巧Ｊ，，，［］，，（）４６ 参考文献４２５７－４２６５．王亚－．，张春华，申连玉，等高效液相色谱／氨化物发生原子巧光光谱法检测微藻中的神形态的．－分析科学学报，２０１４１３０１．：２２５，（）．去除水体中神的研巧进展与展望円．环境科学与技术２０王颖，吕斯丹，李辛，等，１０，巧９：（）－１０２１０７．王振红专溪车靠靠．Ｊ．中，罗，，等不同務水平下铜绿微巧藻对神酸盐的吸收和净化［］国环境科学，２０－１５３５２：５３３５３８．，（）王志忠刘果厚巩东辉等．鄂尔多斯碱湖鈍顶螺旋藻粉神的来源追踪［Ｊ．中国农学通报２０１２，，，］，，２８１１１０８－１１１：．（）王志也刘果厚２０－巩东保等．不同来源纯顶螺旋藻神富集特性化科技导报１４：３７４０．，，巧巧－吴吿谢明瓦杨倩等．神污染微生物修复的进展研究町环境科学２０１１３２３：８１７８２４．，，（）Ｖ１９９５ａ７６－肖虹察史致丽的还原作用机海洋学报Ｊ：１３２１３６赵夕旦．藻类对神．，（），（）史致丽■等．１ｌ肖虹滨赵夕旦．神对三角褐指藻、叉边金藻生长率的影响口］海洋科学９９５ｂ：，，，，（）－５２４７．２００－１２０１：７１７６肖唐化洪冰．，杨中华，貧神的水地球化学及其环境效应町地质科技情化，（）徐建祥．螺旋藻的藻种选育及其生长特性的研巧［Ｄ］．华南理工大学，１９９８．．凸１生物富集及其对纯顶螺旋藻生长的影响Ｊ许文涛，，王颖，罗云波，等＜巧在鈍顶螺旋藻中的［］２００９３０５－食品科学：１５３１５７．，，（）－Ｄ．０１２．氮磯培养条件对栅藻ＳＰ０１的生长和代谢产物的影响［］中山大学２．薛敏，Ｊ２００９－：７１７６９杨靖．．生态毒理．４６．，朱永官微生物神代谢机制的研巧进展［］学报，（０、．破对螺旋藻的生理生化效应及富破螺旋藻的培养研巧．厦口大学２００２．杨屯宁［Ｄ］，２０．杨堇堇．极大螺旋藻高浓度培养及生物富洒的研巧［Ｄ］．中国海详大学１１，杨胜科，王文科，张威，等．神污染生态效应及水±体系中神的治理对策研究［Ｊ］．地球科学与环境２００４２６３－学报：的７３．，，Ｃ）袁晓雄，杨淑乾螺旋藻的养殖与加工［Ｍ］．北京：中国农业科技出版社，１９９７．’张兵王利红．ｅｃｈｏ巧加Ｓｓ．ＰＣＣ６８０３，徐玉新，等集胞藻（柳ｐ树神吸收转化特性的初步研巧化２０－生态毒理学报１１６６：６２９６的．，，（）张静）．螺旋藻培养液中碳、氮、磯的优化及加工方式对营养成分含量影响研巧圧］．内蒙古农业大学２０１１．，韦朝阳．０１３张楠，杨林生淡水湖泊生态系统中神的赋存与转化行为研巧进展［可生态学报，２，，３３２３３７－３４７．：（）张思宇孙国新贾炎．仇／ｒｅｏｃｏｃｃｕｊｔｏ／ｒｉ对，，海洋真核微藻神的解毒机制研究［订环境科学学报，３３１０２８７９－２８８４如１３：：．，（）４７ 不同巧浓巧对ｇ巧藻巧吸附、吸收及转化的影巧研巧０１２４－．巧旋巧食品质量安全现状与分析町包装与食品机械，２３０张晓燕，刘祗周德庆，（）：５０５３．赵艳芳，俞志明，宋秀巧，等．不同巧源形态巧中肋骨条藻和东海原甲巧生长及巧酸醇活性的影巧２００９３０３￣：６９３６９９．町环巧科学，，（）－．ＧＢ５７４９２００６生活饮用水玉生标准Ｓ．６中华人民共和国卫生部［］２００．－中华人民共和国国家质量监巧检验检疫总局．ＳＮ／Ｔ１１１３２００２进出口巧旋藻粉中巧巧蛋白、叶绿素含量的测定方法［Ｓ］．２００２．周志刚．云，李朋含，刘志礼，等种巧巧巧及其蛋白质、多巧和脂类结合巧的研巧［Ｊ］．海洋与湖沼，－１９９７２８４：３货３７０．，（）供 攻读学位期间发表的学术论文攻读学位期间发表的学术论文１．刘联王亚．不同稱浓度对巧顶巧旋熟及附、吸收和转化神酸盐王巧，许平平，张春华，巧沒，的巧咱［化农业环巧科学学报录用待刊．，２．王化张春华，王親申连玉，巧渣．带茵盐巧对不同形态巧的宙集和转化的研巧化环境科＃２０－１３３４１１）：１２０１２８，，（３－．王亚张春华申连玉，王淑萬涅．巧效液相色谱／备化物发生，，，原子巧光光谱法检测巧巧中的神形态ｍ－．分析科学学报２０１４３０１）：Ｕ２５，，（巧 致ｍ致谢２０１５６月年，我即将研究生毕业、离开美丽又宁静的校圍，踏入社会开启自己的新篇章。回首过去兰年，我收获了很多，也成长了很多。送要感谢我身边所有的朋友与亲人。我首先要非常感谢我的导师葛沒老师。在他的悉也指导下，我的科研文献阅。本文的选题读能力、实验操作及科研论文写作能力都得到了很大地提髙、方案的确定、试验开展及论文撰写无不凝聚了他的也血，在实验过程中遇到的具体实验操作等问題一，巧老师都十分耐也的给予了帮助与指导。在每两周次的课題组汇报中，通过课题组内的讨论，自己的演讲和沟通能力也得到了很多地锻炼和提髙。所在此非常感谢导师给予的这些宝贵机会。本文研巧工作是在南京农业大学海洋生物学实验室和南京农业大学生命科学实验中也完成的，试验的顺利进行离不开各位老师和同学们的帮助。感谢张春华老师对实验方法及仪器操作的耐也指导，感谢王长海、赵耕毛、马晶等老师，吴泽贏、陈雪、刘丹青、王亚、陈雷、尤惜、徐瑶、庞晓辰、杨亚洲、许平平、刘聪、李思、唐瞧、郑燕恒同学化及所有朋友们的帮助与陪伴一。正因为有这样个团结、友爱和有凝聚力的团体，我的实验才能得顺利且圆满完成。一我还要特别感谢自己的家人？送些年来，他们直在背后默默支持着我，鼓励着一一我，让我度过了个又个的难关。感谢你们！在这个特殊的时刻里，千言万语都不足Ｗ表达我内也的感激之情。而我也即将带一！着这颗感恩的必踏上新的征程，朋友们，起加油，为自己的明天而努力王淑二〇—五年六月５１
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